基于平行模板的重叠延伸PCR优化策略

基于平行模板的一步法重叠延伸PCR是传统基因定点突变的简化方案,其瑕疵是不完全延伸片段交叉互补会产生野生型干扰。为寻找原方案下形成交叉互补的关键因素,提高其定点突变效率,对诸多相关因素进行了分析。发现调整中介引物浓度稀释比可以增加目标突变体含量,但难以彻底消除野生型干扰;而基因长度则明显影响终产物构成。据此提出两步法重叠延伸PCR优化策略,先分别在两个小管中扩增突变位点上、下游片段,再直接混合继续PCR扩增目标基因突变体。以克隆细胞周期蛋白E的定点突变为例进行验证,得到90%阳性率。优化的两步法重叠延伸PCR方案既保持了相对简化的操作步骤,又明显提高了突变效率,是对传统重叠延伸PCR定点突变技术的重要改进。

探析社会化创意视频中议程设置的运作——以网络综艺《吐槽大会》为例

随着网络的发展、传播媒介的变革,信息传达活动愈发的丰富多样。社会化创意视频作为一个较为新颖的名词出现在学术界时间并不长,作为信息传达方式的一种,社会化创意视频就无法脱离议题设置。议程设置理论作为学术界的常青树,在网络时代依然具有强大的效果,尤其是2014年三位理论提出者进一步对议程设置理论进行了扩充,其中议程设置理论的基本效果、属性议程设置、导向需求理论等在社会化媒体发展到现阶段也已然经过了证明,因此本文将对基于社会化媒体进行传播的社会化创意视频中议程设置理论的运作进行分析。

人工真皮移植和异体脱细胞真皮基质移植对烧伤瘢痕患儿创面愈合及功能恢复的影响

目的探讨人工真皮移植和异体脱细胞真皮基质(ADM)移植对烧伤瘢痕患儿的创面愈合情况、功能恢复、愈合后瘢痕增生情况、瘙痒程度及创面不良事件发生率等的影响。方法回顾性分析2019年6月—2022年6月台州市立医院收治的80例烧伤瘢痕患儿病例,40例患儿纳入对照组(采用人工真皮移植复合自体刃厚皮片进行创面愈合);40例烧伤患儿纳入观察组(采用异体ADM移植复合自体刃厚皮进行创面愈合)。观察两组患者的治疗后的创面愈合情况,包括皮片成活和创面愈合的总有效率、供皮区创面的愈合时间、植皮区温哥华瘢痕量表(VSS)评分、局部功能(术后关节活动度、手功能)优良率、创面不良事件(疼痛、瘙痒)发生率及患儿治疗满意度。结果观察组的总有效率为97.5%,略微高于对照组92.5%,组间差异无统计学意义(χ^(2)=1.053,P>0.05)。两组患儿的供皮区创面愈合时间接近,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组术后3个月的(5.24±1.58)分,显著低于术前(13.96±2.39)分,且低于对照组术后3个月的(5.96±0.82)分,差异有统计学意义(t=2.558,P<0.05)。观察组的局部功能优良率为90%显著高于对照组72.5%,差异有统计学意义(χ^(2)=4.021,P<0.05)。两组不良反应:疼痛和瘙痒的发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。患儿满意度:观察组患儿的满意度为87.5%,对照组患儿的满意度为65%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.591,P<0.05)。结论异体ADM移植运用于烧伤瘢痕患儿创面愈合治疗较人工真皮移植愈合情况更好,可有效提高局部功能恢复水平,减轻愈合后创面瘢痕增生情况,患儿满意度高,值得临床推广应用。