结核分枝杆菌H37Rv色氨酸合成酶α亚基编码基因的克隆、表达及酶学性质分析

目的克隆表达色氨酸合成酶α亚基编码基因并对其进行功能分析。方法以结核分枝杆菌(简称结核杆菌)H37Rv基因组为模板,扩增trpA基因,构建pET30a-trpA重组质粒;转化重组质粒到大肠埃希菌DH5α并在BL21(DE3)诱导表达,纯化可溶性的结核杆菌重组色氨酸合成酶α亚基(His-rMtTrpA)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和质谱分析测定相对分子质量(Mr)后,用圆二色光谱(CD)分析和同源模建方法检测二级和三级结构。研究不同浓度His-rMtTrpA对β亚基酶活反应的影响。结果成功克隆了813bp的目的基因trpA,并获得了高纯度的His-rMtTrpA蛋白。重组蛋白Mr为33.151×103(含载体蛋白)。25℃时His-rMtTrpA的二级结构包括31.8%α螺旋、31.8%β折叠、8.4%β转角和27.9%无规则卷曲,它的三维模型显示为(β/α)8桶状结构。酶学性质研究表明,在His-rMtTrpA与MtTrpB的摩尔比为2.2时,色氨酸合成酶α亚基可以最大限度促进β亚基酶活反应。结论成功得到高纯度的重组目的蛋白His-rMtTrpA,其功能分析为针对色氨酸合成酶的药物筛选设计提供理论基础。

具有抑菌活性植物乳杆菌细菌素生物稳定性研究

为了测定具有抑菌活性植物乳杆菌产细菌素的稳定性,利用乙酸乙酯萃取得到细菌素粗提液,采用牛津杯法测定植物乳杆菌细菌素在温度、pH、酶及紫外线4种不同因素的处理下对大肠杆菌的抑菌效果。结果表明:排除酸和过氧化氢的干扰后,植物乳杆菌细菌素仍具有抑菌性。植物乳杆菌细菌素在121℃高温处理30 min后仍存有81%的抑菌活性;在pH 3.0~8.0内均有良好的抑菌效果,在pH为8时仍保存69%的抑菌活性;在经由胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶及蛋白酶K的处理后,抑菌活性分别保留84%、98%、67%、91%、88%和98%;在经过紫外照射2 h后,该细菌素依然保留83%的抑菌效果。说明植物乳杆菌细菌素抑菌性较稳定,食品防腐剂可作为开发和利用。

荧光定量PCR法检测发酵果汁中嗜酸乳杆菌

发酵饮品中目标菌种的定量检测对其质量与安全有着重要的意义。为了将发酵果汁中的嗜酸乳杆菌准确定量,采用现阶段食品微生物检测中广泛运用的分子学方法——荧光定量PCR法进行测定。根据嗜酸乳杆菌基因保守区域的序列设计其特异性引物和探针,以基因组纯化试剂盒提取纯化目标菌株的DNA为模板,利用荧光定量PCR方法先对模拟样品实施检测并制作出标准曲线,得到的相关系数为0.992,线性关系良好,可依此进行未知样品检测。最终检测出未知样品即发酵果汁中嗜酸乳杆菌的含量为2.27×10^(8) CFU/mL,并与平板计数结果基本一致。由此表明,荧光定量PCR法可快速准确地对发酵果汁中嗜酸乳杆菌实现定量检测。

观果盆景

观果盆景，习惯指盆景中的树木桶开花、结果，果实的形态，色彩具有较高观赏价值，且结的果实由小到大，及其色彩由青转黄、橙或红色的变化过程，使盆景显示了诱人的生态美，色彩美和意境美。

凝视 一座古城遥远而迷人的背影

扬州是我国国务院公布的首批24座历史文化之一。她是一座具有深厚历史文化积淀的古城，自春秋吴王夫差开邗沟、筑邗城，至今已有将近2500年历史。2500年间，扬州历经风雨，几度兴衰，几度辉煌。西汉为扬州历史上的第一次发展高峰。

借鉴画意是创作盆景的捷径

盆景和中国山水画都是具体而形象地反映某些自然景观的艺术，它们之间有许多共同之处，盆景艺术长期以来深受中国山水画及其画论的影响。譬如，山水画中有“高远、深远、平远”的画法，盆景中也有“三远”的做法。

色彩在盆景中的作用

盆景之美，与很多因素有关，其中色彩的作用不可忽视。 色彩是构成盆景美的重要因素制作盆景离不开植物、山石等造景材料，这些自然物具有天赋的美丽色彩。以山石为例，宣石的洁白、英德石的灰青、芦管石的土黄、锰石的红褐以及石头自身色彩的深浅变化和不同色彩的斑斓夹杂，可谓丰富多彩。再看植物的色彩，叶有绿、黄、红、紫；花果五彩缤纷；

山石的天然色彩在山水盆景中的运用

山水盆景是以山石为主要素材，在浅水盆中布置出峰峦起伏的崇山峻岭 或烟波浩渺的湖光山色，小中见大，咫尺午里，观赏山水盆景，恍如置身自然山水之中，神游其间，心旷神怡。

微型盆景陈设欣赏

微型盆景是盆景中体量最小的一种，它以小巧玲珑博得人们的喜爱。不过，景物虽小，一木一石依然师法造化。娇小一株树，曲干虬枝，形神兼备；方寸山水景，峰峦毕现，丘壑分明。反玩微型盆影，足以让人即小观大，游目骋怀。

观花盆景

在树木盆景这个大家庭中，人们常根据不同树种最能显示美感的某些侧重方面、将盆景划分为观叶、观花、观果类盆景。

结核分枝杆菌H37Rv高丝氨酸激酶基因的克隆、表达及酶学性质分析

采用PCR方法克隆到结核分枝杆菌H37Rv的高丝氨酸激酶基因thrB,将其连接到pET-28a(+)表达载体中,在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中经丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导得到高效表达.用Ni.NTA His.Bind亲和层析柱对表达的活性重组蛋白进行了分离纯化,并对其酶学性质进行了研究.结果表明:重组结核分枝杆菌高丝氨酸激酶能以L-高丝氨酸和ATP为底物催化L-高丝氨酸生成O-磷酰-L-高丝氨酸,该酶的比活力为2.946 U/mg,对底物L-高丝氨酸和ATP的米氏常数分别为2.303 1 mmol/L和2.342 9 mmol/L.

结核分枝杆菌H37Rv组氨醇脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质分析

以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,扩增hisD基因,构建pET-28a-HDH重组质粒;转化重组质粒到E.coli BL21(DE3)并诱导表达,纯化可溶性的结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶(HDH),并对其性质进行研究,结果表明:重组结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶能以L-组氨醇和NAD+为底物催化L-组氨醇生成L-组氨酸;该酶的最适pH值为8.3,最适温度为45℃,比活力为1.788 U/mg;Mn2+,Ca2+,Zn2+,Co2+等对酶促反应有激活作用;底物NAD+和L-组氨醇的米氏常数分别为0.9765 mmol/L和2.755μmol/L;25℃时重组蛋白的二级结构中有20.5%的α-螺旋,40.9%β-折叠,4.2%β-转角,34.3%无规卷曲.

类芽孢杆菌CH2的筛选、酶活性及全基因组分析

红树林土壤微生物种类丰富,是筛选纤维素降解菌的可靠来源。为了有效利用农作物秸秆资源,本研究从红树林土壤中筛选出一株具有纤维素降解能力的类芽孢杆菌CH2,研究不同培养时间、NaCl浓度、pH值和温度下羧甲基纤维素酶(CMC)和滤纸分解酶(FPA)活性,测试其对水稻和玉米秸秆的降解能力,并对CH2进行基因组测序和分析。结果表明:随着培养时间、NaCl浓度、pH值和温度的提高,CMC和FPA活性均呈先上升后下降的趋势。培养时间72~84 h、NaCl浓度6.0 g·L^(-1)、pH 7及36℃条件下,CMC和FPA活性均最高。对水稻和玉米秸秆的降解试验显示,CH2可有效降解水稻和玉米秸秆,在0 g·L^(-1) NaCl(对照)条件下,10 d降解率分别为30.4%和47.0%,且在15 g·L^(-1) NaCl条件下,降解率与对照组无显著差异,表明菌株CH2具有良好的耐盐性。基因组测序显示,CH2基因组为6797325 bp,包含6312个编码基因。基因组注释结果显示,CH2含有多个纤维素和半纤维素降解酶基因,这些酶主要隶属于GH家族,包括内切-1,4-β-木聚糖酶、木聚糖1, 4-β-木糖苷酶、β-葡萄糖苷酶和内切葡聚糖酶。该菌具有应用于农作物秸秆降解的潜力。

盆景树种介绍系列之一 黄杨

黄杨别名瓜子黄杨、小叶黄杨、豆瓣黄杨。黄杨科，黄杨属。常绿灌木或小乔木。叶表面深绿色，背面黄绿色。花簇生叶腋或枝端，花小，黄绿色，无花瓣。果实近球形，有三个鼎是状小突起。花期4月，果期7月。

雀梅

别名：酸味、雀梅藤。鼠李科，雀梅藤属。常绿或半常绿藤蔓灌木。树皮紫褐色，呈片状斑剥脱落。小枝细长蔓生，常具刺状短枝。叶卵形或椭圆形，质薄，边缘有细锯齿。