益母草碱抑制ERK/NF-κB信号通路对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:观察益母草碱抑制细胞外调节蛋白激酶(ERK)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:将大鼠随机分为Control组、HF组,低剂量益母草碱(L-益母草碱)组、高剂量益母草碱(H-益母草碱)组及ERK抑制剂组。采用腹腔注射阿霉素法建立HF模型,HF模型建立成功后根据分组进行给药干预,连续14 d。利用彩色多普勒动物超声仪测量心功能指标[左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室短轴缩短率(LVFS)]变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况;免疫组化法检测心肌组织凋亡相关蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织ERK/NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果:与Control组比较,HF组LVEF、LVFS及心肌组织Bcl-2蛋白表达均减少,LVESD、LVEDD、心肌细胞凋亡率及心肌组织Bax蛋白表达均增加(P<0.05);与HF组比较,L-益母草碱组、H-益母草碱组、ERK抑制剂组LVEF、LVFS及心肌组织Bcl-2蛋白表达均增加,LVESD、LVEDD、心肌细胞凋亡率及心肌组织Bax蛋白表达均减少(P<0.05)。与Control组比较,HF组心肌组织磷酸化ERK(p-ERK)、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)、细胞核NF-κB p65蛋白均增加(P<0.05);与HF组比较,H-益母草碱组、ERK抑制剂组心肌组织p-ERK、p-IκBα、细胞核NF-κB p65蛋白水平均减少(P<0.05)。结论:益母草碱可抑制HF大鼠心肌细胞凋亡,改善心功能,可能通过抑制ERK/NF-κB信号通路激活而实现。

蛛网膜下腔出血后应激性高血糖机制及其与预后的关系综述

蛛网膜下腔出血是神经外科常见急症,该病致死致残率高,治疗花费大,预后不佳。患者出血后应激性高血糖时有发生,很多学者将其与迟发性脑缺血及预后不佳联系起来进行研究。本文将对蛛网膜下腔出血后高血糖发生的机制及其与患者预后的关系进行概述。

高表达PD-L1和EGFR三阴性乳腺癌动物模型的构建与鉴定

目的:构建和鉴定高表达PD-L1和EGFR的人源性三阴性乳腺癌动物模型,为高表达PD-L1和EGFR的三阴性乳腺癌寻找新治疗方法提供动物模型。方法:将人源乳腺癌细胞MDA-MB-231胰酶消化去除上清,用PBS洗两遍,最后用生理盐水调整细胞数量为1×10~5个/mL,取0.1 mL接种至Balb/c裸鼠右腹股沟区乳脂垫,成瘤后观察肿瘤的生长、浸润和转移等过程。第8周末处死"荷瘤鼠",取瘤体,经10%福尔马林溶液浸泡、固定,石蜡包埋,制成4μm厚度石蜡切片,HE染色和免疫组化检测ER、PR、Her-2、Ki-67、EGFR及PD-L1的表达情况。结果:MDA-MB-231乳腺癌细胞接种第6天,接种区可及一结节,第9天开始对其进行测量并记录,第4周时瘤体体积(0.970±0.073)cm^3。第8周时瘤体体积(3.280±0.145)cm^3,瘤体生长较均匀、周围血管丰富、中央坏死少,瘤区皮肤无溃疡。HE染色示浸润性导管癌;免疫组化检测:ER(-)、PR(-)、Her-2(-)、Ki-67(+,85%)、EGFR(+,90%)和PD-L1(+,80%)。结论:成功构建PD-L1和EGFR高表达的人源性三阴性乳腺癌小动物模型,为研究表达PD-L1和EGFR的三阴性乳腺癌患者的精准医疗提供了一种小动物研究模型。

低位直肠癌患者经肛全直肠系膜切除术后排便功能的影响因素分析

目的探讨低位直肠癌患者在腹腔镜辅助下经肛全直肠系膜切除术(Ta TME)后排便功能的影响因素。方法选取2017年3月至2019年3月海南医学院第二附属医院收治的126例在腹腔镜辅助下行Ta TME的低位直肠癌患者作为研究对象,根据术后1~6个月内是否发生低位前切除综合征(LARS)将其分为LARS组和无LARS组。比较2组患者年龄、性别、BMI、术后恢复时间、术前是否放疗、吻合口距肛缘距离、肿瘤AJCC/T/N/M分期、吻合方式、手术时间、术中出血量、标本直径、术后尿管拔除时间、骨盆出/入口前后径、坐骨棘间径、坐骨结节间径及骶尾骨间径。采用单因素和多因素Logistic回归分析LARS发生的影响因素,采用R软件(R3.3.2)和RMS软件包将筛选出的独立危险因素构建列线图预测模型,计算C指数并用于评价模型的区分度,内部验证和外部验证测试其符合度。结果随访期间伴有LARS患者61例,无LARS患者65例,LARS发生率为48.41%。单因素分析显示,2组患者性别、术后恢复时间、术前是否放疗、吻合口距肛缘距离、肿瘤AJCC分期、坐骨棘间径和骶尾骨间径差异有统计学意义(P <0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,女性、术后恢复时间≤3个月、吻合口距肛缘距离≤4 cm、术前接受放疗、坐骨棘间径长度≤95 mm是发生LARS的独立危险因素。根据多因素分析结果,采用R软件建立预测影响LARS发生相关因素的列线图模型,模型预测LARS的发生率为78.3%。本模型C指数为0.871,内部验证C指数为0.865,下降0.006;外部验证C指数为0.852。结论女性、术后恢复时间≤3个月、吻合口距肛缘距离≤4 cm、术前接受放疗、坐骨棘间径长度≤95 mm是发生LARS的独立危险因素。

β-catenin、Cyclin D1、MMP-9和VEGF与结肠癌病理转移的相关性

目的:探讨β-连环蛋白(β-catenin)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)与结肠癌病理转移的相关性。方法:选取海南医学院第二附属医院2016年1月—2017年12月收治的结肠癌患者120例,收集结肠癌组织、癌旁组织(距肿瘤2 cm)和结肠正常组织(距肿瘤5 cm),采用免疫组织化学SP法检测组织中β-catenin、Cyclin D1、MMP-9和VEGF表达情况。结果:β-catenin、Cyclin D1、MMP-9和VEGF在结肠癌组织内的阳性表达率分别为80.00%、71.67%、76.67%与88.33%,明显高于正常组织和癌旁组织(P<0.05)。β-catenin、Cyclin D1、MMP-9和VEGF阳性表达与结肠癌的淋巴结转移、浸润深度、分化程度、有无远处转移、Dukes分期和TNM分期具有明显的相关性(P<0.05);与患者年龄、性别、肿瘤部位和肿瘤直径无关(P>0.05)。结论:结肠癌组织中β-catenin、Cyclin D1、MMP-9和VEGF高表达与肿瘤转移密切相关,可作为预测结肠癌分期和淋巴结转移的分子生物学指标。

沉默信息调节因子1基因启动子DNA甲基化在老年钙化性心脏瓣膜病中的临床意义研究

目的探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)基因启动子区域DNA甲基化修饰变化与老年钙化性心脏瓣膜病的相关性。方法选取我院2020年2月至2021年1月就诊的老年钙化性心脏瓣膜病患者60例,另纳入同期体检的健康老年40例作为对照。甲基化特异性PCR检测SIRT1基因启动子区域甲基化率,荧光定量PCR检测SIRT1 m RNA表达,ELISA检测SIRT1蛋白和NF-κB蛋白表达。结果观察组SIRT1基因启动子区域甲基化率为63.3%(38/60),显著高于对照组的37.5%(15/40)(P<0.01)。甲基化组SIRT1 m RNA的2-ΔΔCt值显著低于非甲基化组[(0.22±0.05)比(0.36±0.07),P<0.01],甲基化组SIRT1蛋白表达水平显著低于非甲基化组[(82.34±11.56)μmol/L比(143.24±18.73)μmol/L,P<0.01],甲基化组NF-κB蛋白表达水平显著高于非甲基化组[(126.48±17.32)μmol/L比(41.53±7.26)μmol/L,P<0.01]。老年钙化性心脏瓣膜病SIRT1 m RNA与NF-κB蛋白表达呈显著负相关(P<0.05),SIRT1蛋白表达与NF-κB蛋白表达呈显著负相关(P<0.05)。结论老年钙化性心脏瓣膜病患者SIRT1基因启动子区域高甲基化变化,导致SIRT1表达减低,激活炎症反应,可能参与其致病过程。

普外科教学查房中互动式结合提问式教学方法的分析

目的针对普外科教学查房过程中,互动式与提问式教学结合模式的应用效果分析。方法选择2017年9月—2018年7月在本院外科实习的本科实习生60名作为研究对象,随机划分为观察组与对照组两组,每组各30名。观察组学生实施互动式与提问式教学相结合模式开展普外科教学查房教学;对照组学生实施传统普外科查房教学,针对两组学生教学效果进行对比。结果通过两组学生教学效果对比发现,观察组基础理论知识、临床技能测试、总成绩等方面均优于对照组。在相关问卷调查结果中显示,观察组学生普遍认为通过改良后的教学模式,有效提高了对基础知识的理解力,并有效增强了学习兴趣。组间对比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论互动式与提问模式结合的教学方法,在普外科教学查房中具有非常好的临床效果,不仅能够增强学生对基础理论知识的理解能力,还可以有效提高实习学生的临床实践能力。此外,通过改良后的教学模式,对于提升学生学习兴趣具有一定的作用,有利于培养实习学生自主学习意识,值得在普外科临床教学中推广应用。

腹腔镜微创术治疗5～8 cm胃肠间质瘤的疗效及可行性分析

目的腹腔镜微创治疗5～8 cm胃肠间质瘤(GIST)的经验总结。方法回顾性分析我院行腹腔镜手术治疗(观察组)及开腹-手术治疗(对照组)的直径为5～8 cm GIST患者各48例临床资料。比较两组手术指标(包括手术时间、术中出血量、切口长度)和术后恢复情况(包括术后排气时间、术后进食时间、术后住院时间)差异,同时比较两组术后3个月内并发症发生情况,术后1年复发、转移、死亡情况及体力状况(东部肿瘤协作组织评分,ECOG)差异。结果观察组手术时间、术中出血量、切口长度、术后排气时间、术后进食时间、术后住院时间均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后3个月内,两组并发症发生情况比较无显著性差异(P>0.05)。术后1年时,两组术后复发、转移及死亡情况及体力状况(ECOG评分)比较无显著性差异(P>0.05)。结论腹腔镜手术与开腹手术在直径5～8 cm GIST治疗中均有明显的近期疗效及安全性,而腹腔镜手术具有良好的微创优势,于促进患者术后恢复更有利。

虎杖苷抑制TGF-β/Smad/ERK信号通路挽救急性心肌梗死大鼠心肌纤维化

探讨虎杖苷(polydatin,PD)抑制TGF-β/Smad/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)通路对挽救急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)大鼠心肌纤维化的影响。随机将大鼠分为对照(control,Ct)组、模型(Model)组、低剂量PD组(PD-L,40 mg/kg)、高剂量PD组(PD-H,100 mg/kg)、卡托普利治疗组(captopril,CTP,20 mg/kg,阳性对照)及PD-H+TGF-β激动剂SRI-011381组(100 mg/kg+30 mg/kg)。除Ct组外其余各组均用左冠状动脉前降支结扎法构建AMI模型。通过小型动物心脏超声及Masson染色观察PD对大鼠心脏结构及功能的挽救效果;免疫组化法检测心肌组织中胶原蛋白的沉积情况;ELISA试剂盒检测血清中促炎细胞因子IL-6及TNF-α的分泌水平;Western blotting检测各组大鼠心肌组织中TGF-β1、p-Smad2/3及p-ERK1/2蛋白的表达情况。结果显示,与Ct组比较,Model组大鼠出现显著的心功能下降、心肌组织纤维化和全身性炎症反应(均P<0.05)。而PD治疗可以计量依赖性地改善AMI诱导的心肌纤维化和心功能下降,并能抑制炎性因子表达和TGF-β/Smad/ERK信号通路的异常激活(均P<0.05)。高剂量PD治疗效果与阳性对照药物卡托普利相当。同时给药SRI-011381(TGF-β激动剂)后可抑制PD对AMI诱导的心肌纤维化的挽救作用,大鼠心脏结构和功能再次显著恶化(均P<0.05)。由此,PD可能通过抑制TGF-β/Smad/ERK信号通路抑制心肌炎症浸润和逆转AMI大鼠模型心肌纤维化程度,促进受损心肌的修复。

结肠癌特异性抗原-3、结肠癌特异性抗原-4在结肠良恶性肿瘤组织中表达及临床意义

目的探讨结肠癌特异性抗原(CCSA)-3、CCSA-4在结肠良恶性肿瘤组织中的表达及临床意义。方法选取自2019年10月至2022年10月海南医学院第二附属医院收治的150例结肠肿瘤患者为研究对象。根据肿瘤良恶性及分期,将患者分为A组(良性肿瘤;n=50)、B组(恶性肿瘤Dukes-A、B期;n=50)和C组(恶性肿瘤Dukes-C、D期;n=50)。采用酶联免疫吸附法检测各组患者血液、组织中CCSA-3、CCSA-4表达水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估CCSA-3、CCSA-4对结肠恶性肿瘤及结肠癌分期的诊断价值。结果各组患者血液、组织中CCSA-3、CCSA-4水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后各组血液CCSA-3、CCSA-4均降低,且A组、B组低于C组,A组低于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组组织中CCSA-3、CCSA-4水平均高于血液,差异均有统计学意义(P<0.05)。CCSA-3和CCSA-4联合诊断结肠恶性肿瘤的ROC曲线下面积为0.957,敏感度为100.00%,特异度为96.20%。CCSA-3和CCSA-4联合诊断结肠癌分期的ROC曲线下面积为0.874,敏感度为81.30%,特异度为77.80%。结论结肠恶性肿瘤患者组织和血液中CCSA-3和CCSA-4高表达,血液中这两种蛋白的检测具有高敏感度,CCSA-3和CCSA-4有可能成为结肠癌诊断、分级和评估的特异性标志物。

老年高血压患者视网膜病变发生状况及影响因素分析

目的 调查老年高血压患者视网膜病变发生状况,并探讨视网膜病变发生的影响因素。方法 以2019年12月至2022年12月海南医学院第二附属医院、海南省老年病医院及海南西部中心医院诊治的高血压患者作为研究对象,对其进行眼部检查、基线资料调查和实验室指标检测,采用描述性分析方法对老年高血压患者视网膜病变发生状况进行分析,并采用单、多因素分析方法对老年高血压患者视网膜病变发生的影响因素进行分析。结果 本研究共纳入772例老年高血压患者进行视网膜病变调查,共检出402例视网膜病变,检出率为52.07%,其中1级视网膜病变检出率为28.50%,2级为16.71%,3级为4.92%,4级为1.94%。多因素logistic回归分析显示年龄75~89岁(OR=2.196)、高血压病程>10年(OR=2.305)、血压控制不达标(OR=2.158)、糖尿病史(OR=1.520)、血脂异常史(OR=1.603)、尿酸>420μmol/L(OR=1.583)、血管内皮生长因子(VEGF)>142μmol/L(OR=2.458)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)>10 mg/L(OR=1.888)是老年高血压患者视网膜病变发生的危险因素。结论 老年高血压患者视网膜病变发生率高,受到多种因素影响,建议临床可针对患者年龄、病程、血压控制情况、糖尿病、血脂异常、尿酸、VEGF、hs-CRP等因素制定行之有效的干预措施,降低视网膜病变发生率。

解剖性右肝三段切除治疗右肝巨大或多发性肝癌

目的:探讨解剖性右肝三段切除治疗右肝巨大或多发性肝癌的疗效。方法:12例右肝巨大或多发性肝癌患者术前CT肝脏体积测定显示,若行右半肝切除则预留肝脏体积百分率(%FLRV)不足,若行右肝三段切除则%FLRV平均增加14.3%,故行保留V段或VIII段的右肝三段切除术。术中通过选择性入肝血流阻断的方法确定出V段或VIII段的位置,从而在肝表面标记出一条"┏┛"或"┕┓"形的切除线;在切割横断肝实质时根据不同的切除平面采取右半肝入肝血流阻断或全肝的入肝血流阻断的方法,减轻肝脏缺血再灌注损伤。结果:全部患者顺利完成解剖性右肝三段切除术,平均手术时间285 min,平均失血量为720 m L。肿瘤均完整切除,术后V段或VIII段的出入肝血流均完整保留,无围手术期死亡,所有患者AFP均于2个月内降至正常范围。术后全组12例患者至今10例仍存活,最长1例患者已无瘤生存3年;1例死于梗阻性化脓性胆管炎,1例死于肝脏多发转移肝功能衰竭,另外1例发现肝左内叶复发、2例发现肺部转移患者经综合治疗带瘤生存,其他患者无肿瘤复发、转移等情况,肝功能和AFP水平均在正常范围内。结论:解剖性右肝三段切除术能最大限度地保留无瘤肝组织,可作为V段或VIII段未受累的右肝巨大或多发性肝癌一种常规手术方法,从而提高肝癌的整体切除率。

单纯食道超声引导结构性心脏病微创治疗的关键技术开发及应用

目的探究单纯食道超声引导结构性心脏病微创治疗的关键技术开发及应用。方法选取2021年10月~2023年9月在海南医学院第二附属医院住院的结构性心脏病病例90例,按照随机对照的方法分为开胸手术组(n=30)、DSA组(n=30)和超声引导组(n=30)。开胸手术组采用体外循环手术,DSA组采用数字减影血管造影技术介入手术,超声引导组采用单纯食道超声引导结构性心脏病微创手术。比较三组患者的手术相关指标、心功能、心脏重塑各项指标水平及并发症。结果超声引导组和DSA组的手术时间、平均失血量、住院时间及卧床休息时间均少于开胸手术组(P<0.05);但超声引导组和DSA组的各项手术指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后三组患者的心功能均有不同程度的改善,超声引导组和DSA组的心功能的改善程度优于开胸手术组(P<0.05);术后1年超声引导组和DSA组的肺动脉收缩压、右心室内径(RVD)、左心室内径(LVD)、右心房内径(RAS)、左心房内径(LAS)均小于开胸手术组(P<0.05);但超声引导组和DSA组的各项手术指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);开胸手术组和DSA组的并发症发生率均高于超声引导组(P<0.05)。结论单纯食道超声引导微创技术的开发和应用对结构性心脏病具有较佳的疗效,可改善患者的心功能,有利于心脏重塑,降低并发症。

低位直肠癌新辅助治疗后淋巴结检出数目与预后的关系研究

目的探讨低位直肠癌患者新辅助放化疗后淋巴结检出数目(LNs)与患者预后的关系。方法纳入海南医学院第二附属医院2014年1月至2016年12月350例接受新辅助放化疗联合手术治疗的低位直肠癌患者为研究对象。分析影响患者预后的临床病理因素;通过受试者工作特征(ROC)曲线探讨评估新辅助放化疗后患者3年生存率的最佳淋巴结检出数目,将患者按照最佳淋巴结检出数目分为两组,采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验分析3年生存情况;将患者依据直肠癌消退分级(RCRG)分组(Ⅰ级,或Ⅱ~Ⅲ级),分析患者3年生存情况。结果 350例患者共检出淋巴结数目3 987枚,平均每例检出(11.4±4.7)枚。淋巴结检出数目、肿瘤大小、肿瘤分化程度、TNM分期、术后T分期、术后N分期及RCRG与患者3年生存率有关(均P<0.05),年龄及性别与患者3年生存率无关(均P>0.05)。淋巴结检出数目、TNM分期、术后N分期及肿瘤消退分级是3年生存率的独立影响因素(均P<0.05),肿瘤大小、肿瘤分化程度及术后T分期并非3年生存率的独立影响因素(均P>0.05)。ROC曲线提示3年生存时间相关的淋巴结检出数目的最佳临界值为10枚,敏感度为84.3%,特异度为81.7%。LNs≤10枚组3年累积生存率高于LNs>10枚组(P<0.05)。RCRGⅠ级患者中,LNs≤10枚组3年累积生存率高于LNs>10枚组,差异有统计学意义(P<0.05);RCRGⅡ~Ⅲ级患者中,LNs≤10枚组和LNs>10枚组3年累积生存率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论淋巴结检出数目是新辅助放化疗联合手术治疗后低位直肠癌患者预后的独立影响因素,且淋巴结检出数目在10枚以下的患者3年累积生存率更高,而肿瘤消退反应为RCRGⅠ级时,可观察到同样的结果。

左乳内动脉-左前降支冠状动脉旁路移植术后桥血管狭窄的影响因素分析

目的探讨接受左乳内动脉-左前降支(LIMA-LAD)冠状动脉旁路移植术(CABG)的患者术后发生桥血管狭窄的影响因素。方法回顾性分析2019年7月—2020年12月海南医学院第二附属医院收治的在CABG术后因复发胸闷、胸痛等症状接受冠脉造影的86例患者的临床资料,根据LIMA-LAD桥血管狭窄程度将患者分为狭窄组(n=25)与非狭窄组(n=61),狭窄组患者的桥血管狭窄≥50%,非狭窄组患者的桥血管狭窄<50%。比较两组患者的一般资料、既往病史、CABG术中资料、此次就诊资料与生化指标。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用t检验;计数资料组间比较采用χ^(2)检验。采用Logistic回归分析筛选出CABG术后导致桥血管狭窄的影响因素,采用R 4.0.2软件中的rms程序包建立列线图预测模型,采用受试者操作特征(ROC)曲线评价模型的区分度,使用校正曲线和偏差校正C-index对列线图预测模型作出评价。采用X-tile软件获得列线图模型积分的截断值,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,并用Log-rank法进行检验。结果Logistic回归分析结果显示,吸烟、高血压、CABG术前左前降支(LAD)狭窄<75%、CABG术前左乳内动脉(LIMA)血流、冠脉造影弥漫性病变是影响CABG术后LIMA-LAD桥血管狭窄的独立危险因素(P<0.05)。列线图模型预测的C-index值为0.879(95%CI:0.818~0.955,P<0.001),ROC曲线下面积为0.712(95%CI:0.594~0.801,P<0.001),区分度较好;校准曲线显示,模型预测的准确度较好。通过X-tile软件筛选获取模型积分截断值,将患者分为低风险组(≤54分)、中风险组(>54分且≤112分)、高风险组(>112分),生存分析结果显示,3组患者术后桥血管狭窄的发生率分别为20.9%、50.0%和80.0%。结论吸烟、高血压、CABG术前LAD狭窄<75%、CABG术前LIMA血流、冠脉造影弥漫性病变是影响CABG术后LIMA-LAD桥血管狭窄的独立危险因素,构建列线图预测模型可以为CABG术前评估靶血管对LIMA-LAD桥血管通畅性提供一定的参考,降低CABG术后发生LIMA-LAD桥血管狭窄的概率。