传染性法氏囊病病毒多聚蛋白基因在家蚕中的表达

将传染性法氏囊病病毒 (IBDV)细胞致弱株 (JD1株 )的基因组A节段基因重组于家蚕杆状病毒转移载体pAcHLT C中 ,获得的重组转移载体pAcHLT C A与线性化病毒Bm BacPAK6DNA共转染家蚕培养细胞 ,获得重组病毒BacPAK A。DIG标记的DNA点杂交证实重组病毒基因组中含有A节段基因 ,重组病毒感染家蚕 5龄幼虫进行表达 ,ELISA和Westernblotting等结果表明多聚蛋白基因在蚕体内得到了表达 ,表达产物具有免疫反应性 ,表达量在感染后 5～ 6d达到最高。家蚕生物反应器表达IBDV多聚蛋白具有我国的资源优势 ,为今后研制低成本、实用化的IBDV基因工程疫苗打下基础。

传染性法氏囊病病毒VP2基因在家蚕中的表达

传染性法氏囊病病毒 (IBDV)能引起以淋巴细胞衰竭为特征的免疫抑制性疾病。IBDV的主要结构蛋白 VP2蛋白是主要的宿主保护性抗原 ,在 VP2上的点突变是造成 IBDV抗原漂变的主要原因。为研究 VP2作为 IBDV亚单位疫苗的潜力 ,本实验将 IBDV JD1株的 VP2基因重组于家蚕杆状病毒转移载体 p Bac PAK8中 ,将重组载体 p Bac PAK-VP2与病毒 Bm-Bac PAK6的线性化 DNA共转染家蚕培养细胞 ,获得重组病毒 Bac PAK-VP2。DIG点杂交表明重组病毒基因组中含有 VP2基因。重组病毒感染家蚕 5龄幼虫后 ,用 EL ISA、SDS-PAGE和 Western blotting检测蚕血淋巴中重组 VP2蛋白的相对表达量及免疫反应性。结果表明重组 VP2蛋白具有免疫反应性 ,感染后 5～ 6