虎杖苷通过AMPK/Nrf2途径调控糖尿病大鼠伤口愈合和血管生成的机制研究

目的:基于AMPK/Nrf2途径探讨虎杖苷(PD)对糖尿病(DM)大鼠伤口愈合和血管生成的作用机制。方法:建立DM大鼠模型,将45只DM大鼠随机分为DM组、DM+PD组和DM+PD+ML385组(n=15),另取15只健康大鼠作为对照组,建立伤口愈合受损的模型,DM+PD组大鼠予PD灌胃(20mg/kg),DM+PD+ML385组大鼠在PD的基础上腹腔注射ML385抑制AMPK/Nrf2通路(30mg/kg)。比较各组大鼠伤口愈合情况,通过免疫组化染色检测分析微血管密度,Westernblot及RT-qPCR分析转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)以及AMPK/Nrf2通路转录和翻译水平。结果:四组小鼠的上述指标比较差异显著(P<0.05)。DM组的伤口愈合百分比、生成血管数目、TGF-β1和VEGF蛋白水平、AMPK和Nrf2 mRNA和蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05)。DM+PD组的伤口愈合百分比、生成血管数目、TGF-β1和VEGF蛋白水平、AMPK和Nrf2mRNA和蛋白表达水平显著高于DM组(P<0.05)。DM+PD+ML385组的伤口愈合百分比、生成血管数目、TGF-β1和VEGF蛋白水平、AMPK和Nrf2 mRNA和蛋白表达水平显著低于DM+PD组而显著高于DM组(P<0.05)。结论:PD可能通过调控AMPK/Nrf2通路诱导血管生成,进而促进DM模型大鼠的伤口愈合。

基于miR-128-3p/SIRT1/自噬探讨虎杖苷促进糖尿病溃疡模型大鼠创面愈合的机制

目的:探究虎杖苷调控微小RNA(microRNA,miR)-128-3p/SIRT/自噬促进糖尿病(DM)溃疡模型大鼠创面愈合的机制。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(70 mg/kg)建立DM模型。将30只DM大鼠随机分为模型组(n=15)、虎杖苷组(n=15)。另取15只健康大鼠作为对照组。3组均通过去皮建立DM伤口损伤模型。虎杖苷组大鼠灌胃虎杖苷(20 mg/kg)。比较各组大鼠伤口愈合情况、愈合周围组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和自噬标志蛋白表达水平。分析miR-128-3p和SIRT1的表达水平。通过双荧光素酶报告在内皮祖细胞中验证miR-128-3p与SIRT1的靶向关系。通过转染miR-128-3p mimic质粒过表达miR-128-3p。结果:第5天,模型组、虎杖苷组大鼠伤口愈合率低于对照组(P<0.05);第10天,虎杖苷组大鼠伤口愈合率高于模型组(P<0.05),低于对照组(P<0.05)。模型组大鼠创面组织中SOD、SIRT1 m RNA相对表达量、SIRT1蛋白相对表达量、LC3Ⅱ蛋白相对表达量、Beclin1蛋白相对表达量、LC3Ⅱ/Ⅰ均低于对照组(P<0.05),而MDA和miR-128-3p水平显著高于对照组(P<0.05)。虎杖苷组大鼠创面组织中SOD、SIRT1 m RNA相对表达量、SIRT1蛋白相对表达量、LC3Ⅱ蛋白相对表达量、Beclin1蛋白相对表达量、LC3Ⅱ/Ⅰ均高于模型组(P<0.05),而MDA、miR-128-3p均低于模型组(P<0.05)。双荧光素酶报告结果显示miR-128-3p可以与SIRT1靶向结合。转染miR-128-3p mimic后,内皮祖细胞中的miR-128-3p的水平显著升高,并且SIRT1 m RNA和SIRT1蛋白表达水平显著降低。结论:虎杖苷可能通过调控miR-128-3p/SIRT1通路诱导自噬,进而缓解高血糖引起的氧化应激损伤,促进DM模型大鼠的伤口愈合。

肠球菌临床感染及其耐药性分析

目的分析肠球菌临床感染及其对常用抗菌药物的耐药现状,为临床治疗提供依据。方法采用回顾性调查方法统计近几年临床标本肠球菌分离情况,并用纸片扩散法测定菌株对13种抗菌药物的敏感性。结果456株肠球菌中,粪肠球菌占62.9%,屎肠球菌占26.1%,鹑鸡肠球菌占4.8%。检出菌株数最多的标本分别是术后引流液、胆汁、尿液和烧伤创面。不同标本检出的菌种类别不尽相同。药敏结果表明,万古霉素和替考拉宁仍有很好的敏感性,利福平、红霉素、四环素、环丙沙星是耐药率最高的抗菌药物,屎肠球菌的总体耐药率高于粪肠球菌。结论肠球菌的检出率和耐药率都呈上升趋势,应引起临床的重视,合理使用抗菌药物,是减少医院感染的有效措施。

T细胞亚群检测在恶性肿瘤患者辅助诊断中的价值研究

目的研究恶性肿瘤患者机体细胞免疫功能的状况,为肿瘤治疗提供参考。方法用流式细胞仪分别对消化系统肿瘤(n=130)、血液系统肿瘤(n=88)、肺癌患者(n=108)及健康对照组(n=79)进行外周血T细胞亚群检测,各组间进行比较。结果肺癌、消化系统肿瘤及血液系统肿瘤患者CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+均明显低于健康对照组(P<0.05),CD8^+、NK均明显高于健康对照组(P<0.05);各类肿瘤组间比较,血液系统肿瘤组的CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+与肺癌组和消化系统肿瘤组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论恶性肿瘤患者机体存在免疫抑制,其机体的细胞免疫功能下降,及时检测肿瘤患者机体的T细胞亚群,对临床肿瘤治疗及预后判断有积极的指导意义。

运用CRITIC法对医院患者满意度测评结果进行评价

目的运用CRITIC法对某市（县）级医院患者满意度测评结果进行评价，为医院提高患者满意度提供可靠的依据。‘方法应用CRITIC法从患者对护理人员工作满意度、医生工作满意度、医技科室服务满意度、窗口服务满意度、医疗质量和效果满意度、医药收费规范合理满意度、整体环境满意度等7个方面对某市（县）8家医院患者满意度测评结果进行综合评价。结果评价结果与医院实际情况相符合，在8家医院患者满意度综合评价中，D院最好，B院最差。结论CRITIC法在医院患者满意度综合评价中具有较好的应用价值。

某医院患者感染肺炎链球菌的分布和耐药特征研究

目的了解医院患者感染肺炎链球菌分布和耐药特性,为有效防控提供依据。方法通过病原菌分离鉴定技术和药敏试验方法,对某医院肺炎链球菌感染病例进行调查与分析。结果共调查该医院肺炎链球菌感染患者321例,其中多重耐药菌株占50.47%。肺炎链球菌感染病例中,呼吸道感染占85.67%。临床分离的肺炎链球菌对红霉素和四环素耐药率分别为94.08%和90.03%;对青霉素、阿莫西林、三代头孢菌素和喹诺酮类等抗菌药物比较敏感。多重耐药肺炎链球菌以红霉素+四环素+复方新诺明耐药为主要耐药模式。结论临床分离的肺炎链球菌中多重耐药菌株占50%以上,其对红霉素和四环素耐药性高,对阿莫西林和青霉素等抗菌药物比较敏感。

儿童乙肝表面抗原和表面抗体共阳性者病毒preS/S基因变异特征

目的 探讨儿童中乙肝表面抗原和抗体共阳性乙型肝炎病毒(HBV)感染者preS/S基因变异特征。方法 收集14岁以下儿童中乙肝表面抗原和抗体共阳性HBV感染者10例为共阳性组,以同期收集的儿童乙肝表面抗原单阳性22例为单阳性组,检测乙肝血清免疫学和肝功能标志物,应用荧光PCR检测血清HBV-DNA水平,对核酸检测阳性样本的病毒preS/S基因进行扩增,产物进行直接测序,分析2组间病毒preS/S区变异及临床特征差异。结果 共阳性组中以HBeAg阴性占大多数,且共阳性组儿童HBV-DNA水平低于单阳性组(P<0.05),但2组间基因型分布和肝功能指标差异无统计学意义(P>0.05)。通过与GenBank中HBV参考序列比较显示,共阳性组中主要亲水区(major hydrophilic region, MHR)和第二环内氨基酸变异率高于单阳性组,且共阳性组中检测出preS2缺失突变。结论 乙肝表面抗原和抗体共阳性儿童HBV感染者病毒呈低水平复制,preS/S变异可能与儿童共阳性发生有关。

血清乙型肝炎表面抗原和表面抗体共阳性慢性HBV感染者病毒S基因变异分析

目的探讨乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和表面抗体（HBsAb）共阳性患者乙肝病毒．S基因区氨基酸变化特点，了解分子病毒学特征。方法对26例HBsAg和HBsAb共阳性且DNA阳性的慢性HBV感染者（实验组）和随机选取的39例HBsAg阳性HBsAb阴性且DNA阳性慢性HBV感染者（对照组）的HBVDNAS区基因序列进行PCR扩增和测序，并对s区氨基酸序列进行比对分析。结果HBsAg和HBsAb共阳性组s基因区氨基酸突变高于对照组，两者差异具有统计学意义（P〈0．05）；在a决定簇（aa124～147）尤其是第1个茎环结构内（aa124～137）氨基酸突变频率明显高于对照组（5．49％VS1．09％，P〈0．05）。结论HBsAg和HBsAb共阳性患者Js基因a决定簇第1个茎环结构氨基酸变异明显增加，推测与HBsAg和HBsAb共阳性现象的发生可能有相关性。

烧伤创面肠杆菌属细菌感染的耐药性调查

目的了解烧伤创面肠杆菌属细菌感染株的耐药性,为烧伤创面抗感染治疗时抗菌药物的选用提供科学依据。方法药敏试验采用K-B法,ESBLs和AmpC酶检测采用三维试验。结果 2010年1月-2011年12月从住院的烧伤患者创面标本中共分离获得72株肠杆菌属细菌,主要菌种是阴沟肠杆菌(ECL)54株,占75.00%,产气肠杆菌(EAE)12株,占16.67%;ECL和EAE对阿莫西林/克拉维酸和氨苄西林的耐药率均≥98.15%;第三代头孢耐药率为35.20%～66.67%,头孢吡肟为7.41%和33.33%,1株ECL对亚胺培南耐药;对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、喹诺酮类和氨基糖苷类的耐药率较低;三维试验证明ECL和EAE的产ESBLs检出率分别为25.93%和41.67%,AmpC酶阳性率为31.48%和33.33%,10株同时产ESBLs和AmpC酶。结论烧伤创面感染的肠杆菌属细菌主要是ECL和EAE,感染菌耐药率严重,产酶率较高,临床应加强医院感染的预防措施,重视细菌培养和药敏试验结果,实验室应及时向临床提供细菌产酶的信息,指导临床合理选择治疗用药。

ICU与非ICU 4种目标监测菌耐药性分析

目的分析重症监护病房(ICU)与普通病房(非ICU)病原菌耐药性及多重耐药菌(MDRO)检出率,为临床抗感染治疗及MDRO防控提供参考。方法对本院2016年1月-2017年12月住院患者中分离到的4种目标监测菌,按ICU和非ICU进行耐药性和MDRO检出率分析。结果ICU大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌MDRO检出率分别为62.5%、38.2%、64.0%、82.1%,非ICU分别为43.7%、25.5%、17.4%、31.5%;大肠埃希菌的耐药率(氨苄西林、庆大霉素、阿米卡星除外)ICU高于非ICU(P<0.05);铜绿假单胞菌的耐药率(庆大霉素、阿米卡星除外)ICU高于非ICU(P<0.05);肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌的耐药率ICU明显高于非ICU(P<0.05)。结论4种目标监测菌ICU比非ICU有更高的耐药率和MDRO检出率,应加强ICU感染的防控。

绍兴第二医院流感嗜血杆菌的耐药性分析

目的分析绍兴第二医院从呼吸道标本中分离的流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)的耐药情况,为临床医生治疗用药提供有效的依据。方法收集该院2016年1月-12月下呼吸道感染标本分离培养的流感嗜血杆菌,采用VITEK 2 Compact进行细菌鉴定,Kirby-Baue法进行药敏试验,头孢硝噻吩纸片法测定β-内酰胺酶。结果共分离到流感嗜血杆菌193株,阳性率最高的科室是肿瘤科,其次为呼吸内科、小儿科和监护室。流感嗜血杆菌对复方新诺明、氨苄西林和氨苄西林-舒巴坦的耐药率均高达55.0%以上,美罗培南和头孢噻肟对流感嗜血杆菌保持较好的抗菌活性,耐药率在10.0%以下。结论复方新诺明、氨苄西林和氨苄西林-舒巴坦应慎重用于流感嗜血杆菌感染的临床治疗。

医院血流感染主要细菌谱的分析

血流感染是一种严重的全身感染性疾病,血流感染的发病率较高,常导致患者死亡。据报道,美国每年有65万~75万人死于脓毒症。有学者通过对美国400家急诊中心的调查显示,约2.8%的急诊患者因怀疑存在血流感染而需要做血培养,血培养仍是目前诊断细菌性血流感染的金标准。阳性血培养可为临床提供病原学诊断的依据,血流感染初期的24 h内,若未能及时进行早期诊断以及合理的抗菌药物治疗将会导致患者存活率大大下降。

绍兴地区部分医院血流感染肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的研究绍兴市部分医院血流感染肺炎克雷伯菌的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法通过细菌分离鉴定技术和药敏试验,对绍兴地区不同医院住院患者送检的血液标本进行肺炎克雷伯菌分离培养和药敏试验观察。结果4家医院共查出136例血流感染肺炎克雷伯菌患者,其中男性89例,女性47例,老年患者占82.35%。所分离的肺炎克雷伯菌对阿米卡星和替加环素耐药率较低,对亚胺培南和厄他培南耐药率分别为22.79%和24.26%。在136株血流感染肺炎克雷伯菌中共检出31株产超广谱β-内酰胺酶阳性菌株、33株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌株。结论血流感染肺炎克雷伯菌对临床常用抗菌药物普遍耐药,耐碳青霉烯类菌株比例较高。