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人脑中硒蛋白W与鞘脂激活蛋白原相互作用的筛选与验证
被引量:
1
1
作者
陈平
刘晴
+3 位作者
马孝杰
王诗捷
刘琼
倪嘉缵
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2014年第8期755-764,共10页
硒蛋白W(SelW)是人脑中一种重要的硒蛋白.在缺硒的条件下,SelW在脑中具有优先储备的特性,但其具体机制和在脑中的功能至今尚不清楚.本文以SelW突变体SelW′为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人胎脑文库进行筛选,获得与SelW相互...
硒蛋白W(SelW)是人脑中一种重要的硒蛋白.在缺硒的条件下,SelW在脑中具有优先储备的特性,但其具体机制和在脑中的功能至今尚不清楚.本文以SelW突变体SelW′为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人胎脑文库进行筛选,获得与SelW相互作用的蛋白,其中一种为鞘脂激活蛋白原(PSAP).采用荧光共振能量转移技术中的受体漂白和敏化发射两种方法,验证了SelW与PSAP的相互作用.构建表达载体在大肠杆菌中成功表达出SelW′,利用Pull-down技术验证了SelW′与PSAP在细胞外的直接相互作用.采用免疫共沉淀的方法验证了上述两种蛋白在昆明小鼠脑组织中的内源性相互作用.基于SelW和PSAP的已知生物功能,推测SelW可能在脑部发育和神经退行性疾病形成过程中发挥着重要作用.
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关键词
硒蛋白W
酵母双杂交
荧光共振能量转移
Pul-down技术
免疫共沉淀
鞘脂激活蛋白原
下载PDF
职称材料
题名
人脑中硒蛋白W与鞘脂激活蛋白原相互作用的筛选与验证
被引量:
1
1
作者
陈平
刘晴
马孝杰
王诗捷
刘琼
倪嘉缵
机构
深圳大学生命科学学院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2014年第8期755-764,共10页
基金
国家自然科学基金(31070731,21271131,21301120)
广东省自然科学基金(10151806001000023)资助项目~~
文摘
硒蛋白W(SelW)是人脑中一种重要的硒蛋白.在缺硒的条件下,SelW在脑中具有优先储备的特性,但其具体机制和在脑中的功能至今尚不清楚.本文以SelW突变体SelW′为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人胎脑文库进行筛选,获得与SelW相互作用的蛋白,其中一种为鞘脂激活蛋白原(PSAP).采用荧光共振能量转移技术中的受体漂白和敏化发射两种方法,验证了SelW与PSAP的相互作用.构建表达载体在大肠杆菌中成功表达出SelW′,利用Pull-down技术验证了SelW′与PSAP在细胞外的直接相互作用.采用免疫共沉淀的方法验证了上述两种蛋白在昆明小鼠脑组织中的内源性相互作用.基于SelW和PSAP的已知生物功能,推测SelW可能在脑部发育和神经退行性疾病形成过程中发挥着重要作用.
关键词
硒蛋白W
酵母双杂交
荧光共振能量转移
Pul-down技术
免疫共沉淀
鞘脂激活蛋白原
Keywords
selenoprotein W (SelW), yeast two-hybridization, fluorescence resonance energy transfer (FRET), pull-down, co-immunoprecipitation (co-IP), prosaposin (PSAP)
分类号
Q2 [生物学—细胞生物学]
Q5 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人脑中硒蛋白W与鞘脂激活蛋白原相互作用的筛选与验证
陈平
刘晴
马孝杰
王诗捷
刘琼
倪嘉缵
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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