实验动物血清胶冻样成因分析及消除方法探索

动物血清是常用的实验材料,血清质量往往决定实验数据的准确性和科学性。动物血清制备常出现一些异常情况,如血清析出,但呈胶冻样血清。胶冻样血清对血清学检测过程和数据造成很大影响,严重干扰实验结果。减少血清胶冻样的形成,对涉及血清学检测的实验都具有重要意义。本文基于血液凝固机制,重点分析实验动物血清胶冻样的成因,并探索消除血清胶冻样的系列方法,减少血清胶冻样的形成,对于血清学检测具有重要的意义。

离体蛙心灌流实验方法的改进及实验教学的应用

离体蛙心灌流实验是功能学科经典实验之一。文章通过选择合适的实验动物,制作了一种新型简便实用的蛙心插管,提出的改进插管方法等措施提高了离体蛙心灌流实验的成功率。目前该方法运用到实验教学中,收到良好教学效果。

构建形态、功能相结合的整合式基础医学实验教学新体系

基础医学实验教学目前多以实验教学中心为单位,分为形态学、功能学等不同实验平台或实验室,通过分析二者结合的必要性和可行性,探讨信息化管理和资源对推进这一结合的意义并提出可能的措施。

MBBS留学生项目功能学科实验教学的体会

在秉承复旦大学上海医学院对留学生的教学理念的基础上,根据医学实验的特殊性,对功能学科综合实验课程在教材选择、师资建设、教学模式、考核方式等方面进行了分析,为实现全英文留学生实验教学管理中的"趋同化"目标奠定基础。

医学功能学实验室新型肠系膜微循环观察装置

肠系膜微循环的观察和测量是家兔失血性休克实验中的重要指标,为改进以往肠系膜微循环观察装置存在的不足,设计制作了新型的观察装置。将生物显微镜固定在移动平台上,灌流盒和显微镜分离,解决了家兔、肠段和灌流盒相对不固定、显微镜镜头无法万向稳定移动这个重要的问题,而且装置具有体积小,质量轻,价格低,使用寿命长的优点。通过多年的教学实践,新型肠系膜微循环观察装置使用方便、效果优良,在实验教学中获得满意的效果。

逆向思维在医学功能学科实验教学中的应用

为了提高医学生的能力和综合素质,基础医学实验教学的改革在逐步推进,医学思维在培养医学生的过程中起到关键作用。结合复旦大学医学功能学科实验的教学实践,总结出逆向思维在医学功能学科实验教学中应用的具体实例,旨在提高学生的手术操作能力、知识综合运用能力和实验创新思维能力。合理、有效地运用逆向思维教学方法可以提高学生的综合素养,推动基础医学实验教学的发展。

管碟法测定血清青霉素浓度的影响因素分析及实验教学应用

为了不断完善医学实验课程的建设,培养学生的实验能力,设计了一套管碟法测定大鼠血清青霉素浓度的实验,分析影响实验结果的因素,建立了一种完善的血清青霉素浓度测定的方法。将其应用于教学,实验方案可行,教学效果良好,实现了混合式教学的实验课程模式。

慕课时代功能学实验教学改革探索

慕课,一种新的网络在线教学模式,正在迅猛地冲击传统的教学模式,引发了教学方法、教学理念的改革,针对慕课教学的研究也日益增多。在这种背景下,文章探讨了在医学功能学实验教学中引入慕课教学的可能性及面临的问题。为更好地促进整合式教学,发挥网络虚拟教学在功能学实验教学中的作用,提供新的思路和方法。

医学生医学人文素质现状的调查与分析

医学人文素质同医学科学素质一样,是医学生必备的基本素质。为了解当前在校医学生的医学人文素质现状,我们以复旦大学上海医学院部分在校医学生为调查对象,通过问卷调查的方式,从医学生对国内外医疗相关问题和事件的关注,对医学人文课程和提高医学人文素养的认识,以及医学人文素质对医学重要性的认识等方面,对医学生医学人文素质相关情况进行调查,了解当前在校医学生医学人文现状,为有的放矢的培养医学生的人文素养提供客观依据。

虚拟实验在功能学实验教学中的应用

虚拟实验已成为现代实验教学的重要方式,已经在物理化学计算机领域的教学中广泛应用。但在基础医学领域尤其是功能学实验教学中,虚拟实验的应用还处于起步阶段。复旦大学上海医学院和上海交通大学医学院合作开发了功能学虚拟实验软件,并探索性的应用于医学本科生的实验教学中,取得了良好的效果。

医学生人文素质需求的调查与分析

人文素质同医学知识和医疗技能一样,是医学生必备的基本素质。为了解复旦大学上海医学院医学生对人文素质教育的需求,以部分在校医学生为调查对象,就大学生基本素质以及人文素质在大学生成长中的作用等方面进行调查、分析和讨论,并提出建议和思考。

提高功能学科基础性实验教学质量探讨

当前功能学科实验教学在很多高校面临着生存空间缩减的问题,尤其是基础性实验受到了很大的冲击。相关教育研究的热点主要集中在综合性实验、创新性实验、虚拟实验和双语教学等相对新兴的内容和形式上,但是基础性实验教学的重要性不容忽视。为此,复旦大学上海医学院医学实验教学中心功能学科教学实验室对基础性实验重新审视,采取措施,提高基础性实验的教学质量,并在实际教学中产生了很好的效果,同时将继续加强基础性实验教学,深化实验教学改革,进一步提高教学质量。

PD-L1抑制小鼠脾淋巴细胞增殖药物筛选模型的建立及应用

目的通过构建重组的小鼠pcDNA3.1(+)-PD-L1质粒,并在真核细胞中进行高表达,建立PD-L1抑制小鼠脾淋巴细胞增殖药物筛选模型用于免疫调节药物的筛选。方法以RT-PCR方法扩增得到小鼠的PD-L1全长片段;以pcDNA3.1(+)真核表达质粒为载体,构建得到重组质粒pcDNA3.1(+)-PD-L1;脂质体转染到小鼠成纤维细胞(L929),通过G418筛选得到高表达PD-L1的稳定细胞株并经免疫荧光鉴定;用丝裂霉素处理过的PD-L1高表达细胞与小鼠脾淋巴细胞共培养;成功建立PD-L1抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的模型之后向其中加入不同种类、不同浓度的天然产物提取物,并设复孔。结果通过Eco RI/Xho I双酶切及测序证实构建的重组质粒pcDNA3.1(+)-PD-L1正确。RT-PCR和免疫荧光方法鉴定重组质粒在L929细胞中高效表达,应用流式细胞术成功建立PD-L1抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的模型,并筛选出阻断PD-L1活性的有效药物。结论获得了稳定高表达PD-L1的细胞,并且用于免疫调节的药物筛选,为免疫调节药物的筛选奠定了实验基础。

人PD-L1胞外区基因的克隆、原核表达及抗体制备

目的克隆人PD-L1胞外区基因并进行原核表达及相应蛋白的抗体制备,为进一步研究PD-1/PD-L1通路及针对该通路进行疾病治疗和药物筛选奠定基础。方法用PCR方法扩增编码人PD-L1胞外区的基因序列,克隆到原核表达载体pET28a(+)中并进行表达,用His抗体为一抗进行Western blotting鉴定并验证结合活性。用纯化的hPD-L1胞外区蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验(ELISA)和流式法检测抗体滴度及其特异性。结果原核表达质粒pET28a(+)-hPD-L1成功构建,并可在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导高效表达,得到的hPD-L1胞外区蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定正确。用纯化蛋白免疫日本大耳白兔,制备的多克隆抗体具有较强的免疫结合活性,抗体滴度可达105。结论鉴定和纯化了原核表达的hPD-L1蛋白,制备的相应多克隆抗体能够检测真核细胞表达的hPD-L1蛋白,为进一步研究PD-1/PD-L1生物学活性奠定了实验基础。

人sPD-1-Fc融合蛋白的构建及Cos-7细胞的表达

目的:构建重组人pSG5-Fc-hPD-1嵌合基因质粒,并在真核细胞进行表达,得到分泌性的sPD-1-Fc融合蛋白。为PD-1的生物学活性研究奠定基础。方法:从GenBank里查到人PD-1胞外区的基因序列,设计特异性引物,以人淋巴细胞cDNA为模板PCR扩增得到人PD-1胞外区片段。以pSG5-Fc真核表达质粒为载体,构建得到重组质粒pSG5-Fc-hPD-1。脂质体瞬时转染猴肾成纤维细胞(Cos-7),收取72 h的细胞上清。用Western blot鉴定,并与原核表达的人PD-L1蛋白免疫共沉淀检测生物学活性。结果:通过EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切及测序证实构建的重组质粒pSG5-Fc-hPD-1正确。重组质粒在Cos-7细胞中高效表达并分泌融合蛋白sPD-1-Fc到细胞上清,应用Western blot测定到上清中的融合蛋白,且得到的sPD-1-Fc融合蛋白具有与PD-L1结合的生物学活性。结论:通过基因重组方法在真核细胞里得到高效分泌型表达的sPD-1-Fc重组蛋白,为研究PD-1生物学活性奠定了实验基础。

电针三阴交穴对缩宫素诱导的大鼠痛经模型的影响

目的观察电针三阴交穴对缩宫素诱导的大鼠痛经模型的影响,为临床上应用针刺治疗痛经提供实验依据。方法Wister雌性大鼠随机分成3组,痛经模型组(M组,n=12),阿司匹林阳性对照组(Asp组,n=10)和电针三阴交组(EA组,n=10)。各组连续10 d皮下注射苯甲酸雌二醇0.8 mg/只,从造模第3天至第10天,M组和EA组大鼠给予1 ml/100g蒸馏水灌胃;Asp组大鼠给予200 mg/100g肠溶阿司匹林混悬液灌胃。造模第7,8,9天,EA组大鼠电针双侧三阴交40 min,以大鼠后肢轻微抖动为度;M组和Asp组大鼠以同样的方法抓取和固定40 min,但不给于电针刺激。造模第10天,即末次给药后40min,腹腔注射缩宫素复制原发性大鼠痛经模型,观察扭体反应或在体记录子宫平滑肌收缩曲线。结果与M组相比,Asp组能明显降低20min内扭体反应的次数(P<0.01),并且能显著降低扭体反应的行为学评分(P<0.05)。EA组和M相比,20min内的扭体次数以及扭体反应的行为学评分均明显降低(P<0.01)。但EA组与Asp组之间无明显区别。Asp组,EA组与M相比,子宫平滑肌收缩频率抑制百分比和子宫平滑肌张力均值提高百分比均无明显差别(P<0.05),但可以明显影响子宫平滑肌收缩幅度变化百分比(P<0.05)。结论电针不能降低催产素引起的子宫平滑肌的收缩频率,但通过降低收缩幅度,使得其收缩低于痉挛的阈值,从而缓解了子宫痉挛所引起的疼痛,减少扭体反应。

在医学伦理学课程中开展PBL教学的探讨

基于问题的学习(Problem-Based Learning,PBL)强调学生自主学习。在医学伦理学中开展PBL教学的主要内容有:提出贴近实际的案例情景、协作学习并分析从案例中提出的问题、成果汇报与评价反馈。PBL教学能够培养逻辑思维、协作能力、伦理学素养和医疗决策能力,有较强可行性和实用性。同时,医学伦理学PBL教学处于起步阶段,存在经验少、师资弱等问题。但总体来讲在医学伦理学课程中开展PBL教学具有推广前景。

老龄化对单侧肾切除术后大鼠青霉素排泄的影响

目的探究老龄大鼠单侧肾切除术后抗生素类药物排泄的规律和肾功能的变化。方法选用健康雄性Sprague-Dawley大鼠,分为青龄组(3月龄)和老龄组(18月龄),行右肾切除术。术后给两组腹腔注射青霉素,60 min后采血。管碟法检测青霉素血药浓度;试剂盒检测肌酐尿素氮水平评估肾功能;肾脏组织苏木素-伊红(HE)染色观察其病理变化。结果术后老龄大鼠对青霉素的排泄减缓;青、老龄组大鼠术后肾功能生化指标较术前无明显改变;术后10 d时青、老龄组大鼠肾脏质量均代偿性增加;术后老龄组肾小管及间质慢性炎症和纤维化强于青龄组。结论老龄大鼠在术后发生了明显的病理生理特征性改变从而导致青霉素的排泄减缓,但其肾功能无明显改变。

医学功能学科基于问题的探索型设计性实验课程构建和应用

复旦大学医学功能学科实验课程教学团队建设了“基于问题的探索型设计性实验”为核心的课程，通过分析本课程的现状与所存在的问题对该课程进行改革。以医学功能学科实验课程为试点，舍弃了“传帮带”式传统教学，针对每个实验或由临床案例引入，引导学生自主学习，掌握所需理论和技能；实验课堂则让学生结合理论深入讨论，自主提出实验目的和方案，并用科学的方法验证假设，得出结论；将PBL、翻转课堂、实验设计、统计分析等教学手段融为一体，实现了实验课程混合式教学。以期为我国高等医学院校功能学实验课程的发展提供借鉴。

PD-1/PD-L1与Treg细胞相关性的研究新进展

PD-1和PD-L属于B7家族的共刺激分子,介导免疫反应的负性调节信号。Treg细胞是一个具有免疫调节作用的T细胞亚群,在机体的免疫耐受和免疫稳定中具有重要作用。本文就PD-1/PD-L1与Treg细胞的免疫调节作用及相关性研究进展作简要综述。