靶向B细胞治疗类风湿关节炎研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种全身性的自身免疫性关节疾病,其临床特征主要有滑膜炎和关节骨破坏,严重者致残。多种类型的免疫细胞参与RA进展,B细胞是介导体液免疫的核心群体,它在RA中发挥重要作用,近年来越来越受到重视。该文综述目前治疗RA的B细胞相关靶向药物的最新研究进展。

甲状腺素和利血平诱导小鼠甲亢阴虚证模型的制备

目的利用甲状腺素和利血平诱导建立小鼠甲亢阴虚证模型。方法取昆明种小鼠48只,雌雄各半,随机分为4组,每组12只,第1组为空白对照组,给予等体积的生理盐水;第2,3,4组分别为甲状腺素与利血平混悬液低、中、高剂量组,分别灌胃给予75mg/kg甲状腺素和0.5mg/kg利血平、150mg/kg甲状腺素和1mg/kg利血平、300mg/kg甲状腺素和2mg/kg利血平的生理盐水混悬液,每日1次,连续给药7d。结果与空白对照组比较,第4组即甲状腺素和利血平混悬液高剂量组小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)值显著升高(P<0.01),且促甲状腺素(TSH)值显著降低(P<0.01),体重显著减轻(P<0.01),甲状腺、肝脏脏器系数均显著增大,具有中医阴虚证的临床表现如躁动不安、皮毛光泽度差、饮水量减少等。说明高剂量组雌雄小鼠造模成功。结论灌胃给予300mg/kg甲状腺素和2mg/kg利血平的生理盐水混悬液,连续给药7d可成功制备小鼠甲亢阴虚证模型。

小鼠局灶性脑缺血线栓进入路径解剖研究

中风以其高发病率、高死亡率、高致残率已经成为严重威胁人类生命与健康的主要疾病之一。在现代科学研究中，小鼠局灶性脑缺血模型因为能够很好的模拟人类中风后缺血区脑梗死以及偏瘫症状。又结合当今广泛开展的转基因技术以及基因敲除技术，在研究药物治疗中风以及寻找新药靶点方面有独到的优势，因此被广泛应用嘲。

维通注射剂主要成分的优化配比研究

目的寻找维通注射剂两种主要成分的最佳配比进行组方,为开发出高效、低毒的防治术后粘连药物提供实验依据。方法利用权重配方法进行分组,采用噻唑蓝(MTT)比色法寻找最佳配比。结果主要成分D和Q按9∶2配伍,可显著抑制成纤维细胞生长,两药有协同或相加作用。结论两药最佳配伍比例为9∶2。

CpG-ODN联合抗CD40抗体活化小鼠调节性B细胞抑制CD4＋T细胞增殖

目的分析CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)联合抗CD40抗体刺激后的调节性B细胞(Breg)对其免疫调节功能的影响。方法用流式细胞分选仪分选小鼠脾脏CD5+CD1 dhighBreg与CD5-CD1 dlowB细胞亚群,CpG-ODN联合抗CD40抗体激活24 h,再与纯化的CD4+T细胞共培养,流式细胞术检测活化后的Breg及对照CD5-CD1 dlowB细胞亚群白细胞介素10(IL-10)的表达,以及共培养抗CD3抗体联合抗CD28抗体激活的CD4+T细胞的增殖与γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果 CpG-ODN联合抗CD40抗体激活的CD5+CD1 dhighBreg亚群与CD4+T细胞共培养时能明显抑制活化的CD4+T细胞的增殖,同时IFN-γ的水平降低;而CpG-ODN联合抗CD40抗体刺激后的对照B细胞亚群则不能抑制CD4+T细胞的增殖与IFN-γ分泌。CD5+CD1 dhigh Breg亚群在CpG-ODN联合抗CD40抗体刺激24 h,IL-10的表达水平明显高于CD5-CD1 dlowB细胞亚群。结论体外CpG-ODN联合抗CD40抗体刺激后的CD5+CD1 dhighBreg亚群通过分泌IL-10抑制CD4+T细胞的活化。

全脑缺血再灌注对大鼠空间学习记忆的影响

目的:探讨缺血性脑损伤对大鼠空间分辨学习和记忆能力的影响。方法:17只Wistar雄性大鼠随机分成两组,缺血组采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法(4VO)建立大鼠全脑缺血模型,假手术组则只手术不缺血。缺血第8天开始利用Morris水迷宫测试来检测其空间分辨学习和记忆的能力。然后进行灌注固定,经石蜡切片和尼氏染色,最后在显微镜下观察海马CA1区神经元的存活情况,从而确定全脑缺血模型制作的成功与否。结果:缺血性脑损伤组大鼠CA1区约90%神经元死亡,未死亡的神经元散在分布,其形态与正常神经元形态稍异,而假手术组海马CA1区神经元排列整齐,并未发生死亡,说明模型制作成功;在Morris水迷宫测试前4天的训练中,缺血性脑损伤组大鼠平均找到平台时间明显多于假手术组大鼠所用时间,经统计分析两组间有显著性差异(P<0.05),而两组间的游泳速度未见显著性差异(P>0.05);第5天撤掉平台后,缺血性脑损伤组大鼠在原平台所在象限所走的路程占总路程的比例也明显比假手术组少(P<0.05)。说明与假手术组相比,缺血性脑损伤组大鼠的空间分辨学习与记忆能力明显降低。结论:缺血性脑损伤使大鼠的学习、记忆功能受到损害。

大鼠大脑中动脉缺血再灌注后不同时间点梗死体积的变化

目的:在局灶缺血模型中,研究再灌注后0 h、6 h、24 h、48 h、72 h对大鼠梗死灶体积的影响。方法:将大鼠分为假手术组(sham组)和实验组,实验组在激光多普勒血流仪的监测下进行手术,术后有3分症状的入主,然后随机分为0 h组、6 h组、24 h组、48 h组、72 h组。在不同的时间点处死大鼠,行TTC染色,然后计算梗死体积。结果:再灌注24 h之前,随着再灌注时间的延长梗死体积逐渐增大,0～24 h,梗死体积变化有显著性差异;但再灌注24 h之后,梗死体积不再发生实质性的增加,24～72 h,梗死体积无显著性差异。结论:在研究局灶脑缺血梗死体积的实验中,24 h是一个非常重要的时间点。

亚低温对小鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的:研究亚低温对局灶性脑缺血小鼠梗死灶大小的影响。方法:取16只C57小鼠,用线栓法制作局灶性缺血模型,平均分为两组,一组行低温处理,一组处于室温下,缺血再灌注24 h行TTC染色,计算梗死体积。结果:低温处理的小鼠,脑梗死体积明显小于未处理的小鼠。结论:对局灶性脑缺血而言,低温具有保护作用。

青藤碱合用乌头原碱对CD4^+ T细胞RANKL表达和破骨细胞生成的影响

目的:研究青藤碱和乌头原碱单独或配伍使用对活化的T淋巴细胞RANKL表达和两药合用对破骨细胞生成的影响。方法:采用anti-CD3激活小鼠CD4^+T细胞,用流式细胞仪检测青藤碱、乌头原碱对小鼠辅助性T细胞RANKL表达的影响;同时用TRAP染色法观察两药合用对RANKL诱导破骨细胞生成的影响。结果:0.25~1mmol/L青藤碱能够剂量依赖性地抑制小鼠CD4^+T细胞RANKL表达;0.25、0.5mmol/L乌头原碱也能显著地降低CD4^+T细胞RANKL表达,而另一毒性较大的活性成分苯甲酰乌头原碱只在高剂量0.5mmol/L时才能下调RANKL表达。乌头原碱与低浓度青藤碱合用后能使CD4^+T细胞RANKL表达进一步降低,而苯甲酰乌头原碱与低浓度青藤碱合用后对RANKL表达无影响。研究发现,青藤碱与乌头原碱合用后对RANKL诱导的RAW264.7细胞分化成破骨细胞的抑制作用较两药单独使用明显增强。结论:青风藤和附子活性成分均可能通过下调活化的T细胞RANKL表达间接抑制RANKL诱导的破骨细胞生成和骨吸收,改善类风湿性关节炎引起的骨破坏;附子久煎后的无毒活性成分乌头原碱与青藤碱配伍使用后对T细胞RANKL表达和RANKL相关破骨细胞生成的作用均优于单用,提示中医临床使用附子时久煎不仅能够减毒,还可能更有利于配伍其它药物治疗类风湿性关节炎骨破坏。

民生档案资源建设多元主体分析及其协同效应探究

多元主体参与是民生档案资源建设的重要路径。参与民生档案资源建设的多元主体类型主要包括档案部门、政府涉民部门、各种社会组织和社会公众等。民生档案资源建设客体的分散性和参与主体的主观意愿是多元主体参与民生档案资源建设的现实原因。多元化主体的参与加速了民生档案资源建设的进度,创新了民生档案资源建设的协作方式,培育了主体的参与能力,加强了主体间的互动合作。