结缔组织生长因子体外调控奶牛乳腺上皮细胞生长和泌乳分化

旨在探究结缔组织生长因子在体外培养体系中对奶牛乳腺上皮细胞生长和泌乳分化的调控作用。本研究主要通过人为添加结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)重组蛋白和过表达CTGF基因分析其对细胞增殖、凋亡、乳脂和乳蛋白合成分泌及信号通路的影响。使用EdU试剂盒和流式细胞仪分别检测细胞增殖凋亡情况;应用尼罗红染料和甘油三酯试剂盒检测细胞内脂滴数量和细胞外培养液乳脂含量;实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测细胞增殖凋亡,β酪蛋白,乳脂和乳蛋白合成关键信号分子以及细胞外基质细胞表面受体β1整联蛋白的表达;免疫共沉淀分析CTGF和β1整联蛋白之间的蛋白质相互作用。结果表明:体外培养时,无论CTGF重组蛋白还是CTGF过表达均能通过增强增殖、抑制凋亡促进贴壁细胞生长;实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹结果表明,CTGF在转录和翻译水平增强促增殖的CyclinD1、MAPK和Bcl2表达,抑制促凋亡的Caspase3和Bax表达;CTGF一方面上调乳脂合成关键基因FASN、SREBP1、PPARγ表达水平,促进细胞内脂滴合成和胞外甘油三酯分泌;另一方面上调乳蛋白合成关键基因PRLR、STAT5和p-STAT5表达水平,进而显著促进β酪蛋白合成;CTGF上调β1整联蛋白表达水平,Co-IP也证实了CTGF和β1整联蛋白之间存在蛋白质相互作用。综上所述,CTGF促进体外培养的奶牛乳腺上皮细胞生长及泌乳能力;CTGF与β1整联蛋白共存于黏附复合物,可以通过影响β1整联蛋白信号途径实现其部分生物学作用。

miR-223对脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎症反应的影响

以中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞(dairy cow mammary epithelial cell,DCMECs)为研究模型,探讨mi R-223对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的DCMECs炎症反应与乳脂合成的影响。应用Western blot检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)的表达情况,通过脂质体转染技术将mi R-223转染至DCMECs,qRT-PCR检测mi R-223的相对表达量,采用原位荧光技术分别检测DCMECs的凋亡与乳脂合成能力。结果表明LPS诱导DCMECs炎症反应的最佳浓度为1μg/m L;添加LPS可促进DCMECs mi R-223的表达;DCMECs转染mi R-223后,mi R-223的表达显著上调;mi R-223可下调LPS诱导的DCMECs炎症蛋白因子TNF-α,上调乳脂合成相关蛋白FASN,抑制LPS诱导的细胞凋亡,促进LPS诱导的乳脂合成。

短链氯化石蜡通过ROS/NF-κB通路诱导PC12细胞神经毒性

目的:研究短链氯化石蜡(SCCPs)神经毒性机制。方法:显微镜下观察和CCK-8检测SCCPs不同浓度(0、50、100、200、300μg/L)暴露24 h的PC12细胞的生长密度和细胞活力;活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)检测细胞氧化损伤情况;Western blot检测iNOS、COX-2、p65、p-p65蛋白表达;qRT-PCR检测IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子转录水平。结果:显微镜观察和CCK-8结果显示PC12细胞的密度和细胞活力在200μg/L SCCPs暴露时降低(P<0.01),细胞内ROS和MDA相对水平在200μg/L SCCPs暴露时升高(P<0.001)。N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预下,NF-κB通路相关蛋白和mRNA表达被抑制(P<0.05)。结论:SCCPs可通过ROS/NF-κB通路诱导PC12细胞神经毒性。

脐带绕颈181例临床分析

目的探讨脐带绕颈的发生原因、诊断方法、产程处理及对围产儿的影响。方法选择脐带绕颈181例进行回顾性分析。结果脐带过短无1例发生脐带绕颈;脐带绕颈>3周者,脐带过长组明显多于脐带正常组(P<0.01),脐带绕颈的胎儿宫内窘迫率为25.41%,窒息率为11.60%,两组比较均P<0.01。脐带绕颈组自然分娩率明显低于对照组(P<0.01),阴道手术产与剖宫产均高于对照组(P<0.01)。结论脐带绕颈与脐带长度有一定的关系,脐带过长是导致脐带绕颈的基本原因。脐带绕颈会明显增加胎儿窘迫、新生儿窒息的发生率。

1220例未婚妊娠结局及生殖健康状况调查

为了解未婚妊娠女青年的生殖健康状况，我们对1999年1月～2000年12月来院要求终止妊娠的1220名女性进行了生殖健康状况调查和妊娠结局与年龄、文化程度关系的分析。结果显示；1220人中平均年龄21．3岁，最小15岁。早期行人工流产1147例（94％），中期引产44例（3．6％），足月分娩6例（0．5%)，宫外孕23例（1．9％）。20岁以下女青年中期妊娠引产和足月分娩的比例（8．9％）明显高于20岁以上未婚妇女（2．8％）。本组流动人口占81％。提示：流动人口中的围婚期女青年已成为生殖健康教育不可忽视的群体；同时应加强青少年性知识教育和避孕知识宣传。

盆腔、腹腔脓肿的病原学分析与临床处理

目的探讨盆腔、腹腔脓肿的病原学和临床处理。方法对109例盆腔、腹腔脓肿临床资料进行回顾性研究,分析其病原学、抗菌药物选择、治疗时机及方式与预后的关系。结果109例盆腔、腹腔脓肿全部获得脓液培养加药敏,致病菌培养阳性75例,以大肠埃希菌感染为主,敏感药物以美罗培南及阿米卡星为主;手术治疗90例,术后复发4例,B超引导下盆腔脓肿经阴道穿刺引流9例,10例保守治疗痊愈,无死亡病例。结论盆腔、腹腔脓肿治疗应根据细菌培养结果及早选用敏感抗菌药物,及时手术切除原发病灶或脓腔充分引流可改善预后。

米非司酮对葡萄胎组织增殖细胞核抗原表达影响及意义

目的通过研究葡萄胎米非司酮治疗前后增殖细胞核抗原(PCNA)表达的改变,探讨米非司酮对滋养细胞肿瘤组织的影响,及其用于妊娠滋养细胞肿瘤治疗的可行性。方法葡萄胎组织32例,应用免疫组织化学方法染色检测葡萄胎组织的PCNA表达。选取PCNA阳性表达病例10例,给予米非司酮治疗,1周后二次清宫,取组织重复染色,观察PCNA染色变化情况,分析米非司酮治疗对葡萄胎组织PCNA表达的影响。结果葡萄胎和正常胚胎组织PCNA阳性表达阳性率分别为46.9%和43.3%,差异无显著性(P>0.05)。但经米非司酮治疗后葡萄胎组织PCNA表达减弱,滋养细胞增生程度降低。全部治疗病例随访13～38个月,无1例进展成侵蚀性葡萄胎。结论米非司酮对葡萄胎组织PCNA表达具有明显抑制作用,能有效抑制葡萄胎滋养细胞增生,对葡萄胎预后未见不良影响,是葡萄胎安全的新辅助治疗手段。

休克型输卵管妊娠术式选择的影响因素探讨

目的探讨休克型输卵管妊娠手术方式选择的影响因素。方法对2006年12月至2008年6月55例休克型输卵管妊娠患者的术前血压、脉搏、腹腔内出血量、盆腹腔手术史、手术时间、住院时间及手术医生的腹腔镜手术技术的熟练程度等临床资料进行回顾性分析。结果腹腔内出血量800～3000mL,腹腔镜手术组(A组)与开腹手术组(B组)患者的一般情况无明显差别;A组共25例(45%)进行了腹腔镜手术,均由具备熟练的腹腔镜手术技术者完成,B组30例(55%)进行了开腹手术,由不具备熟练腹腔镜手术技术者完成;A组与B组有腹部手术史的比例分别为38%和45%,差异无统计学意义(P>0.05);术前最低收缩压、最低舒张压、腹腔内出血量、术中出血量、手术时间,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。A组的术后住院时间短于B组,分别为(2.5±0.8)d与(7.0±1.2)d,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论手术医生的腹腔镜操作技术的熟练程度是影响休克型宫外孕手术方式选择的重要因素,良好的腹腔镜手术配合、麻醉监护与自体输血技术是顺利完成腹腔镜手术的重要保障。

三种结核抗体试剂盒诊断女性生殖器结核的评价

女性生殖器结核又称盆腔结核,近年来有增长的趋势[1,2],且多伴有不孕.由于宫腔分泌物及经血涂片抗酸染色和结核菌培养阳性率低,使临床诊断有一定困难.而分子生物学技术如PCR所需设备复杂,费用昂贵,假阳性率高.

血清结核抗体检测对诊断女性盆腔结核的价值

目的 评价三种结核抗体检测试剂盒对女性盆腔结核的诊断价值。方法 用MycoDot、TB 快速卡和ICT TB卡检测了 6 3例女性盆腔结核患者血清 ,其中子宫内膜结核 18例 ,盆腔腹膜结核包裹性积液 2 4例 ,输卵管卵巢脓肿 11例 ,腹膜结核合并妇科肿瘤 10例 ,并与 84例妇科肿瘤患者、6 0例健康人血清结核抗体检测结果对比观察。结果 ICT TB、MycoDot、和TB 快速卡检测结核抗体的敏感性分别为 6 0 32 %、5 8 73%、79 36 % ,三者间差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。三种方法测均为 (+)的占 2 6 99% ,任意两种方法 (+)的占 5 3 95 % ,两者相加总阳性率 80 95 %。与非结核组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1)。结论 血清结核抗体检测 ,特别是上述 3种方法同时检测结核杆菌多种抗体是女性盆腔结核诊断和鉴别诊断的一项重要辅助手段 ,有较高的临床价值。

孕产妇腰痛

孕产妇腰痛于红１王若薇２综述侯树勋１审校关键词腰痛；妊娠；综述中国图书资料分类法分类号Ｒ７１４妊娠期间的腰背痛是一种常见症状，并经常被认为是正常妊娠的一部分〔１，２〕。据国外文献报道，其发病率大约在４９％～５０％，较非妊娠状态的同龄妇女腰背痛的发病率...

乳杆菌活菌胶囊治疗妊娠期细菌性阴道病及对妊娠结局的影响

目的调查妊娠期细菌性阴道病(BV)的发病情况,观察乳杆菌活菌胶囊治疗细菌性阴道病的疗效及对妊娠结局的影响。方法对不同孕周的926名孕妇进行BV筛查,确定妊娠期细菌性阴道病的发病率。乳杆菌活菌胶囊治疗82例,用药10d,停药1w后复查。结果妊娠期BV的检出率为17.71%。乳杆菌活菌胶囊治疗BV有效率89.02%,胎膜早破、早产、胎儿窘迫和新生儿窒息的发生,治疗组均低于未治疗组,差异有显著意义(P<0.05)。结论妊娠期乳杆菌活菌胶囊治疗BV可降低胎膜早破、早产、胎儿窘迫和新生儿窒息的发生,乳杆菌活菌胶囊是治疗BV的安全有效药物。我们认为,为了提高产科质量,有必要对妊娠妇女进行BV的系统筛查和治疗。

妇科腹腔镜手术教学方法的探讨

针对妇科腹腔镜技术培训中的教学方法进行了探讨。在教学中,应重视学习者的手术经验的积累;相关的理论知识学习;加强模拟训练和相关的实践培训。

中西医结合治疗产后大便难临床观察

目的:观察中西医结合治疗产后大便难的临床效果。方法:将97例产后大便难产妇随机分为中西医结合治疗组、西医对照组,观察各组患者的大便情况及乳汁分泌量。结果:中西医结合治疗组在缓解大便难症状、增加乳汁方面明显优于对照组(P>0.05)。结论:中西医结合治疗产后大便难不仅能快速缓解大便难症状,而且能增加产妇泌乳量,有利于母婴健康。

弓形体感染与自然流产关系

目的探讨自然流产与弓形体感染的关系。方法用ELISA法检测自然流产妇女与健康孕妇血清内TORCH系列病原体的IgM。结果自然流产妇女血清中弓形体(TOX)IgM阳性率与健康孕妇相比差异有高度显著性,而两组的风疹病毒(RUV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒型(HSV)的IgM阳性率差异无显著性。结论弓形体感染是自然流产的重要原因之一。

miR-182对牛乳腺上皮细胞中乳糖合成的影响

micro RNAs(miRNAs)是一类在生物基因组中存在的经典的非编码蛋白的内源性RNA基因(non-coding RNAs,nc RNA),本实验将以健康的处于泌乳期的中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞(Dairy cow mammary epithelial cells,DCMECs)为细胞模型,探究bta-miR-182对DCMECs中乳糖合成的调节作用。首先通过在线生物学信息网站预测miR-182与编码细胞上葡萄糖转运关键蛋白GLUT1的基因SLC2A1可能存在靶向结合关系,并通过双荧光素酶实验进行验证。其次采用脂质体转染技术体外瞬时转染miR-182 mimics进入DCMECs中,通过实时荧光定量PCR及western blotting技术,检测SLC2A1基因表达及GLUT1蛋白表达水平的变化。再收集细胞培养上清液,通过牛乳糖酶联检测试剂盒检测奶牛乳腺上皮细胞中乳糖含量水平的变化。实验结果显示mi R-182对奶牛乳腺上皮细胞中的乳糖的合成有明显影响作用,即miR-182对SLC2A1的表达具有明显的靶向负调控作用,且对DCMECs中乳糖的合成具有显著抑制作用,说明miR-182通过靶向调节SLC2A1的表达对奶牛乳腺上皮细胞中乳糖的合成进行负调控。

乳杆菌活菌胶囊治疗复发性细菌性阴道病的临床观察

目的观察乳杆菌活菌胶囊治疗复发性细菌性阴道病的疗效。方法取复发性细菌性阴道病患者120例,治疗组给予乳杆菌活菌胶囊治疗60例,对照组给予甲硝唑治疗60例,用药10d,停药后5、30、90d复查。结果治疗组再次复发率明显低于对照组(P<0.05)。结论乳杆菌活菌胶囊是治疗复发性细菌性阴道病的安全有效药物。此法疗效好,复发率低。

乳杆菌活菌胶囊治疗妊娠期细菌性阴道病的临床观察

目的调查妊娠期细菌性阴道病(BV)的发病情况,观察乳杆菌活菌胶囊治疗细菌性阴道病的疗效。方法对不同孕周的926名孕妇进行BV筛查,确定妊娠期细菌性阴道病的发病率。取BV患者164例,乳杆菌活菌胶囊治疗82例,孚舒达栓治疗82例,用药10d,停药1w后复查。结果妊娠期BV的检出率为17.71%。乳杆菌活菌胶囊治疗BV有效率89.02%,孚舒达栓治疗BV有效率87.80%,二者差异无显著性(P>0.5)。结论妊娠期BV有较高的发病率,乳杆菌活菌胶囊是治疗BV的安全有效药物。