检测兔抗大肠杆菌血清抗体的Dot-ELISA方法的建立

用兔大肠杆菌（ＲＣ８９１１２４）制备包被抗原，建立了检测兔抗大肠杆菌血清抗体的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法，抗原最佳稀释度为１∶５，待检血清最佳稀释度为１∶１０，酶标记山羊抗兔ＩｇＧ最佳稀释度为１∶４０００。对３０只大肠杆菌菌苗免疫兔进行检测，免疫后８天血清抗体即全部阳转，敏感性为１００％。分别对２３只兔轮状病毒、２０只病毒性出血症、２２只巴氏杆菌、７只波氏杆菌、１８只链球菌、２１只葡萄球菌感染兔进行血清检测，大多数均呈阴性反应，其特异性为９３．７％；２０只健康兔血清，均为阴性。对现地采集的４５２份兔血清进行检测，污染率平均为４８．２％。试验证明，本方法敏感性高、特异性好、操作简便快速、具有良好的重复性，适用于现地检疫。

鸽新城疫病毒的分离鉴定

用SPF鸡胚从疑似鸽新城疫的信鸽饲养场分离到一株新城疫病毒。分离株利用电镜负染技术观察到典型的新城疫病毒粒子。生物学试验表明，该株病毒具有较强的毒力，最小致死量鸡胚平均致死时间（MDT）为68.4小时，1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）为1.375，6周龄雏鸡静脉接种致病指数（IVPI）为1.34，在鸡胚成纤维细胞上能引起细胞病变。动物回归试验证明，分离株能致2月龄鸽死亡。

兔大肠杆菌病二价蜂胶灭活疫苗的研究

从分离鉴定的 15株致病性大肠杆菌中 ,筛选出 2株流行广泛 ,致病力强 ,免疫原性好 ,具有血清型 (0 10 3、0 85 )代表性的大肠杆菌作为制苗菌株 ,以蜂胶为佐剂 ,研制出的兔大肠杆菌病二价蜂胶灭活疫苗 ,使用安全 ,免疫效果好 ,保护率达87%以上。该苗在 4℃保存期为 8个月以上。在黑龙江、辽宁两省免疫 2万只家兔 ,1～ 2年的观察表明 ,用苗后兔群未出现不良反应 ,且用苗后仔兔成活率由 5 0 %左右提高到 85 %以上 。

兔多杀巴氏杆菌病的ELISA诊断

应用间接ELISA检查104例多杀巴氏杆菌(Pm)人工感染兔的血清,100/104为阳性反应,检出率96.2％。分别对30例波氏支气管败血菌、8例金黄色葡萄球菌、14例病毒性出血症病毒人工感染兔及50例健康兔的血清进行检查,均呈阴性反应。阻断试验证明本方法具有特异性。用A型荚膜Pm抗原分别对A型或D型Pm人工感染的61只、43只兔进行ELISA,未见型特异性。Pm人工感染兔在接种后15～20天血清抗体阳转,抗体存留期在6个月以上。

应用间接ELISA诊断兔轮状病毒性腹泻

应用间接 ELISA 检查10例兔轮状病毒感染兔的血清,感染后10天开始出现阳性反应,21天全部阳转.对巴氏杆菌病、波氏菌病、葡萄球菌病、病毒性出血症患兔的血清进行了排除检验。检查27例健康兔血清,ELISA 试验均为阴性。利用间接 ELISA 检查了644份兔血清,群养兔的阳性率达59.2%左右,散养兔为7.6%左右。本法具有特异性强、敏感性高、重复性好、简便、快速的优点。生产实践中有很大的应用价值。

山羊抗兔IgG抗血清的提纯及测定

山羊抗兔ＩｇＧ抗血清的提纯及测定王翠兰王云峰王英厚（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所１５０００１医学科学的飞速发展，对兽医免疫学的发展影响很大，促进了家畜免疫球蛋白的研究与应用。球蛋白提纯方法的多样化，使人们可以按试验需要根据蛋白质的理化性质及生物学活...

应用Dot-ELISA检测家兔魏氏梭菌抗毒素的研究

将A型魏氏梭菌培养液经蔡氏滤器过滤,硫酸铵沉淀,再经Sephadex G-200柱层析,收集毒素峰洗脱液,浓缩后制备A型魏氏梭菌毒素纯化抗原。用混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体,制备检测兔魏氏梭菌抗毒素的快速诊断膜。用Dot-ELISA检查6只魏氏梭菌高免兔的血清均呈阳性反应,对13只兔轮状病毒(LaRV)阳性血清、13只兔大肠杆菌(E.Coli)阳性血清、15只兔巴氏菌感染兔、16只波氏菌感染兔、9只葡萄球菌感染兔及27份健康兔血清检查均为阴性。A型魏氏梭菌阳性血清均可被特异性抗原所阻断。Dot-ELISA与SPA-ELISA对比差异不显著(P>0.05),两者阴、阳性符合率为89.06％。试验结果证明,本方法特异性强、敏感性高、操作简便、快速。为该病的监测净化提供了一种准确检验方法。

兔巴氏菌病、波氏菌病油佐剂灭活二联苗免疫的研究

油佐剂灭活二联苗对易感兔是安全的;二次免疫接种兔,对致死量兔巴氏菌或Ⅰ相波氏菌强毒攻击,保护率分别为96％、90.9％、0.5ml免疫剂量即可产生较强的免疫力。免疫接种后7～10天即可产生免疫力。免疫持续期达6～8个月。田间试验证实,疫苗安全有效,可控制本病的发生。

Dot－ELISA检测兔血清中兔轮状病毒抗体方法的建立

应用生长良好的第２４～４３代ＭＡ１０４传代细胞接种兔轮状病毒（ＬａＲＶ），待出现９０％以上细胞脱落时收获病毒液．制作纯化抗原。用混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体．制备检测ＬａＲＶ抗体的快速诊断膜，进行Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验，检查１０只人工感染兔血清．于感染后第１０天出现阳性反应，２１天全部阳转。应用该方法做了ＬａＲＶ阳性血清阻断试验、其它病的兔血清排除试验，对３８只健康兔血清的检查均为阴性。利用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对１３１６份兔血清的检查中．群养兔阳性率８３．５９％，散养兔为２７．５％。试验结果证明本法特异性强、敏感性高，操作简便、快速．适于现地ＬａＲＶ免疫监测及流行病学调查。

家兔葡葡球菌病血清诊断的研究 Ⅱ.免疫扩散抗原活性组分的测定

乙醇抽提抗原经 SDS-PAGE 测定,分子量约为12kd;扫描图与 SDS-PAGE 蛋白区带位置一致;该组分具有抗原活性.

家兔母源抗体测定初报

幼畜出生后,在本身的抗体产生机能尚未发育成熟之前,与母畜同居的短期内,会受到许多感染因子的威胁。在这期间,母源抗体在幼畜的防御感染中具有重要作用。本文仅就某兔场家兔抗多杀性巴氏杆菌、抗波氏支气管败血菌抗体垂直传递的初步试验结果加以报道。

免疫扩散法诊断家兔溶血性链球菌病的研究

用分离自家兔的溶血性链球菌制备琼扩抗原，以免疫扩散法对人工感染溶血性链球菌的免血清和现地兔血清进行检测，对前者检出率为１００％，对现地暴发本病的兔血清检出数为１７／３０．

黑龙江省家兔大肠埃希氏菌污染情况的调查

在自1996 年至1999 年的4 年中,共从腹泻兔群中分离出15 株致病性大肠杆菌,血清型鉴定表明,这15 株大肠杆菌分属于7 个血清型,其中以O68 的频率最高,达20.0 % ,其次是O7 和O130,达13.3% 。用试管凝集试验对1996 年前自黑龙江省部分兔群中采集的血清进行检查,发现以O103 和O7 血清型的污染率最高,分别达48 .4% 和24.3% 。结果表明,近年来黑龙江省兔群大肠杆菌的流行情况基本稳定,O7 菌株的污染一直处于较高的水平,同时又有波动,即从1996 年前以O103 等血清型的菌株流行为主,变为最近两年的以O68