重组水蛭素Ⅲ的质量控制标准研究

通过测定重组水蛭素Ⅲ的质粒中目的基因序列、重组水蛭素Ⅲ分子质量、C末端序列以及菌体蛋白和DNA残留量,对重组水蛭素Ⅲ的质量进行研究。结果:重组质粒经NheⅠ、HindⅢ双酶切和基因序列测定,表明工程菌所携带的质粒上含有完整的信号肽基因、NheⅠ酶切位点、水蛭素HV3基因和HindⅢ酶切位点;还原性SDS PAGE结果表明在14 000 u处有单一条带,为重组水蛭素Ⅲ二聚体;测定样品分子C端序列为E D YA D E P I P E F,与重组水蛭素Ⅲ的理论值一致;重组水蛭素Ⅲ样品中的残留菌体蛋白和DNA含量分别是0.02%和每剂量样品中残留DNA含量低于2.8 ng。结论:从基因水平、蛋白水平和杂质的角度证明重组水蛭素Ⅲ产品符合质量控制标准。

胰激肽释放酶对高血压病患者脑血管及微循环的影响

对确诊的72例原发性高血压病Ⅰ、Ⅱ期患者随机分成口服TPK和复降片两组,以前瞻性设计观察对血压、甲襞微循环、脑血管血流、血脂、血液粘度的影响。结果表明,TPK组除降压效果与复降片相似外,还具有(1)使脑血管中MCA的高流速恢复正常。(2)甲襞微循环检测的权值下降,流速增快,红细胞聚集减轻。(3)甘油三酯有显著降低。(4)低切变的全血粘度和血浆粘度明显下降。提示高血压病患者用TPK可有助于减轻其因微循环障碍而引起的其它脏器的并发症。

离子色谱法测定肝素钠中核苷酸的含量

肝素来源于动物的小肠粘膜,在提取过程中杂质核酸会转化为核苷酸,传统的紫外吸光光度法测定核苷酸杂质方法的灵敏度较低,为有效控制肝素钠中的杂质,文章采用C18色谱柱,在室温条件下采用超纯水∶甲醇∶冰醋酸∶正四丁基溴化铵（10%）[457∶40∶2.5∶0.25（体积比）]作为流动相,检测波长260 nm的离子色谱法测定肝素钠中核苷酸（胞苷酸、脱氧胞苷酸、腺苷酸、脱氧腺苷酸、鸟甘酸、脱氧鸟甘酸、尿甘酸、脱氧胸苷酸）的含量,结果测得的8种核苷酸标准曲线的相关系数均大于0.99,回收率为在96.3%~104.8%之间,重复性的RSD均小于2%。因此该方法检测快速,结果准确,重复性好,适用于肝素钠中核苷酸杂质的控制。