家蝇Actin-5 C基因启动子的生物信息学分析及载体构建

目的运用生物信息学分析家蝇(Musca domestica L.)肌动蛋白5 C(Actin-5 C)基因,构建Actin-5 C启动子双荧光素酶报告基因表达载体。方法使用伯克利果蝇基因组计划(BDGP)在线分析软件、Promoter 2.0和在线比对启动子网站(FPROM)等多种启动子预测工具,分析、预测家蝇肌动蛋白Actin-5 C基因5′端上游非编码区,根据预测结果构建截短式启动子萤火虫荧光素酶报告基因重组质粒,转染草地贪夜蛾卵巢细胞系sf9细胞,并使用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)进行萤火虫荧光素酶报告基因的检测。结果Actin-5 C基因5′端上游的-2609~-94 bp,预测有启动活性,且分值达0.8分以上,其中-2198~-2148 bp分值最高、达0.98分;在-220 bp和-1444 bp处分别检测到CAAT和TATA盒信号,经比较取最有可能的1156 bp(-1236~-80 bp)、1745 bp(-1825~-80 bp)及2059 bp(-2139~-80 bp)截断启动子片段,构建pGL 3-1156、pGL 3-1745及pGL 3-2059质粒,RT-PCR检测到3种重组质粒中的萤火虫荧光素酶报告基因转录成功。结论生物信息学预测工具研究家蝇Actin-5 C基因启动子可以简化认知基因的过程,根据预测结果构建了家蝇Actin-5 C基因萤火虫荧光素酶报告基因表达载体。

《1844年经济学哲学手稿》中的文艺学思想探微

马克思《1844年经济学哲学手稿》是其理论走向成熟的一个关键点,《手稿》集中体现了这一时期的理论成果,以《手稿》为标志,提出了实践的概念,把人类在社会生活中的实践活动与人的审美活动联系起来。虽然《手稿》不是一部文艺学专著,但它为马克思主义文艺学的发展奠定了基础,历史唯物主义的文艺学由此开始,同时为我国当代文艺学的发展提供了理论支撑。

正义秉性的范式研究——以《正义的两面》为视角

自古以来,中西方都有关于正义问题的探讨,《正义的两面》关于正义这个主题,慈继伟教授选择了一个独特的研究范式,即相对于实质性或规范性正义问题研究,正义道德心理学同样重要,反思正义心理的属性及其可能产生的后果,并基于正义秉性提出解释性理论,而不直接涉及正义的规范性内容,另辟蹊径,阐述了正义的有条件性和无条件性如何并存以及个体之间相互性的社会化结果。

显微注射法制备转基因家蝇技术的建立

旨在利用显微注射法对早期家蝇(Musca domestica L.)卵注射含有增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的转座子载体,实现活体基因稳定表达并对其进行验证,为开展家蝇基因功能的研究奠定基础。文中自制适用于显微注射家蝇卵的硼硅酸盐玻璃微量注射针,摸索出家蝇卵壳的软化处理条件,以NanojectⅢ高精度微量注射器为主体构建适用于家蝇的显微注射技术平台;将含有眼部特异表达的3×P3启动子、EGFP的重组质粒PiggyBac-[3×P3]-EGFP与稳定遗传表达辅助质粒pHA3pig helper显微注射到处理过的家蝇卵中,待羽化观察眼部发光情况,检测EGFP的表达及转录水平。结果表明,将家蝇卵在漂白水中漂洗35 s时卵的正常孵化率为55%,处理35 s的卵壳其硬度适宜注射且注射针头不易破碎;羽化后的家蝇眼部带有绿色荧光的占比约为3%,通过分子检测,家蝇的DNA和RNA中均扩增出EGFP特异片段,大小为750 bp。通过该技术平台,能够便捷、有效地实现报告基因在家蝇中的稳定表达,建立以家蝇为主体的生物反应器,为后续家蝇基因功能的研究提供一定参考价值。

新时代正义文化的哲学意蕴

新时代我国“正义”思想是中国特色社会主义的重要组成部分,其“正义”思想以唯物主义为基本立场,立足于对具体国情的分析,成为新时代我国正义思想的逻辑起点,具有强烈的现实关切。正义作为人们的价值与文化诉求,是经济发展水平基础上的利益关系的差异性需求,强调公平正义的唯物史观维度,以普遍联系的视野来审视法治建设的进程,用全面系统的思路统筹法治建设的任务,使用矛盾分析法来解决法治建设过程中存在的问题,体现出马克思主义哲学认识论的观点,并且丰富了马克思主义哲学的正义观。

Elovl5转基因果蝇产生更长链的脂肪酸

大多数昆虫体内的多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids,PUFAs)主要是碳链长为18个碳原子的多不饱和脂肪酸(C18-PUFAs),几乎不含价值更高、生物活性更强的C20、C22等长链的多不饱和脂肪酸。文中利用黑腹果蝇Drosophila melanogaster(Fruit fly)作为生物模型,将来源于小鼠的Δ6-脂肪酸延长酶Elovl5基因优化后转移到果蝇中使其表达。结果表明通过显微注射法成功将含有Elovl5基因的载体导入果蝇胚胎中,在荧光显微镜下检测到在果蝇整个发育阶段均有增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)表达,同时Elovl5基因的表达显著地促使果蝇体内C18多不饱和脂肪酸向着更长链多不饱和脂肪酸的生物合成方向转化。使用转基因技术得到体内富含C20、C22等长链多不饱和脂肪酸的转基因果蝇模型,将为进一步开展果蝇多不饱和脂肪酸生物合成的机制提供研究基础。

中庸:孔子实践理性的原则是知行合一

孔子是中国历史上影响最大的思想家,而"知行合一"又是儒家传统伦理思想的重要议题,占主导地位的儒家哲学传统大多数都有"知行合一"的思想,即认知与实践的统一。最早明确论述知行关系的哲学家就是孔子,一方面,他强调"知"对"行"的指导意义,另一方面,又强调认知的目的在于实践,实践又会反过来促进认知,学以致用。后来王阳明等人"知行合一"学说就是对孔子知行问题的总结与发展。