目的:研究冬凌草甲素(oridonin)衍生物HAO472对小鼠淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响。方法:无菌分离小鼠肠系膜淋巴结细胞,体外以抗小鼠CD3/CD28磁珠刺激淋巴细胞增殖及诱导分化,并加入不同浓度HAO472与淋巴细胞共培养,采用细胞计数...目的:研究冬凌草甲素(oridonin)衍生物HAO472对小鼠淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响。方法:无菌分离小鼠肠系膜淋巴结细胞,体外以抗小鼠CD3/CD28磁珠刺激淋巴细胞增殖及诱导分化,并加入不同浓度HAO472与淋巴细胞共培养,采用细胞计数试剂盒8(CCK8)检测HAO472对淋巴细胞增殖的影响;以羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色结合流式细胞术(FCM)检测48 h 0.5μg/mL和1.0μg/mL HAO472对CD4+T细胞增殖的作用,FCM检测48 h 0.5μg/mL和1.0μg/mL HAO472作用后CD4+T细胞分泌干扰素γ(IFN-γ)、白介素(IL)-2、IL-17的变化。结果 :0.5、1.0、1.5、2.0μg/mL的HAO472能明显抑制抗CD3/CD28磁珠诱导的淋巴细胞增殖(P<0.05),并呈剂量和时间依赖关系;淋巴细胞存活率说明0.5μg/mL和1.0μg/mL的HAO472对小鼠淋巴细胞无较大毒性作用。0.5μg/mL和1.0μg/mL的HAO472可降低CD4+T细胞的增殖指数(P<0.05)。抗CD3/CD28磁珠刺激的CD4+T细胞中,IL-17+CD4+T细胞和IFN-γ+CD4+T细胞比例为2.177%±0.229%、6.190%±0.806%。0.5μg/mL和1.0μg/mL HAO472作用后,IL-17+CD4+T细胞比例分别为1.156%±0.419%、0.806%±0.317%,IFN-γ+CD4+T细胞比例为3.964%±0.900%、2.684%±0.839%;HAO472明显抑制了CD4+T细胞分泌IL-17、IFN-γ的水平(P<0.05)。结论:水溶性冬凌草甲素衍生物HAO472可显著抑制抗CD3/CD28磁珠刺激下的小鼠淋巴细胞体外增殖及细胞因子分泌。展开更多
文摘目的:研究冬凌草甲素(oridonin)衍生物HAO472对小鼠淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响。方法:无菌分离小鼠肠系膜淋巴结细胞,体外以抗小鼠CD3/CD28磁珠刺激淋巴细胞增殖及诱导分化,并加入不同浓度HAO472与淋巴细胞共培养,采用细胞计数试剂盒8(CCK8)检测HAO472对淋巴细胞增殖的影响;以羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色结合流式细胞术(FCM)检测48 h 0.5μg/mL和1.0μg/mL HAO472对CD4+T细胞增殖的作用,FCM检测48 h 0.5μg/mL和1.0μg/mL HAO472作用后CD4+T细胞分泌干扰素γ(IFN-γ)、白介素(IL)-2、IL-17的变化。结果 :0.5、1.0、1.5、2.0μg/mL的HAO472能明显抑制抗CD3/CD28磁珠诱导的淋巴细胞增殖(P<0.05),并呈剂量和时间依赖关系;淋巴细胞存活率说明0.5μg/mL和1.0μg/mL的HAO472对小鼠淋巴细胞无较大毒性作用。0.5μg/mL和1.0μg/mL的HAO472可降低CD4+T细胞的增殖指数(P<0.05)。抗CD3/CD28磁珠刺激的CD4+T细胞中,IL-17+CD4+T细胞和IFN-γ+CD4+T细胞比例为2.177%±0.229%、6.190%±0.806%。0.5μg/mL和1.0μg/mL HAO472作用后,IL-17+CD4+T细胞比例分别为1.156%±0.419%、0.806%±0.317%,IFN-γ+CD4+T细胞比例为3.964%±0.900%、2.684%±0.839%;HAO472明显抑制了CD4+T细胞分泌IL-17、IFN-γ的水平(P<0.05)。结论:水溶性冬凌草甲素衍生物HAO472可显著抑制抗CD3/CD28磁珠刺激下的小鼠淋巴细胞体外增殖及细胞因子分泌。