影响蛋白质抗氧化活性的因素

以桃仁分离蛋白（PKPI）、大豆分离蛋白（SPI）、乳清分离蛋白（WPI）、酪蛋白（CA）为研究对象,以6-羟基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸（Trolox）为对照,测定其DPPH自由基清除率,研究蛋白质浓度、温度、热处理时间、盐离子及其浓度、pH对蛋白质抗氧化活性影响。结果表明：蛋白质浓度0.05~2.00g/100mL,4种蛋白质抗氧化活性随其浓度的增大而增强。温度对蛋白质抗氧化能力有不同程度影响,且当温度为40,40,30,70℃时,PKPI、WPI、CA、SPI分别达到最大抗氧化活性。热处理时间对SPI、CA、PKPI抗氧化活性影响较小,但WPI抗氧化活性随热处理时间的延长而增大。NaCl、CaCl_2浓度0~10 mmol/L时,其对SPI、CA抗氧化活性影响较小;PKPI抗氧化活性受NaCl影响较小,而CaCl_2浓度增大降低了PKPI抗氧化活性;WPI抗氧化活性随着NaCl和CaCl_2浓度的增大而减小,且CaCl_2对WPI抗氧化活性影响大于NaCl。4种蛋白质抗氧化活性都受pH影响,pH 2.0时,其抗氧化能力高于pH 8.0。

影响乳清分离蛋白和酪蛋白乳液物理稳定性因素研究

以乳清分离蛋白（WPI）和酪蛋白（CS）为乳化剂、以核桃油为油相,制备出了水包核桃油（O/W）乳状液.研究了蛋白质浓度、盐离子种类及其强度、pH等因素对乳液物理稳定性的影响.结果表明,当蛋白质浓度为0.2-1.5w/v%时,乳液物理稳定性随两种蛋白质浓度的增大而增强;pH对乳液稳定性影响较大,在蛋白质等电点（pI 4.6）附近,乳液失稳;CaCl2较NaCl更容易使两种蛋白乳液失稳.在pH7.0时,CS乳液在NaCl 300 mM时仍然稳定,而WPI乳液稳定的最大NaCl浓度为100mM;在pH3.0时,WPI乳液为50mM,而CS乳液为25mM.在乳液加入CaCl2后,WPI乳液在pH分别为7.0和3.0时,稳定的最大Ca2＋浓度均为2 500μM;而CS乳液在pH7.0时为1 000μM、pH3.0时为500μM.

黄曲霉毒素直接竞争法ELISA试剂盒的研制及其在花生和花生制品中的应用

本实验基于在黄曲霉毒素单克隆抗体基础上,建立酶联免疫(ELISA)直接法检测花生及其制品中黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2)的含量。应用黄曲霉毒素抗体和酶标记的黄曲霉毒素建立酶联免疫直接竞争法。试剂盒最低检出浓度为0.5ng/mL,标准曲线的线性范围为0.5～10.0ng/mL;对花生和花生粕的添加回收率为70.0%～110.0%,变异系数小于20%。本实验制备的黄曲霉毒素试剂盒能够应用于花生及其制品的检测,酶联免疫直接法是一种简单、快速、灵敏、准确的检测方法。

紫甘蓝花色苷对动脉粥样硬化兔血脂的调节作用

本文研究了紫甘蓝花色苷(RCA)对动脉粥样硬化兔血脂的调节作用。新西兰大白兔分为正常对照组、模型对照组、RCA低、中、高剂量组和阳性对照组(n=8)。正常对照组以普通饲料喂养,其他组均以高脂饲料喂养,6周后,RCA低、中、高三个剂量组分别灌胃30、60、90 mg/(kg·d)体重的花色苷,阳性对照组灌胃5 mg/(kg·d)体重的辛伐他汀(simvastatin),模型对照组灌胃2 m L/(kg·d)体重生理盐水。实验第6周和10周分别检测兔子血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等指标,10周后取血处死,取主动脉作病理形态学观察。结果发现辛伐他汀和RCA能明显降低兔子血清TG、TC、LDL-C的含量,病理切片显示,紫甘蓝花色苷可减轻动脉粥样硬化斑块等病理损伤,揭示RCA对高血脂和动脉粥样硬化具有重要防护作用,且呈现剂量-效应关系。

抗T-2毒素单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备并鉴定抗T-2毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株,以期为T-2毒素的快速检测提供有力的抗体工具。方法:采用琥珀酸酐法将T-2毒素活化为T-2HS,T-2HS在DCC与NHS作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联合成完全抗原。以T-2HS-BSA为抗原,免疫BALB/c小鼠,用ELISA筛选、建立分泌抗T-2毒素抗体的杂交瘤细胞株。测定单抗免疫球蛋白亚类及单抗效价,用间接竞争法检测单克隆抗体细胞株的特异性。结果:建立了1株稳定分泌抗T-2毒素抗体的杂交瘤细胞株T-1B3,该细胞株所分泌的单隆抗体Ig亚类为IgG1,ELISA检测结果表明抗T-2毒素抗体可以与T-2毒素发生特异性反应,工作浓度为1:6.5×104,IC50为3.6 ng/ml。该抗体与HT-2毒素的交叉反应为65.9%,与黄曲霉毒素无交叉。结论:制备出能分泌具有较高特异性和亲和力的抗T-2毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。