线粒体自噬受体蛋白FUN14结构域包含蛋白1在心血管疾病中的作用

作为细胞的有氧呼吸和能量供应中心,线粒体在细胞代谢、反应和凋亡中都发挥重要作用。因此,为了维持细胞功能,控制线粒体质量至关重要。线粒体自噬为一种选择性吞噬方式,通过靶向清除需要清除的功能失调的线粒体来维持细胞的动态平衡。FUN14结构域包含蛋白1(FUNDC1)是一种在心肌细胞线粒体外膜中高度表达、具有介导线粒体自噬功能的受体蛋白。多项研究表明,FUNDC1的表达水平和磷酸化状态与各种心血管疾病的发生、发展和预后密切相关。本文综述了FUNDC1介导的线粒体自噬的调控机制及其在心血管疾病中的作用。

恩格列净通过激活Nrf2信号减轻脂多糖致内皮细胞损伤

目的观察恩格列净(Empagliflozin,Em)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)损伤的作用及机制。方法将HUVEC随机分为4组:Control组、LPS(1μg/ml)组、LPS+Em(1μmol/L)组和LPS+Em+Nrf2 siRNA组,先使用Em和Nrf2 siRNA预处理12 h,然后再用LPS处理24 h。倒置显微镜下观察各组细胞形态变化,CCK-8法检测各组HUVEC活力,Western blot法检测核转录因子E2相关因子(nuclear factor erythroid2-related factor 2,Nrf2)、NADPH氧化酶2(NADPHOxidase2,NOX2)、NADPH氧化酶4(NADPH-Oxidase4,NOX4)、BCL2-相关X蛋白质(Bcl-2associatedX protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl2)的表达。DCFH-DA染色观察细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的变化,TUNEL染色观察细胞凋亡程度,免疫荧光染色检测各组细胞Nrf2表达。结果与Control组相比,LPS组细胞活力降低(P<0.01),Bax表达增加而Bcl2表达减少(P<0.05),细胞凋亡率上升(P<0.05),NOX2和NOX4及ROS含量升高(P<0.05),Nrf2表达下降(P<0.05)。Em干预后可以提高细胞活力(P<0.01),降低Bax表达和细胞凋亡率(P<0.05),并增加Bcl2表达(P<0.05),降低NOX2和NOX4表达及ROS含量(P<0.05),同时上调Nrf2表达(P<0.05)。而给予Nrf2 siRNA处理后,可明显阻断Em对HUVEC的保护作用和对Nrf2信号的调控(P<0.05)。结论Em可以改善LPS引起的HUVEC损伤,其机制与激活Nrf2信号、降低氧化应激有关。

脂质运载蛋白2通过介导焦亡加重人冠状动脉内皮细胞炎症损伤

目的探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)炎症损伤中的作用。方法HCAEC随机分为4组:对照组、LCN2特异性抑制剂ZINC00640089处理(对照+ZINC)组、肿瘤坏死因子(TNF)-α组和TNF-α+ZINC00640089(TNF-α+ZINC)组。对照+ZINC组及TNF-α+ZINC组使用ZINC00640089(10μM)预处理12 h,再使用TNF-α(40 ng/mL)处理TNF-α组及TNF-α+ZINC组细胞24 h。CCK-8法检测各组HCAEC细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组细胞培养基中LDH的活性,DCFH-DA染色观察细胞活性氧(ROS)含量变化,TUNEL染色法观察细胞凋亡率变化,免疫荧光染色法检测LCN2表达,Western blot法检测LCN2及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase 1)、Gasdermin D、白细胞介素(IL)-1β、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的表达。结果与对照组相比,对照+ZINC组各项指标差异均无统计学意义;TNF-α组细胞活力明显降低(P<0.05),培养基中LDH活性明显升高(P<0.05),ROS含量与TUNEL染色阳性细胞数增加(P均<0.05),LCN2及Caspase 1、Gasdermin D、IL-1β、NLRP3表达显著增加(P均<0.05);而使用ZINC00640089干预TNF-α+ZINC组HCAEC后可明显增加细胞活力(P<0.05),降低培养基中LDH活性、ROS含量及TUNEL染色阳性细胞数(P均<0.05),降低LCN2及Caspase 1、Gasdermin D、IL-1β、NLRP3表达(P均<0.05)。结论LCN2可以通过介导焦亡参与TNF-α诱导的HCAEC炎症损伤。