牦牛Fas相关因子1多克隆抗体制备及初步应用

Fas相关因子1(Fas-associated factor-1,FAF1)为Fas家族成员,含有数个多功能结构域,可参与细胞凋亡、炎症、坏死、细胞增殖和蛋白质稳态等生物学过程。本研究旨在制备牦牛FAF1多克隆抗体,探索FAF1在牦牛不同年龄睾丸组织及不同繁殖周期卵巢的生物学作用。试验扩增出牦牛FAF 1基因全序列,构建牦牛pET28a-FAF1蛋白原核表达载体,优化诱导条件,通过Ni-NTA柱纯化后,免疫试验动物,获得兔源FAF1多克隆抗体。选取幼年(1、2周岁)、成年(3、4、6、7周岁)、老年(11周岁)三个年龄段雄性牦牛睾丸,选取不同繁殖周期(卵泡期、黄体期和妊娠期)雌性牦牛卵巢,采用实时荧光定量、Western blot、免疫组织化学(IHC)方法分别检测不同年龄雄性牦牛睾丸及不同繁殖周期雌性牦牛卵巢中FAF1 mRNA、蛋白相对表达量及蛋白的表达定位。结果表明,成功构建原核表达载体pET28a-FAF1,25℃、IPTG浓度为0.5 mmol·L^(-1)诱导5 h为最优诱导条件,该重组蛋白主要存在于包涵体中,免疫试验动物后获得兔源FAF1多克隆抗体,抗体效价为1∶1024000,特异性良好。睾丸组织实时荧光定量结果显示,FAF1 mRNA在3、4、7周岁雄性牦牛睾丸组织中相对表达量显著高于其他年龄段;睾丸组织Western blot结果显示,FAF1蛋白在11周岁时相对蛋白表达量显著高于其他年龄段,6、7周岁次之,3、4周岁FAF1相对蛋白表达量最低;睾丸组织免疫组织化学结果显示,FAF1主要表达于精子、精子细胞、精原细胞、初级精母细胞、支持细胞、睾丸间质细胞和管周肌样细胞中。卵巢组织实时荧光定量结果显示,雌性牦牛黄体期卵巢FAF1 mRNA相对表达量显著高于卵泡期和妊娠期,妊娠期卵巢次之,卵泡期卵巢最低;卵巢Western blot结果显示,卵泡期和妊娠期卵巢FAF1蛋白相对表达量显著高于黄体期,卵泡期卵巢表达量最高,妊娠期卵巢次之,黄体期卵巢中表达量最低;卵巢IHC结果显示FAF1主要表达于卵巢生殖上皮细胞、颗粒细胞、卵丘细胞、卵泡膜细胞和黄体细胞。FAF1 mRNA和蛋白在不同年龄睾丸及不同繁殖周期卵巢组织存在显著差异化表达,综上推测,FAF1可能与雄性牦牛的睾丸发育、精子发生及睾酮分泌密切相关,与雌性牦牛的卵泡闭锁、发育、成熟和黄体溶解生理过程相关,本研究为更进一步探索FAF1在牦牛生殖生理功能方面提供依据。

江苏地区对虾3种病毒病的流行病学调查及5株IHHNV的编码区基因序列分析

对虾白斑综合征病毒(WSSV)、桃拉综合征病毒(TSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是威胁对虾养殖的重要病毒。为了调查这3种病在江苏境内的流行情况,根据世界动物卫生组织(OIE)推荐的《水生动物疾病诊断手册》的PCR检测法对2015年5月—2016年5月采集的1436尾对虾样品进行3种疾病的流行病学调查。结果显示WSSV阳性率为17.20%,TSV阳性率为0%,IHHNV阳性率为39.48%。对江苏不同地区分离出的5株IHHNV进行基因序列分析,数据显示这5个地区的毒株均属于Ⅰ型感染株,与韩国株的进化关系较为接近。本研究通过调查以上3种病毒病在江苏境内的流行情况,并进行序列分析,发现江苏不同地区的凡纳滨对虾IHHNV感染均为Ⅰ型,研究结果对养殖虾的疾病防控有重要参考价值。

WSSV与IHHNV竞争对虾鳃细胞膜受体的研究

本研究对白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)与传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious Hypodermal and Haematopoietic Necrosis Virus,IHHNV)能否竞争虾鳃细胞膜上的NM23蛋白受体进行探索。先用蔗糖梯度离心法提纯WSSV的全蛋白,利用病毒覆盖蛋白印迹技术(VOPBA)与对虾鳃细胞膜NM23蛋白作用,将疑似蛋白条带进行LC-MS/MS分析,初步筛选出3种WSSV蛋白,分别为WSSV013、Wsv497和Wsv035,再构建这3种蛋白的原核表达载体,通过VOPBA和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)验证了Wsv497、Wsv035能与NM23蛋白相互作用,WSSV013不能与NM23蛋白相互作用。初步推测WSSV与IHHNV可能竞争对虾鳃细胞膜上的NM23蛋白受体,该结果为今后研究两种病毒竞争细胞膜受体和虾病毒蛋白作用机制提供理论基础。

“阿拉善·白中白”绒山羊种羊评比活动中参赛羊羊绒细度分析

本研究对2017~2020年参加“阿拉善·白中白”绒山羊种羊评比活动中参赛羊的羊绒细度进行统计分析,结果显示,参赛羊的羊绒细度呈逐年下降趋势,平均细度为13.81 um,且14.50 um以下的占所有参赛羊的比例为82%。结果说明,通过种羊大赛的评比活动,改变了养羊户的养殖理念,使阿拉善白绒山羊的羊绒品质得到提升。

巨膜长蝽的药剂防治

本文主要介绍对巨膜长蝽进行药剂防治试验,以期为阿拉善荒漠草原害虫防治提供理论依据和技术支持。

阿拉善蒙古牛乳营养成分分析研究报告

笔者以内蒙古自治区阿拉善左旗超格图呼热苏木、嘉尔赛汉镇和阿拉善右旗塔木素镇3地42份经产阿拉善蒙古牛生乳为研究对象,测定牛乳的营养成分、矿物质、微量元素、脂肪酸和氨基酸含量,并与荷斯坦生牛乳胶进行对比。结果阿拉善蒙古牛乳中常规营养指标含量及牛乳中钙、钾和镁含量显著高于荷斯坦奶牛乳,锌和镁的含量也高于荷斯坦奶牛乳。本次结果证明,阿拉善蒙古牛乳中各项指标都高于荷斯坦奶牛乳,是富含蛋白质、矿物质丰富、营养全面的优质高端乳品。

阿拉善蒙古牛不同部位肉品质特性研究

笔者以内蒙古自治区阿拉善盟巴彦浩特镇通古淖嘎查、额尔克哈什哈苏木和巴彦诺尔公苏木3地的18头阿拉善蒙古牛为研究对象,测定不同部位(股二头肌、肱二头肌、肋间肌、外脊)牛肉的营养成分、矿物质、微量元素和氨基酸,并进行对比。结果表明,阿拉善蒙古牛肉不同部位的水分含量相差不大,股二头肌的蛋白质含量相对较高,肱二头肌的脂肪含量相对较低。不同部位牛肉所含矿物质元素不同,外脊的镁、钠、钾含量均高于其他3个部位,分别为8.78%、29.24%和135.37%;钙含量最高的是肋间肌,含量为7.59%;磷含量最高的是股二头肌,含量为49.91%;肱二头肌中铁元素含量最高,为1.81%,其他3个部位差别不大;外脊中的硒元素含量相对高于其他3个部位,为0.52%;外脊和股二头肌的8种必需氨基酸总量(total essential amino acids,TEAA)较高,分别是7.14%和7.10%;肱二头肌的9种非必需氨基酸总量(total nonessential amino acid,TNEAA)高达9.50%,与肋间肌接近;股二头肌和外脊相对较低。外脊和股二头肌的17种氨基酸含量(total amino acid,TAA)总和都是16.44%,与肱二头肌16.14%的TAA含量接近;最低的是肋间肌,TAA含量为15.92%。不同部位的必需氨基酸中,赖氨酸(Lys)含量最高,蛋氨酸Met含量最低。非必需氨基酸中,谷氨酸(Glu)含量最高和胱氨酸(Cys)含量最低。研究表明,阿拉善蒙古牛肉富含蛋白质、必需氨基酸和矿物质,营养全面。

阿拉善蒙古牛肉和牛乳脂肪酸分析

笔者以内蒙古自治区阿拉善盟巴彦浩特镇通古淖嘎查、额尔克哈什哈苏木和巴彦诺尔公苏木3地的18头阿拉善蒙古牛为研究对象,测定不同部位(股二头肌、肱二头肌、肋间肌、外脊)牛肉的脂肪酸含量;以内蒙古自治区阿拉善左旗超格图呼热苏木、嘉尔赛汉镇和阿拉善右旗塔木素镇3地的42份经产阿拉善蒙古牛生乳为研究对象,测定牛乳的脂肪酸含量。结果表明,阿拉善蒙古牛肉的短链脂肪酸含量基本为0,中链脂肪酸含量也很低,以长链脂肪酸为主。阿拉善蒙古牛肉饱和脂肪酸含量最高的部位是肋间肌。在阿拉善地区蒙古牛乳中共检出了34种脂肪酸,以豆蔻酸、棕榈酸及硬脂酸为主,其中含量最高的脂肪酸为棕榈酸,约占总脂肪酸含量的19.5%。