APP17肽对糖尿病脑病小鼠海马IRS-1、IGF-1R表达的影响

目的 通过对胰岛素受体底物 1(IRS 1)、胰岛素样生长因子 1受体 (IGF 1R)在海马表达的观察 ,研究APP17肽对糖尿病脑病小鼠海马神经元IRS 1、IGF 1R的影响。 方法 用链脲佐菌素 (STZ)诱发小鼠糖尿病模型 ,并皮下注射APP17肽对糖尿病小鼠进行治疗 ,4周后取脑组织做IRS 1、IGF 1R免疫组织化学染色。 结果 糖尿病小鼠海马内IRS 1、IGF 1R阳性反应神经元胞浆与突起深染 ,而正常小鼠及APP17肽保护的糖尿病小鼠海马阳性细胞数目少 ,染色淡。 结论 糖尿病小鼠海马IRS 1、IGF 1R广泛表达 ;APP17肽能影响糖尿病脑病小鼠脑内IRS 1,IGF 1R的表达 。

胰岛素样生长因子受体-1在糖尿病小鼠脑内的分布

为了观察糖尿病小鼠脑内胰岛素样生长因子受体 -1( IGF-1R)的分布及 APP17肽对其分布的影响 ,本研究用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型 ,并向皮下注射 APP17肽 (β-淀粉样肽前体蛋白 319-335 )给予治疗 ,4周后取脑组织进行 IGF-1R免疫组织化学反应。结果显示 ,糖尿病组 IGF-1R阳性反应细胞广泛分布于皮层、海马、丘脑、下丘脑等部位 ,而正常对照组及 APP17肽治疗组仅在皮层、海马可见阳性反应细胞 ,且着色淡。结果表明 ,糖尿病小鼠脑内多个区域存在较多的 IGF -1R阳性神经元 ,而APP17肽能使 IGF

姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠Aβ生成和降解的影响

目的观察姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠β淀粉样蛋白(βamyloid,Aβ)生成酶早老素2(presenilin2,PS2)和Aβ降解酶胰岛素降解酶(insulin degrading enzyme,IDE)表达的影响,探讨姜黄素在AD防治中的机制。方法将3月龄的APPswe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照组[罗格列酮组,0.92mg/(kg·d)]、姜黄素大[400mg/(kg·d)]、中[200mg/(kg·d)]、小[100mg/(kg·d)]剂量组,每组10只;并以同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠作为正常对照组10只。每天灌胃给药1次,模型组和正常对照组用等体积0.5%羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)灌胃。灌胃3个月后,应用Morris水迷宫、免疫组织化学等方法,检测动物的学习记忆能力、海马Aβ生成酶PS2和降解酶IDE表达变化。结果行为学检测,模型组小鼠的游泳轨迹多为边缘型,而正常对照组、阳性对照组、姜黄素各组小鼠的游泳轨迹多为趋向型和直线型。Aβ生成酶PS2和降解酶IDE的免疫组织化学染色结果,模型组小鼠海马CA1区PS2阳性细胞较正常对照组明显增加(P<0.01),与模型组相比,姜黄素各组小鼠海马CA1区PS2阳性细胞减少(P<0.01)。模型组小鼠海马CA1区PS2阳性细胞平均灰度值较正常对照组降低(P<0.05),姜黄素小剂量组阳性细胞平均灰度值同模型组相比明显增加(P<0.01)。模型组小鼠海马CA1区IDE阳性细胞较正常对照组明显减少(P<0.01),与模型组相比,姜黄素中剂量组小鼠海马CA1区IDE阳性细胞明显增加(P<0.05)。模型组小鼠海马CA1区IDE阳性细胞平均灰度值较正常对照组明显增加(P<0.01),姜黄素各组小鼠海马CA1区IDE阳性细胞平均灰度值同模型组相比均明显降低(P<0.01)。结论姜黄素能通过减少Aβ生成酶和增加Aβ降解酶的表达,降低Aβ蛋白的表达进而改善APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的学习记忆能力。

App17肽对Tau蛋白超磷酸化表达的影响

目的 通过对 Tau蛋白磷酸化在脑内分布的观察 ,研究 App17肽对糖尿病小鼠脑神经元 Tau蛋白磷酸化的影响。 方法 用链脲佐菌素 (streptozotion,STZ)诱发小鼠糖尿病模型 ,并皮下注射 App17肽对糖尿病小鼠进行治疗 ,4周后取脑组织做 AT- 8、Tau- 1、蛋白磷酸酯酶 (PP- 2 B)脱磷酸后的 Tau- 1免疫组织化学染色。 结果 糖尿病小鼠脑内 AT- 8阳性反应神经元广泛分布于压后颗粒皮层、海马、丘脑、下丘脑等部位 ,胞浆深染 ,而正常小鼠及 App17肽保护的糖尿病小鼠脑内阳性反应细胞仅在海马和压后颗粒皮层表达 ,阳性细胞数目少 ,染色淡 ;用Tau- 1单染正常小鼠脑及 App17肽治疗的糖尿病小鼠脑的压后颗粒皮层及海马阳性反应神经元数目多 ,糖尿病小鼠只有用 PP- 2 B脱磷酸后阳性反应神经元数目及染色程度才与正常组接近。 结论 糖尿病小鼠脑内 Tau蛋白磷酸化广泛表达 ,App17肽可改善糖尿病小鼠脑内 Tau蛋白磷酸化 ,从而改善学习与记忆。

APP17肽对AT-8在糖尿病小鼠脑内分布的影响

为了观察 APP17肽对糖尿病小鼠 Tau蛋白 Ser2 0 2 / Thr2 0 5磷酸化的影响 ,用链脲佐菌素 (选择性地破坏胰岛β-细胞 ,导致糖尿病 )诱发小鼠糖尿病模型 ,并皮下注射 APP17肽 ( β-淀粉样肽前体蛋白 3 19～ 3 3 5 )给予治疗。 4周后取脑组织进行 AT-8(抗 Ser2 0 2 / Thr2 0 5特异单抗 )免疫组化反应。结果证明 :糖尿病组 AT-8阳性反应细胞广泛分布于压后颗粒皮层、海马、丘脑、下丘脑等部位 ,而正常对照组及 APP17肽治疗组仅在压后颗粒皮层、海马可见阳性反应细胞 ,且着色淡。本研究提示 ,糖尿病脑内多个区域的神经元存在较多的 AT-8阳性细胞 ,而 APP17肽可使 AT-8阳性反应细胞出现的部位和数量正常化。

APP17肽对D-半乳糖脑老化小鼠海马凋亡相关基因表达的影响

目的 研究APP17肽对D 半乳糖脑病小鼠海马神经元凋亡的影响。 方法 用D 半乳糖制备脑老化模型 ,皮下注射APP17肽治疗D 半乳糖脑老化小鼠 ,3个月后取脑组织做Bcl 2、Bax、CREB、AKt、AIF免疫组织化学染色。 结果 D 半乳糖脑病小鼠海马内Bax、AIF阳性反应神经元胞浆与突起深染 ,而正常小鼠及APP17肽保护的D 半乳糖小鼠海马阳性细胞数目少 ,染色淡 ;D 半乳糖小鼠海马内Bcl 2、CREB、AKt阳性细胞数目少 ,染色淡 ;而正常小鼠及APP17肽保护的D 半乳糖小鼠海马阳性反应神经元胞浆与突起深染。 结论 促进凋亡的Bax、AIF在D 半乳糖小鼠海马表达增加 ;抑制凋亡的Bcl 2、CREB、AKt在D 半乳糖小鼠海马表达降低。APP17肽能影响D 半乳糖脑病小鼠脑内Bcl 2、Bax、CREB、AKt、AIF的表达 。

APP17肽对D-半乳糖脑老化小鼠海马神经元凋亡的影响(英文)

目的研究APP17肽对D-半乳糖脑病小鼠海马神经元凋亡的影响,为进一步探讨APP17肽对脑老化的临床治疗意义提供理论依据。方法雄性昆明小鼠66只,按随机数字表法分为3组:正常对照组(C组)、D-半乳糖对照组(D组)、APP17肽治疗组(P组),每组动物22只。用D-半乳糖制备脑老化模型,并皮下注射APP17肽对D-半乳糖脑老化小鼠进行治疗,3个月后取脑组织做Bcl-2,Bax,CREB,Akt,AIF免疫组织化学染色。结果D-半乳糖脑病小鼠海马内Bax,AIF阳性反应神经元细胞数目多,细胞计数与C组及P组有显著性差异;胞质与突起深染,而正常小鼠及APP17肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性细胞数目少,染色淡;D-半乳糖小鼠海马内Bcl-2,CREB(cAMP反应结合蛋白),AKt阳性细胞数目少,染色淡,细胞计数与C组及P组有显著性差异;而正常小鼠及APP17肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性反应神经元细胞数目多,胞质与突起深染。结论促进凋亡的Bax,AIF(凋亡诱导因子)在D-半乳糖小鼠海马表达增加;与凋亡呈负相关的Bcl-2,CREB,Akt在D-半乳糖小鼠海马表达降低APP17肽能影响D-半乳糖脑病小鼠脑内Bcl-2,Bax,CREB,Akt,AIF的表达,使之接近正常。

胰岛素样生长因子-1受体在糖尿病小鼠脑内的分布(英文)

目的:观察糖尿病小鼠脑内胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的分布及APP17肽对其分布的影响,为多肽对糖尿病脑病和AD的治疗提供理论依据。方法:雄性昆明小鼠体质量28～32g,鼠龄8周,共18只。随机分为3组,正常对照组(C组)、糖尿病对照组(DM组)和APP17肽治疗组(APP17peptide+DM组)。用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型,并皮下注射APP17肽(β-淀粉样肽前体蛋白319～335)给予治疗。4周后取脑组织进行IGF-1R免疫组化染色。结果:糖尿病组IGF-1R阳性反应细胞广泛分布于皮质、海马、丘脑、下丘脑等部位,而正常对照组及APP17肽治疗组仅在皮质、海马可见阳性反应细胞,DM组与C组、APP17peptide+DM组海马阳性反应细胞数分别为(22.3±1.7),(14.5±1.4),(15.2±1.1)个/10倍物镜。后两组与DM组比较差异有显著性意义(F=0.1,0.2,P<0.001)。C组与DM+APP17peptide组小鼠海马IGF-1R免疫组化红、绿、蓝像素值分别为86±8,101±6,130±5(F=3.3,0.6,0.5,P<0.01)和84±6,102±6,132±6(F=1.2,6.0,7.0,P<0.01),且着色淡。结论:糖尿病小鼠脑内多个区域存在较多的IGF-1R阳性神经元,而APP17肽能使IGF-1R阳性反应细胞出现的部位和数量正常化。

APP17肽对IRS-1在糖尿病小鼠脑内分布的影响

为了观察 APP17肽对糖尿病小鼠胰岛素受体底物 -1( IRS-1)的影响 ,本研究用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型 ,并皮下注射 APP17肽 ( β-淀粉样肽前体蛋白 3 19～ 3 3 5 )给予治疗 ,4周后取脑组织进行 IRS-1免疫组化染色。结果显示 ,糖尿病组IRS-1阳性反应细胞广泛分布于皮层、海马、丘脑、下丘脑等部位 ,而正常对照组及 APP17肽治疗组仅在皮层、海马见有阳性反应细胞 ,且着色淡。以上结果表明 :糖尿病小鼠脑内多个区域的神经元存在较多的 IRS-1阳性细胞 ,APP17肽能使 IRS-1阳性反应细胞出现的部位和数量正常化 。

APP17肽改善糖尿病小鼠脑组织Tau蛋白过度磷酸化(英文)

背景:Tau蛋白的过度磷酸化是痴呆的一个因素,国外学者研究发现APP17肽对其可能产生影响。目的:观察注射APP17肽后糖尿病小鼠Tau蛋白Ser202/Thr205磷酸化的变化。设计:随机对照实验。单位:首都医科大学病理学教研室,首都医科大学宣武医院脑老化研究室。材料:实验在首都医科大学病理学教研室、北京市宣武医院脑老化研究室完成。选用8周龄雄性昆明小鼠18只,体质量28～32g,随机分为3组:对照组,糖尿病组,APP17肽治疗组,每组6只小鼠。方法:用链脲佐菌素选择性地破坏胰岛β-细胞,诱发小鼠糖尿病模型,并皮下注射APP17肽给予治疗。4周后取脑组织进行AT-8(抗Ser202/Thr205特异单抗)免疫组化染色。主要观察指标:①形态学观察。②AT-8分布。③免疫组化染色定量分析。结果:糖尿病组AT-8阳性反应细胞广泛分布于压后颗粒皮层、海马、丘脑、下丘脑等部位,而对照组及APP17肽治疗组仅在压后颗粒皮层、海马可见阳性反应细胞,且着色淡。结论:糖尿病脑内多个区域的神经元可能存在较多的AT-8阳性细胞,而APP17肽可能使AT-8阳性反应细胞出现的部位和数量正常化。

谷氨酸单钠对大鼠垂体生长激素细胞发育的影响

给出生１０ｄ内的雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下注射谷氨酸单钠（ＭＳＧ），观察其新生期（１１日龄）、青春期（５２日龄）、成年期（１００日龄）的垂体生长激素（ＧＨ）细胞。结果：各期ＧＨ细胞的大小实验组均小于对照组，且随着年龄的增长差异越加明显，新生期有显著性差异（Ｐ＜０．００５），青春期与成年期均有高度显著性差异（Ｐ＜０．００１）。各期ＧＨ细胞中的ＧＨ含量实验组均高于对照组（Ｐ＜０．００１）。提示：注射谷氨酸单钠的雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠的垂体ＧＨ细胞的发育、成熟及其产生和分泌ＧＨ的功能均受到抑制。

羊水、胎皮与脐血对创伤愈合的影响

为促进伤口以完全再生的方式无瘢痕或较少瘢痕愈合 ,在实验羊背部脊椎两侧制做伤口模型 ,用羊水、胎皮、脐血等不同成分对伤口进行治疗 ,并于治疗后 1、3、7、1 4d取材 ,分别做HE、马宋三色染色 ,7d组做电镜切片 ,观察疗效。结果 :同期内羊水组、胎皮组及脐血组比云南白药组及生理盐水组炎症清除反应及肉芽、胶原生长好 ,但未发现有明显减少瘢痕愈合的作用。结果提示 :胎羊不同组分 (羊水、胎皮、脐血 )可促进伤口愈合 ,缩短愈合时间。

APP17肽和救脑益智胶囊水提液对D-半乳糖脑老化小鼠海马PP-1表达的影响

为探讨 APP17肽及救脑益智胶囊水提液对 D-半乳糖脑老化小鼠海马蛋白磷酸酯酶 -1( PP-1)表达的影响。本研究将昆明小鼠随机分为 5组 :正常对照组、D-半乳糖对照组、APP17肽治疗组、小剂量中药治疗组、大剂量中药治疗组 ,每组动物 8只。用 D-半乳糖制备脑老化模型 ,并皮下注射 APP17肽或救脑益智胶囊水提液灌胃对 D-半乳糖脑老化小鼠进行治疗 ,3个月后取脑组织做 PP-1免疫组织化学染色。结果显示 :D-半乳糖小鼠和大剂量救脑益智胶囊水提液治疗组小鼠海马 PP-1阳性细胞数目少 ,染色淡 ;而正常小鼠、APP17肽保护和救脑益智胶囊水提液小剂量治疗的 D-半乳糖小鼠海马阳性反应神经元数目多 ,胞浆与突起深染。结果提示 :抑制凋亡的 PP-1在 D-半乳糖小鼠海马表达降低。 APP17肽和小剂量救脑益智胶囊水提液治疗能影响 D-半乳糖脑病小鼠脑内 PP-1的表达 ,使之接近正常。

甘丙素、甘丙素受体与老年痴呆的关系

神经肽甘丙素存在于哺乳动物前脑基底部及其投射区。中枢性甘丙素抑制海马乙酰胆碱的释放,使学习、记忆下降。老年痴呆患者甘丙素在基底神经元内的近轴突终末中过度表达,选择性甘丙素受体拮抗剂具有增强胆碱能神经的功能。

结蛋白抗体制备及其在肌源性组织肿瘤诊断中的应用

用自制的高效价兔抗鸡结蛋白(Desmin)抗血清,对26例横纹肌肉瘤(RMS),7例平滑肌肉瘤(LMS),11例其他肿瘤及多种正常组织进行免疫过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)染色。结果表明:Desmin是肌源性组织及其肿瘤特有标志。26例RMS中25例阳性,7例LMS中5例阳性,其他肿瘤及除肌源性组织外的正常组织均阴性。该抗血清对病理诊断肌源性组织肿瘤有一定价值。

结蛋白提纯及抗血清制备

结蛋白是肌源性组织中起源较早的被称为中间丝的结构抗原。近来研究发现,实性肿瘤细胞中不产生新的中间丝,因此可用于低分化肌源性肿瘤的诊断。但是目前在临床上难以广泛推广,其主要原因是难以获得抗血清。我们通过提纯鸡沙囊平滑肌 Desmin,免疫新西兰大白兔获取较纯的 Desmin 多克隆抗血清,探索提纯。

轻度认知损害临床研究指导原则(草案)

轻度认知损害(mild cognitive impairment,MCI)是指一个有轻度认知缺损但没有痴呆的疾病分类单元,是痴呆发病的预警信号和新的治疗靶点。欧洲MCI诊断标准及其诊断程序更加符合MCI综合征的异质性特征,基于此,首都医学发展基金MCI联合攻关组提出MCI的诊断方法,包括临床、神经心理、机能、神经影像和遗传检测,诊断程序分为三步。第一,确定MCI综合征,必须符合下列条件:(1)来自患者和(或)家庭成员的认知主诉;(2)患者和(或)知情者报告在过去一年内相对于先前的认知功能有所下降;(3)认知障碍由临床评估证实,在记忆和(或)其他认知领域出现损害;(4)日常生活活动保存,复杂的工具性机能未受损或有非常轻微的损害;(5)无痴呆。第二,辨认MCI亚型,即记忆型MCI、单个非记忆区域MCI以及多个区域MCI。第三,尽可能明确亚型的发病原因,潜在原因有阿尔茨海默病、血管性痴呆和其他神经变性痴呆,如额颞叶痴呆、路易体痴呆、语义型痴呆以及创伤、感染、中毒、营养或内分泌缺乏等。推荐的特异性检查包括血清维生素B12、叶酸,血浆胰岛素、胰岛素降解酶、Aβ40、Aβ42、类性因子,CT(最好是MRI)是强制性的神经影像学检查。其疗效观测指标有(1)主要结果:痴呆或AD转化的可能性;(2)次级结果:认知和机能;(3)补充结果:中医证候;(4)APOEε4携带者:携带状态对痴呆进展率或AD转化率的影响,并比较治疗效果。

《轻度认知损害临床研究指导原则(草案)》编制说明

本文评述了近几年来有关轻度认知损害(mild cognitive impairment,MCI)的诊断、分型、纳入标准和排除标准、评价量表、疗效性指标设计以及证候诊断量表等方面的研究文献,为首都医学发展基金(Capital Foundation of Medical Developments,CFMD)MCI联合攻关组编制的《轻度认知损害临床研究指导原则(草案)》提供证据支持。文章指出欧洲MCI诊断标准及其诊断程序更加符合MCI综合征的异质性特征。MCI患者诊断标准有赖于各种分级筛选量表得分,临床痴呆分级量表(Clinical Dementia Rating,CDR)、整体衰退量表(Global Deterioration Scale,GDS)、AD评价量表-认知(Alzheimer's Disease Assessment Scale-cognitive subscale,ADAS-cog)和工具性日常生活活动(Instrumental Activities of Daily Living,IADL)在确定MCI患者中非常有用,但不能代替MCI诊断标准。强调MCI患者的认知损害对日常生活没有较大影响,但在复杂的日常生活活动方面,患者可能会有非常轻微的损害。经过作者前期临床研究验证,在MCI病例筛选中值得推崇的神经心理学量表主要是简易精神状态检查(Mini-Mental State Examination,MMSE)、延迟故事回忆(Delayed Story Recall,DSR)、画钟测验(Clock DrawTest,CDT)和言语分类流畅性测验(Verbal Category Fluency Test,VCFT)等。生物学检测和海马体积或内侧颞叶体积缩小等对MCI诊断的贡献也给予了简要说明。

柴胡疏肝散对肝郁证模型大鼠脑海马磷酸二酯酶-4及其亚型表达的影响

目的:研究柴胡疏肝散对肝郁证模型大鼠脑海马磷酸二酯酶-4及其亚型表达的影响。方法:将大鼠分为空白对照组、肝郁模型组、柴胡疏肝散组,运用模具束缚结合孤养的方法制备肝气郁结证候动物模型,采用qRT-PCR法检测大鼠脑海马PDE4A、PDE4B及PDE4D表达的影响。结果:模型组大鼠脑海马PDE4A、PDE4B及PDE4D的mRNA表达较正常组降低(P<0.05),柴胡疏肝散组大鼠脑海马PDE4A、PDE4B及PDE4D的mRNA表达较模型组升高(P<0.05)。结论:柴胡疏肝散抗肝郁作用的机制可能与通过上调肝郁大鼠脑海马PDE4及其亚型的mRNA表达而起到保护受损神经元,改善大脑功能,缓解肝郁症状的作用。

金思维对东莨菪碱致记忆障碍小鼠脑胆碱能系统的影响

目的通过建立东莨菪碱记忆障碍模型,采用中药复方金思维进行干预,观察金思维对东莨菪碱致记忆障碍模型小鼠行为学和胆碱能系统的影响,探讨该药的神经保护作用机制。方法将ICR小鼠随机分为正常对照组;模型组,溶媒0.5%CMC;阳性对照组,多奈哌齐,0.92 mg/(kg·d);金思维大、中、小剂量组,20、10、5 mg/(kg·d)。每组18只,按0.1 mL/10 g小鼠体重连续灌胃给药30 d。末次给药后造模,对照组腹腔注射生理盐水,其余各组腹腔注射东莨菪碱3 mg/(kg·d),溶于0.9%生理盐水,按0.1 mL/10 g小鼠体重注射,进行Morris水迷宫实验。实验结束后取皮层和海马组织,分别测定皮层和海马中乙酰胆碱(Ach)含量、乙酰胆碱酯酶(Ach E)及胆碱乙酰转移酶(Ch AT)活性。结果金思维可使模型小鼠游泳距离和游泳时间缩短及目标象限停留时间增长;金思维可使模型组小鼠脑内Ach含量升高、Ach E活性下降和Ch AT活性升高。结论金思维可以改善东莨菪碱导致的记忆障碍模型小鼠学习记忆能力,其机制可能与胆碱能能系统有关。