河北省牛梨形虫流行病学调查及遗传进化分析

为了解我国河北省牛梨形虫的种类、感染率、遗传进化及季节流行性情况,本研究共收集河北省7个地级市的牛血液样品564份,以提取的牛全血液基因组DNA为模板,采用套式PCR对牛梨形虫18S r RNA基因进行扩增检测,并鉴定虫种,选取10份不同地区牛犁形虫阳性样品测序,并构建其18S r RNA基因系统进化树分析其遗传进化特征。结果显示,我国河北省牛梨形虫总感染率为18.6%(105/564),其中张家口地区牛梨形虫感染率最高,为83.3%(20/24),极显著高于河北省其他地区(P<0.01),唐山、沧州、石家庄及承德的牛梨形虫感染率分别为27.4%(32/117)、22.1%(17/77)、25.0%(20/80)和19.0%(16/84),秦皇岛和衡水地区牛梨形虫感染率为0。感染梨形虫的虫种主要为双芽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫和瑟氏泰勒虫,感染率最高的为双芽巴贝斯虫(12.2%,69/564)。18S r RNA基因的进化树分析结果显示,10份牛梨形虫18S r RNA基因均呈地区性聚集;统计学分析结果显示,8月份河北省牛梨形虫感染率最高(29.7%),显著高于其他月份(P<0.05),4月~8月间牛梨形虫感染率呈逐渐上升的趋势,8月份达到顶峰后感染率逐渐下降。本研究首次对河北省牛梨形虫进行了流行病学调查,并分析了其遗传进化特征,结果表明河北省存在牛梨形虫的感染,尤其是张家口地区,该地区应在夏季应加强对牛梨形虫的重点防控。本研究为河北省牛梨形虫的防制提供了科学依据。

河北省圈养貉子隐孢子虫流行现状调查

目的:确定河北省圈养貉子隐孢子虫的流行和虫种/基因亚型分布情况。方法:从河北省多地共采集389份新鲜圈养貉子粪便样品,采用基于隐孢子虫核糖体小亚基rRNA(SSU rRNA)基因的巢式PCR方法进行检测,并对获得的隐孢子虫SSU rRNA基因阳性样本进行隐孢子虫60 kDa糖蛋白(gp 60)基因的扩增,对获得的隐孢子虫SSU rRNA和gp 60基因进行测序和分析,并分别在Mega中构建基于这2个基因的进化树(最大似然法),进一步分析所获隐孢子虫的分子特性。结果:基于隐孢子虫SSU rRNA基因的巢式PCR检测显示,河北省圈养貉子中共检测出6份隐孢子虫阳性样本,隐孢子虫感染率为1.5%(6/389)。其中,6月龄以上貉子的隐孢子虫感染率为1.2%(1/85),6月龄以下貉子的隐孢子虫感染率为1.6%(5/304),二者无显著差异(χ^(2)=0.096,P=0.384)。粪便非正常的貉子隐孢子虫感染率(11.1%,4/36)显著高于粪便正常的貉子(0.6%,2/353)(χ^(2)=23.18,P=0.001)。序列及进化树分析显示,本次从河北省貉子中分离的隐孢子虫虫种均为C.canis,共鉴定出2种基因亚型,即XXa2和XXa4。结论:河北省圈养貉子中存在2种人兽共患的C.canis基因亚型XXa2和XXa4,提示貉子可能成为人隐孢子虫感染的潜在来源。

《动物寄生虫病学》课程说课设计

说课作为一种教学和教研改革的手段,将教育理论和教学实践相结合,是向同行和专家叙述教学设计及其依据的一种新型的教学研究活动。该文以大学本科专业课程《动物寄生虫病学》为例,从课程简介、课程教材、课程目标、课程内容及实施、课程评价这5个方面对这门课程进行详细的阐述。

高校动物解剖学教学创新改革研究

为改变传统的动物解剖学的教学模式,根据动物解剖学的课程特点及学情分析,从教学内容的重构、利用现代技术开展教学活动、综合运用多种教学方法等方面进行创新改革,经过问卷调查结果反馈本次教学创新取得了良好的教学效果,值得推广。

中国水资源开发与利用态势分析

供水与用水规模及结构的演变与社会经济发展密切相关,准确把握水资源开发利用态势是水资源规划与管理的基础。本文基于2005—2022年全国供用水数据,采用构建的水资源开发态势Logistic方程及水资源利用态势Lotka-Volterra模型,评估全国水资源分区的供水模式及全国整体用水模式。针对全国地表水源供水量与地下水源供水量比例将突破6∶1的趋势,建议应避免地表水源的过度开发;针对现有一、二、三产用水比例距离理想的“3∶4∶3”尚存在较大距离的现状,仍需大力发展节水农业建设,以促进社会经济繁荣发展。

我国肉鸡球虫感染和耐药现状及中草药防控策略探讨

球虫病是严重危害肉鸡生产性能和健康的传染性疾病,严重制约养鸡业的健康发展。球虫防治过程中,由于各种抗球虫药物的长期使用,鸡球虫抗药现象渐为普遍,使该病防控增加了一定难度。随着中兽医研究的不断深入,中草药在肉鸡球虫病防治中的优势不断显现。该文概述了近年来我国肉鸡球虫感染情况和球虫耐药现状,并结合中草药在该病防控中的应用,对鸡球虫病防控策略进行探讨,以期为抗球虫药物研发及球虫病防治提供一定参考。

羊肉中貉源成分Real-time PCR检测方法的建立

[目的]检测羊肉中是否含有貉肉成分。[方法]通过实时荧光定量PCR方法,以cytB为靶基因设计特异性检测引物,选取8个不同物种的肌肉组织样本为研究对象,根据其ΔCt值函数关系进行线性拟合建立标准曲线。[结果]该检测方法所用引物能将貉与其他物种区分,特异性较强,且最低检测限可达到3.2 pg/μL,回收率在97.71%~104.36%,组内变异系数≤0.28%,组间变异系数≤1.08%。[结论]该研究建立的羊肉中貉肉源成分实时荧光定量检测方法具有良好的特异性和敏感性,可用该方法检测实际羊肉样品中是否有貉肉源成分,为羊肉制品掺假的检测提供简单快捷准确的技术手段和执法依据。

柔嫩艾美耳球虫rhomboid抗原基因在卡介苗中的克隆与表达

以含柔嫩艾美耳球虫rhomboid基因的重组质粒为模板,应用PCR方法扩增该基因完整开放阅读框,克隆至pMD18-T载体中。分别用限制性内切酶PstⅠ/ClaⅠ和PvuⅡ/ClaⅠ进行双酶切,将rhomboid目的基因克隆到大肠杆菌-分支杆菌穿梭表达载体pMV261和整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pRho-261和pRho-361。将重组质粒电穿孔转化卡介苗,经热诱导后对其表达产物进行SDS-PAGE和western blot分析。结果表明成功构建了两个重组质粒,其表达产物与柔嫩艾美耳球虫阳性血清具有免疫反应性,为重组卡介苗在鸡球虫病防治方面的研究奠定了基础。

一株貉子源毛滴虫的分离鉴定

为进一步鉴定从河北秦皇岛地区腹泻貉子的盲肠中新分离得到的一株毛滴虫,本研究分别对其进行了分离与体外培养、形态学观察及18S rRNA和ITS1-5.8S rRNA-ITS2基因序列相似性分析。形态学观察结果表明从貉子体内分离的毛滴虫具有4根前鞭毛和一根独立鞭毛,为人五毛滴虫形态结构。18S rRNA和ITS1-5.8SrRNA-ITS2基因序列与GenBank中登录的人五毛滴虫基因序列的相似性均为99%。基于18S rRNA和ITS1-5.8SrRNA-ITS2两种基因构建系统进化树,结果显示本研究从貉体内分离的毛滴虫与人五毛滴虫处于同一进化分支,亲缘关系较近。综合以上鉴定结果表明本研究从秦皇岛地区貉子体内所分离的这株毛滴虫为人五毛滴虫。由此推断貉子毛滴虫病可能由人体内的毛滴虫感染所致。

饲粮铁水平对肉仔鸡锰吸收及组织中沉积的影响

本试验旨在研究饲粮铁水平对肉仔鸡锰吸收及组织中沉积的影响及其机制。将336只1日龄商品代罗斯308肉公雏按体重随机分为4个组,每组6个重复,每个重复14只鸡,分别饲喂不加铁基础饲粮(含铁77.7 mg/kg)、以硫酸亚铁(Fe SO4·7H2O)形式添加铁100、250、500 mg/kg饲粮。28日龄进行原位结扎十二指肠灌注8.74 mmol/L锰测定锰吸收率。结果表明:血浆铁和血浆转铁蛋白饱和度均随饲粮铁水平升高而提高(P<0.10);胰腺、十二指肠黏膜和胫骨灰铁含量随饲粮铁水平升高而升高(P<0.10),锰含量随饲粮铁水平升高而降低(P<0.10);3个加铁组十二指肠黏膜二价金属转运蛋白m RNA水平均显著低于对照组(P<0.10),添加铁500 mg/kg组膜转铁蛋白m RNA水平显著低于对照组和其他2个加铁组(P<0.10);加铁组十二指肠锰吸收率均显著低于对照组(P<0.10)。结果提示,饲粮铁可能通过调控十二指肠黏膜二价金属转运载体的表达降低锰的吸收及组织中的沉积。

鸡球虫病免疫预防研究现状

鸡球虫病是严重危害养禽业的一种细胞内寄生虫病。鸡抗球虫药的长期使用,使得球虫抗药性问题日益严重,药物在球虫病控制中的作用越来越受到限制。近年来用免疫预防的方法控制鸡球虫病逐渐受到重视,并有望成为主要的技术手段。笔者就鸡球虫病的免疫预防,从活苗、亚单位苗和基因工程苗这几个研究阶段进行概述。

含锰超氧化物歧化酶基因结构及其转录调控

综述了线粒体中抗氧化关键酶含锰超氧化物歧化酶基因的结构特点及各种因素对其转录调控的机制,以期为提高机体抗氧化能力、减少细胞和组织生理性或病理性氧化损伤提供指导。

苏木精染色对冰冻切片组织RNA及蛋白质浓度和质量的影响

目的探讨苏木精染色对冰冻切片组织RNA及蛋白质浓度和质量的影响。方法将10份乳腺癌组织冰冻切片进行苏木精染色以及苏木精染色后酸洗处理,利用显微切割技术从冰冻切片中获取特定乳腺癌细胞,Trizol提取相应的RNA及总蛋白,琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR分析RNA质量,SDS-PAGE和Bandscan软件分析蛋白质电泳结果,并进行RNA和蛋白质的浓度测定。结果从10份乳腺癌组织冰冻切片中提取的RNA经琼脂糖凝胶电泳检测,苏木精染色组和苏木精染色后酸洗组的28S、18S、5S条带均有不同程度的降解,RT-PCR结果显示,RNA完整性较好;提取的蛋白电泳图谱处理前后无明显差异;苏木精染色以及苏木精染色后酸洗处理对乳腺癌组织中的RNA及蛋白质浓度无显著影响。结论苏木精染色对乳腺癌冰冻切片组织中RNA及蛋白质浓度和质量无显著影响,为肿瘤蛋白质组学的进一步研究提供了理论支持。

高校兽医微生物学教学探讨

在借鉴前人经验的基础上,结合自身教学经验,就如何有效进行兽医微生物的教学活动,激发学生学习热情,培养学生能力进行了探讨,以期取得较好的教学效果。

猪源肠外致病性大肠杆菌的分离与鉴定

目的检测猪源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的血清型与毒力基因。方法对2013-2014年间秦皇岛地区30份组织病料采用细菌形态观察、培养特性试验、生化试验鉴定出8株肠外致病性大肠杆菌。采用玻片凝集法测定这些大肠杆菌病的血清型,并用PCR扩增法检测9种毒力基因。结果定型菌株5株,分别属于O53、O93和O157 3个血清型,9种毒力基因PCR检测结果表明ler、iutA、irp2、fyuA、astA 5种基因检出率分别为100%、75.0%、50.0%、50.0%、25.0%。结论所检测的猪源肠外致病性大肠杆菌以O53、O93和O157为主要流行血清型,同时携带fyuA、ler和iutA基因的菌株致病性较强。

貂源伪狂犬病病毒的分离鉴定及gE基因分子特征

2014年以来,我国多个毛皮动物养殖场不同日龄的貂出现神经症状、腹泻和急性死亡等,采集昌黎县病死貂的脑组织通过细胞培养、病毒蚀斑纯化、病毒的形态结构观察、动物接种试验分离到1株伪狂犬病病毒,命名为Mink 1。病料接种MDCK细胞能够产生典型的细胞病变,病毒粒子在电镜下呈圆形、有囊膜、直径约为150nm,病毒悬液接种家兔能引起家兔奇痒、麻痹死亡。利用PCR方法从病死动物脑组织中扩增PRVgE基因,gE基因序列分析表明,从貂的病料中扩增的gE基因与2012年猪伪狂犬分离株的相似性高达99.4%,进化树位于一个相对独立的分支。与经典毒株相比,在142—144位和1 487—1 490位两处同时存在GAC和ACG连续碱基的插入。以上试验结果证实该病例是由伪狂犬病病毒感染所引致。

饲粮高铁对肉仔鸡十二指肠黏膜铁转运载体基因表达及组织微量元素含量的影响

本试验旨在研究饲粮铁含量对肉仔鸡组织重要微量元素铁、锰、铜、锌含量及十二指肠黏膜主要铁转运载体基因表达的影响,探讨铁对肉仔鸡微量元素吸收和代谢的影响及其机制。将336只1日龄商品代罗斯308肉公雏按照体重随机分成4个组,每组6个重复,每个重复14只鸡。对照组饲喂不额外添加铁的基础饲粮(实测铁含量为78 mg/kg),铁添加组分别饲喂以七水硫酸亚铁(FeSO_4·7H_2O)形式添加100、250或500 mg/kg铁的试验饲粮(实测铁含量分别为166、308和579 mg/kg)。试验期21 d。各组试鸡分别于7、14和21日龄屠宰分析肝脏、心脏、胰腺、十二指肠黏膜和胫骨灰中铁、锰、铜、锌含量及十二指肠黏膜中二价金属转运蛋白(DMT1)和膜铁转运蛋白(FPN1)mRNA表达水平。结果表明:1)500 mg/kg铁添加组1~7日龄和8~14日龄的平均日增重显著低于其他3组(P<0.10),250和500 mg/kg铁添加组1~7日龄的平均日采食量显著低于其他2组(P<0.10)。2)饲粮铁含量对肉仔鸡7、14、21日龄的血浆总铁结合力以及全血血红蛋白浓度(7日龄除外)和红细胞压积均无显著影响(P>0.10),但显著影响7、14和21日龄血浆铁含量和铁饱和度(P<0.10),二者均随饲粮铁含量增加而升高。3)7和14日龄心脏及7、14和21日龄肝脏、十二指肠黏膜、胰腺和胫骨灰铁含量均随饲粮铁含量的增加而升高,7、14和21日龄十二指肠黏膜、胰腺和胫骨灰锰含量均随饲粮铁含量的增加而降低;饲粮添加铁显著降低7日龄胰腺锌含量(P<0.10),但对其他日龄胰腺和各日龄其他所测组织锌含量以及各日龄所测各组织铜含量均无显著影响(P>0.10)。4)饲粮铁含量显著影响7、14和21日龄十二指肠黏膜DMT1和FPN1 mRNA表达水平(P<0.10),各日龄DMT1和FPN1mRNA表达水平均随饲粮铁含量的增加而降低。以上结果提示,高铁饲粮可能通过调控十二指肠黏膜DMT1和FPN1基因的表达降低锰和锌在肠道的吸收,进而减少锰和锌在组织中的沉积。

昌黎县貉貂大肠杆菌分离鉴定与耐药性检测

为确定致昌黎县5个貉、貂养殖场因腹泻死亡的貉、貂的病原及其耐药性,试验采集死亡貉、貂的病料进行病原分离、染色镜检和生化试验,并对分离菌进行药敏试验。结果表明：分离出的5株菌均为大肠杆菌,3株貉源大肠杆菌的耐药率分别为66.67%（14/21）、57.14%（12/21）和57.14%（12/21）;2株貂源大肠杆菌的耐药率均为61.90%（13/21）。5株大肠杆菌对林可霉素、氨苄西林、阿莫西林、四环素、多西环素、多黏菌素B的耐药性高达100%;对头孢噻肟、头孢噻吩、磺胺甲氧异口恶唑、红霉素的耐药性为80%;对头孢曲松、氟苯尼考的耐药性为60%;对丁胺卡那均高敏;除貉场3分离的大肠杆菌对磷霉素耐药外,其他4株菌均对磷霉素高度敏感。

罗布麻叶总黄酮提取物对抑郁大鼠脑内单胺类神经递质含量的影响

[目的]探讨罗布麻(Apocynum venetum L.)叶总黄酮提物抗抑郁作用的机理。[方法]采用大鼠慢性应激抑郁模型,利用液相色谱-质谱串联法测定大鼠脑内单胺类神经递质[去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)]的含量。[结果]慢性应激抑郁组动物组织内DA、5-HT和NE含量与正常组相比均极显著降低(P<0.01)。罗布麻总叶黄酮提取物处理组大鼠脑中DA和NE含量与慢性应激抑郁组相比显著或极显著上升,且随着剂量的增大,这种作用更加明显;70.0 mg/kg罗布麻叶黄酮提取物处理与盐酸氟西汀(3.5mg/kg)效果一致;但罗布麻叶总黄酮提取物处理组大鼠脑中5-HT含量与慢性应激抑郁组相比没有明显变化,阳性对照药氟西汀显著增加了抑郁大鼠脑组织中DA、NE和5-HT含量。[结论]该研究证实了抑郁症发病的神经递质假说,同时发现罗布麻叶可以逆转抑郁大鼠脑内单胺类物质NE、DA含量的降低,这也可能是其抗抑郁作用的机理之一。

河北省滦县牛梨形虫的分子检测

本研究旨在检测河北省滦县牛梨形虫的感染情况。采集滦县牛血液样本28份,并提取基因组DNA;根据已发表的梨形虫Tams1,P32表面蛋白以及18S rRNA基因序列,设计6对梨形虫特异性引物,以牛血液基因组DNA为模板,对不同梨形虫进行PCR或巢式PCR扩增。结果表明,在28份DNA样本中检测出双芽巴贝斯虫阳性样本7份,阳性率为25.00%;其他牛巴贝斯虫阳性样本3份,阳性率10.71%;而环形泰勒虫和瑟氏泰勒虫均未检测到阳性样本。