δ-榄香烯通过线粒体途径诱导人结肠癌细胞DLD-1凋亡的研究

目的探讨δ-榄香烯诱导人结肠癌细胞DLD-1凋亡的作用及其机制。方法采用MTT法考察了δ-榄香烯对肿瘤细胞增殖的影响;ELISA法定量检测细胞DNA片段化;Annexin-VFITC/PI流式细胞术检测细胞PS外翻的影响;用Westernblot分析药物对蛋白质表达的影响。结果δ-榄香烯明显抑制DLD-1细胞的增殖。DNA核小体的检测、细胞PS外翻证实δ-榄香烯的抗肿瘤作用是以诱导肿瘤细胞凋亡的方式产生的;Bax蛋白转入线粒体内,细胞色素C的释放以及凋亡因子AIF从线粒体释放入胞质,δ-榄香烯激活caspase信号通路,引起pro-caspase-3蛋白水解为caspase-3,进一步发生PARP底物的断裂。结论δ-榄香烯通过线粒体途径诱导DLD-1细胞发生凋亡。

奥扎格雷钠对心肌缺血的保护作用研究

目的研究奥扎格雷钠对心肌缺血的保护作用。方法采用小鼠耐缺氧实验和垂体后叶素(PIT)所致大鼠心肌缺血试验研究奥扎格雷钠的保护作用。结果奥扎格雷钠能显著延长常压耐缺氧动物的存活时间,明显延长给予异丙肾上腺素小鼠常压耐缺氧存活时间;奥扎格雷钠显著抑制PIT致大鼠心电图第Ⅰ期和第Ⅱ期T波及J点变化,且能显著性减少PIT致大鼠心律失常的发生例数。结论奥扎格雷钠能明显改善PIT引起的大鼠心肌缺血的损伤程度,其机制可能是通过扩张冠脉,增加心肌的供血供氧而发挥抗心肌缺血的作用。

活性氧在δ-榄香烯诱导人结肠腺癌DLD-1细胞凋亡中的作用研究

目的探讨δ-榄香烯诱导人结肠腺癌DLD-1细胞凋亡的机制以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)在δ-榄香烯诱导人结肠腺癌细胞DLD-1凋亡中的作用。方法采用MTT法考察了δ-榄香烯对人结肠腺癌DLD-1细胞和人正常肝胚胎WRL-68细胞增殖的影响;采用氯甲基二氯荧光素二乙酸酯(CM-H2DCFDA)定量检测凋亡过程中ROS的变化;流式细胞术JC-1标记检测凋亡细胞中线粒体膜电位(Δφm)的影响。结果δ-榄香烯明显抑制DLD-1细胞的增殖,对WRL-68细胞的细胞毒作用不明显。200μM的δ-榄香烯作用DLD-1细胞1小时、3小时和6小时所引起的ROS含量的增加,分别接近空白对照组的7.8倍、18.2倍和21.8倍;这种作用可以被谷胱甘肽(glu-tathione,GSH)(ROS的清除剂)显著性抑制,即加入GSH后δ-榄香烯对ROS生成率(3.46%)与空白对照(2.11%)相比无显著性差异。流式细胞仪检测结果表明,线粒体膜电位(Dφm)的降低呈时间依赖性,6小时、12小时、24小时线粒体膜电位降低量分别是空白组的(2.24±0.12)倍,(2.85±0.33)倍,(5.11±0.24)倍。结论Δφm的降低表明δ-榄香烯的抗肿瘤作用是以诱导肿瘤细胞凋亡的方式产生的,且其凋亡过程提示可能与ROS的生成增加相关。

培养药学应用型人才的高校教育改革的几点思考

近年来，教育部以及很多学校都在强调加强实践，各个学校的实践条件在本科教育评估的促进下也改善了许多。然而很多学校却将学生的实践环节更多地封闭于学校之中。殊不知学生在社会和业界的实践是校内实践不可替代的，也是完全不能比拟的。李培根校长对此认为，如果因为校内实践条件的改善而把学生的实践置于更加封闭于校园环境之中，

陆英颗粒对急性实验性肝损伤的保护作用研究

目的:研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用。方法:采用急性CCl4肝损伤模型、D-半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤模型、ConA致小鼠急性肝损伤模型研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用。结果:陆英颗粒对CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用,其保肝作用可能与对抗脂质过氧化以及提高肝细胞膜和微粒体膜钙泵的活性有关;对D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤和ConA所致小鼠急性肝损伤亦有明显的保护作用。结论:陆英颗粒对多种急性实验性肝损伤有较明显的保护作用。

何首乌醇提物对脂多糖诱导大鼠肝TLR4/TRIF/IRF-3信号通路的影响

目的研究大鼠经革兰阴性菌外膜成分脂多糖(LPS)诱导后,何首乌醇提物(PMT)对大鼠的肝毒性,并探讨其肝损伤机制与固有免疫炎症信号通路Toll样受体4(TLR4)-干扰素调节因子3(IRF-3)的关系。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、对乙酰氨基酚(APAP,625 mg/kg)组、PMT 6 g/kg(PMT-L)和12 g/kg(PMT-H)组、脂多糖(LPS,4 g/L)组、(LPS+APAP)和(LPS+PMT-L/-H)组。后4组经尾静脉注射LPS 4 mg/kg,2 h后各实验组分别灌胃给予相应药物每日1次,连续7 d。观察每日大鼠体质量变化,分别在给药结束后2 h、14 h、5 d和8 d经HE染色检测大鼠组织形态变化,采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法及Western印迹法检测肝细胞中TLR4信号通路干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、IRF-3的表达情况。结果大鼠尾静脉注射LPS诱导后2 h,肝实质出现微小肉芽肿,其后,LPS组大鼠肝损伤逐渐恢复。诱导第8天时,LPS组大鼠肝组织结构清晰完整,LPS+APAP组和LPS+PMT各剂量组肝细胞灶状坏死,伴炎细胞浸润。RT-q PCR检测法和Western印迹法检测结果显示,单独灌胃何首乌醇提物的大鼠肝细胞中TLR4、TRIF和IRF-3的m RNA和蛋白表达水平与正常组相比无显著差异,而经LPS诱导的大鼠肝细胞TLR4、TRIF和IRF-3 m RNA和蛋白表达水平显著高于正常对照组,与LPS组相比有显著性差异(P<0.05),但PMT各剂量组间相比无显著差异。结论何首乌醇提物经LPS诱导能引起肝损伤,其引起的肝毒性与正性调控TLR4/IRF-3信号通路的表达有关,其肝损伤程度与给药剂量无关,提示TLR4/IRF-3信号通路的激活是LPS诱导何首乌醇提物肝损伤的作用机制之一。

活性氧与线粒体损伤研究概述

线粒体在细胞生长、增殖分化和死亡等生命活动中扮演着十分重要的调控者的角色,也是许多药物毒性作用的靶标。活性氧(ROS)是细胞代谢不可避免的产物,其能作用于线粒体,是引起线粒体损伤主要的途径之一。本文介绍了线粒体的结构与功能,重点从线粒体氧化磷酸化功能的破坏、线粒体膜通透性的改变和线粒体DNA的突变等方面阐述了ROS引起线粒体损伤的机制。

陆英提取物对急性化学性肝损伤的保护作用

目的研究陆英中保肝降酶活性部位提取物(LY)保肝降酶的功效。方法采用急性CCl4肝损伤模型、D半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤模型、ConA致小鼠急性肝损伤模型研究LY灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用,同时采用碳粒廓清实验考察了LY灌胃给药对小鼠非特异性免疫功能的的影响。结果LY对CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用,其保肝作用可能与对抗脂质过氧化有关;对D半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤和ConA所致小鼠急性肝损伤亦有明显的保护作用;能增强小鼠非特异性免疫功能。结论LY对多种急性实验性肝损伤有明显的保护作用并且能增强小鼠非特异性免疫功能的作用。

陆英不同工艺提取物对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响实验研究

目的:筛选陆英具有保肝降酶作用的优选提取工艺,并探讨陆英中保肝降酶的活性部位。方法:采用了小鼠急性CCl4肝损伤模型,对陆英不同提取工艺所得的提取物进行保肝降酶药效学筛选,并把筛选出的最佳工艺提取物用不同溶剂萃取法和大孔吸附树脂分离法对活性部位进行了探索。结果:陆英75%乙醇提取物能非常显著地对抗CCl4导致小鼠肝损伤,效果优于其他提取工艺;陆英75%乙醇提取物经乙酸乙酯萃取部分能减少CCl4导致小鼠肝损伤,效果明显弱于陆英75%乙醇总提物,而石油醚、正丁醇和水萃取部分则无明显效果;陆英75%乙醇提取物经大孔吸附树脂纯化后30%、60%和95%乙醇洗脱液的高剂量和低剂量组均能对抗CCl4导致小鼠肝损伤,但30%乙醇洗脱液的作用最显著,并呈现剂量依赖性,且效果与陆英75%乙醇总提物相似。结论:75%乙醇为陆英的优选提取溶剂,陆英75%乙醇提取物若经不同极性溶剂萃取,活性部位为乙酸乙酯萃取部分;若经大孔树脂纯化,则活性有效部分主要集中在30%乙醇洗脱液部分。

纳豆激酶纤维蛋白溶解和抗血栓作用初步研究

目的:初步探讨纳豆激酶的纤维蛋白溶解和抗血栓的作用。方法:通过研究纳豆激酶对正常新西兰兔凝血功能、纤维蛋白降解产物和大鼠血小板血栓(动-静脉旁路法)的影响来评价纳豆激酶的纤溶和抗血栓作用。结果:纳豆激酶中、高剂量可明显缩短ELT、延长TT、APTT,增加FDP的含量;纳豆激酶高剂量能减少大鼠血小板血栓模型之血栓湿重,但对血栓干重无明显影响。结论:纳豆激酶具有纤维蛋白溶解作用。

陆英颗粒对CCl_4致小鼠急性肝损伤保护作用研究

目的研究陆英颗粒灌胃给药对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法采用急性CCl4肝损伤模型,给予小鼠陆英颗粒灌胃7d,观察其对给予0.1%CCl416h后各组血清ALT、AST、TP、Alb、GLO、A/G、TG及肝组织TP、TG、MDA、T-AOC、GSH、T-SOD及Ca2+-ATPase活力的影响。结果陆英颗粒能显著对抗CCl4致小鼠急性肝损伤导致的血清中ALT、AST升高,减轻TG在肝组织内的蓄积和降低MDA的含量,提高肝组织T-SOD的活力及总抗氧化能力(T-AOC),亦能提高肝细胞膜和微粒体膜的Ca2+-ATPase的活性,减少GSH代偿性增高的程度;病理结果也表明陆英颗粒对肝细胞损伤具有明显的保护作用;并有较明显的量效关系。结论陆英颗粒对CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用。

乌索酸抗实验性肝损伤作用与大鼠经口给药药动学研究

目的:乌索酸(熊果酸)是从中草药中提取分离得到的一个三萜类化合物,研究其灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用和药动学特点。方法:采用急性CCl_4肝损伤模型、D-半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤模型究乌索酸灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用,并建立LC-MS分析方法检测乌索酸灌胃给药(80mg/kg)后大鼠血浆中乌索酸含量。结果:乌索酸对CCl_4致小鼠急性肝损伤及D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤没有保护作用,大鼠灌胃给予乌索酸后用LC-MS在血浆中未检测到乌索酸。结论:乌索酸经口给药由于吸收很差,故没有抗实验性肝损伤作用。

榄香烯联合5-FU体内外抑制人胃癌MGC80-3细胞增殖与诱导凋亡作用的研究

目的研究中药莪术提取物榄香烯制剂(Elemene)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对MGC80-3细胞增殖的抑制及诱导凋亡的作用。方法采用MTT法考察榄香烯、5-FU单药及联合作用于MGC80-3细胞的体外抗肿瘤效应;应用中效原理进行统计分析单药及联合用药对肿瘤细胞生长的影响,确定联合用药时的效应(Fa)合用指数(CI)的关系;流式细胞仪检测细胞凋亡周期改变。通过建立MGC80-3裸鼠体内异种肿瘤模型,考察榄香烯及5-FU单用及合用对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。结果体外试验结果表明榄香烯与5-FU联合应用作用于MGC80-3细胞可产生较好协同效应,单染法(PI)检测到榄香烯与5-FU联合之后能够使MGC80-3细胞表现出显著的G0/G1期阻滞作用;体内试验结果表明榄香烯单药及与5-FU联合作用对MGC80-3裸鼠异种肿瘤生长均有明显的抑制作用,且联合用药组抑瘤率可达84.68%。结论榄香烯联合5-FU作用于MGC80-3肿瘤细胞株可产生较好的协同效应。

复方灵尼胶囊治疗艾滋病的临床观察

目的:探讨复方灵尼胶囊艾滋病的临床疗效。方法:应用复方灵尼胶囊治疗艾滋病患者10例,检测服药前后CD3+,CD4+,CD8+及病毒载量。结果:10例病人中经过治疗有7例病人病毒载量下降明显,均小于500cp/ml,2例病毒载量稍有下降,1例病毒载量上升,并且5例病人的CD4+细胞回复到正常人的水平,9例病人的CD8+细胞恢复到正常人的水平。结论:复方灵尼胶囊具备在活体内抑制HIV病毒的能力,具有增强免疫功能的作用。

清开灵栓主要药效学和初步安全性研究

目的比较清开灵注射液更改剂型后其安全性和主要药效学作用与清开灵注射液、口服液是否具有差别,为清开灵栓剂的开发提供理论依据。方法通过大鼠最大给药量试验、内毒素致家兔发热模型、硝酸士的宁致大鼠惊厥模型来考察清开灵栓剂的安全性和解热、抗惊厥作用。结果清开灵栓的解热、抗惊厥作用均强于清开灵注射液和清开灵口服液结论清开灵注射液更改成清开灵栓后安全性较好、药效作用不但没有减弱反而有所增强,是一种值得进一步开发的新剂型,同时也提示栓剂是中药注射液可借鉴的发展方向之一。

循证护理在ICU患者肠内营养支持并发腹泻治疗中的应用效果分析

分析对ICU肠内营养支持且同时出现腹泻的患者实施循证护理干预的效果。方法 将我院ICU60例肠内营养支持且同时出现腹泻的患者设置为研究对象,研究启动时间为2019.01、截止时间为2021.12,通过随机摸红蓝球的形式进行组别划分(各30例),将摸蓝球的患儿当作对照组,实施常规护理;将摸红球的患儿当作实验组,实施循证护理。对比两组腹泻缓解时间、腹泻次数、胃肠症状评定量表(GSRS)评分、生活质量量表(SF-36)及护理满意度。结果 实验组腹泻恢复时间与对照组相比更短,腹泻发生次数更少,护理满意度度评分更高(P<0.05);护理实施前组间GSRS、SF-36评分对比未显示明显差异(P>0.05),护理实施后实验组GSRS于对照组相比更低、SF-36评分更高(P<0.05)。结论 对ICU肠内营养支持且同时出现腹泻的患者实施循证护理可具有明确改善腹泻的作用,建议采纳。

儿童药物安全性评价研究进展

儿童用药的安全性与风险评估已成为近年来药物研发与监管工作中的热点。目前针对儿童用药的临床前安全评价工作的缺失导致临床不合理用药问题突出,为儿童用药埋下了安全隐患,严重威胁了儿童群体的健康与生命安全。因此,各国政府纷纷制定了相关法规政策进行规范管控。在临床前研究方面,由于幼龄动物与儿童的发育进程近似,近年来欧美国家开展了一系列幼龄动物实验并不断完善指导原则,逐渐能有效地预测药物对儿童的毒性影响,推动了儿童药物研发。本文从儿童药物研发所面临的难题,儿童与成人的生理差别,特别是开展幼龄动物临床前安全评价实验的重要性与关注点等方面进行详细的分析说明,以期对中国儿童药物安全评价工作提供参考依据。

一类创新药苯胺洛芬注射液镇痛作用研究

目的:评价化学药品一类新药苯胺洛芬注射液的镇痛作用。方法:通过甲醛、热水、热板、电刺激致小鼠疼痛模型来评价苯胺洛芬注射液的镇痛作用,并选用了氟比洛芬酯注射液和喷他佐辛注射液进行对比研究。结果:苯胺洛芬注射液对甲醛、热板致小鼠疼痛模型均有明显的镇痛作用,且镇痛效果优于等剂量下的氟比洛芬酯注射液,但苯胺洛芬注射液对电刺激、热水致痛模型镇痛作用不明显。结论:苯胺洛芬注射液具有良好的镇痛作用,属于外周性镇痛药,其镇痛作用强于氟比洛芬酯注射液,是一个具有较大开发潜力的非甾体类镇痛新药。

肝癌干细胞自我更新信号转导及作为潜在治疗靶点的研究进展

肝细胞癌复发率高、易转移和化疗耐药等严重影响患者生存率。临床研究发现,这很大程度上归咎于肝癌干细胞(CSC)或肿瘤起始细胞的存在或残留。本文将重点围绕肝CSC特点,主要临床表征,自我更新信号通路Wnt/β联蛋白、信号转导和转录激活物3、NANOG、膜联蛋白A3/Jun激酶和四跨膜蛋白L6家族成员5/CD44讨论,并针对信号通路中潜在靶点的药物治疗进行分析,以期为寻找选择性靶向肝CSC自我更新信号的药物提供依据。

LEW002对动物实验性急性胃溃疡的影响

目的研究质子泵抑制剂LEW002对动物实验性急性胃溃疡的影响。方法构建小鼠Reserpine型胃溃疡模型,小鼠Asprin型胃溃疡、大鼠幽门结扎型胃溃疡模型、大鼠无水乙醇型胃溃疡模型、大鼠束水应激型胃溃疡模型、豚鼠组胺型胃溃疡模型,并与左旋兰索拉唑、右旋兰索拉唑、注射用兰索拉唑进行对比。考察LEW002对动物实验性急性胃溃疡的治疗作用。结果 AKC263能显著降低上述模型的溃疡指数。结论提示对动物急性胃溃疡有明确的疗效。在本实验室条件下,对动物等临床拟用剂量给药,LEW002的药效≈右旋兰索拉唑>右旋兰索拉唑口服制剂>左旋兰索拉唑。