传统民居绿色营造经验的提炼识别与转译方法研究

传统民居建筑中葆有大量契合现代绿色建筑设计需求的营造技艺.但随着城镇化进程的快速推进,传统技艺与匠人传承体系逐步衰落甚至消失,营造智慧濒临失传.同时,由于传统民居并非是基于“绿色”前提来进行营造的,其建筑单体本身是非预设绿色标准的,因此隐藏在传统民居建筑中的绿色营造技艺具有散点、碎片式的分布特征,具有难发现、难梳理、难转译、难应用的特点.为解决此问题,课题提出一种“基于非预设标准单体的微技术集群”研究方法,整合分析多源信息,挖掘提炼数百项地域特色民居绿色营造经验并进行科学化转译,基于健康舒适、安全耐久、资源节约等绿色性能视角,从多点聚合到集群分类,基于不同的技术层次与技术环节,形成相应的“微技术链群”,实现传统民居绿色营建智慧的创造性转化与创新性发展.

β-细辛醚对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑组织中差异蛋白表达的影响

目的观察β-细辛醚对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑组织中差异蛋白表达的调节作用,探讨其对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的治疗作用机制。方法实验动物分为正常对照组(C57BL/6J小鼠)、模型组(APPswe/PS1dE9小鼠)和β-细辛醚治疗组(APPswe/PS1dE9小鼠),每组10只。β-细辛醚治疗组用灌胃方法给药,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,历时90d。用Morris水迷宫行为学方法测试小鼠学习记忆能力,用免疫组织化学方法检测小鼠脑组织中β-淀粉样前体蛋白(APP)的表达。用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术对小鼠脑组织进行蛋白质组学分析,用蛋白质印迹法鉴定差异蛋白H2A、H2B的表达。结果与模型组小鼠比较,经β-细辛醚治疗后,小鼠的逃避潜伏期和第1次穿越平台时间缩短(P<0.05),平台穿越次数增多(P<0.05),APP的表达减少(P<0.05),差异蛋白组蛋白H2A1-H、H2B2-E和H2B1-F/J/L的表达水平下降(P<0.05)。结论β-细辛醚能够介入到组蛋白的修饰过程而起到治疗作用,这可能是其改善β-淀粉样肽毒性所致学习记忆能力下降的机制之一。

灯盏乙素对阿尔茨海默病小鼠脑组织β分泌酶途径相关蛋白表达的影响

目的观察灯盏乙素(Scu)对阿尔茨海默病(AD)小鼠脑组织中β淀粉样肽(Aβ)生成途径中β分泌酶途径相关蛋白的影响。方法取类AD动物模型APPswe/PS1d E9双转基因小鼠40只,分为Scu低、中、高剂量组和模型组各10只,另取C57BL/6J小鼠10只作为正常对照组。Scu低、中、高剂量组分别给予Scu 1.5、2.5、4.0 mg/(100 g·d)灌胃,正常对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,连续90 d。治疗后采用Morris水迷宫检测学习记忆能力,第1~4天进行定向航行试验,记录逃避潜伏期,第5天进行空间探索实验,记录第1次穿越原站台时间及1min内穿过原站台位置的次数。小鼠断颈处死,采集脑组织标本,Western blotting法检测β淀粉样前体蛋白(APP)、β淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)、BACE2蛋白表达,Real-time PCR法检测APP、BACE1、BACE2 mRNA表达。结果与正常对照组相比,模型组在定向航行中逃避潜伏期时间延长,第1次穿越平台时间明显延长,平台穿越次数减少(P均<0.01);与模型组比较,高剂量Scu组逃避潜伏期时间缩短,第1次穿越平台时间缩短,平台穿越次数增多(P均<0.01)。中、低剂量组与模型组比较无统计学差异(P均>0.05)。与正常对照组相比,模型组脑组织中APP和BACE1蛋白及mRNA表达升高,BACE2蛋白表达水平下降;Scu高剂量组脑组织中APP和BACE1蛋白及mRNA表达降低,BACE2蛋白表达水平升高(P均<0.05)。各组脑组织中BACE2 mRNA表达无统计学差异(P均>0.05)。结论 Scu能够调节AD小鼠Aβ生成途径中主要因子APP、BACE1蛋白和mRNA以及BACE2蛋白表达,通过干预APP代谢的β分泌酶途径来抑制Aβ生成。

灯盏乙素对痴呆模型小鼠脑组织蛋白表达谱的影响

目的:观察灯盏乙素对双侧脑室注射Aβ25-35痴呆模型小鼠脑组织中差异蛋白表达的影响,筛选出药物调控的靶蛋白和信号通路,为下一步研究灯盏乙素抗痴呆的防治机制提供实验依据。方法:将昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组和灯盏乙素组。用灌胃方法对灯盏乙素组进行给药(40 mg/kg)处理,历时90 d。用Morris水迷宫方法检测小鼠学习记忆能力;用同位素标记相对和绝对定量技术进行蛋白质组学分析。结果:灯盏乙素改善了模型小鼠下降的学习记忆能力,调控了6种靶蛋白和2条信号通路的表达。结论:实验获得了灯盏乙素改善Aβ所致的小鼠学习记忆能力损伤的重要蛋白质和通路信息。

灯盏乙素对β-淀粉样蛋白诱导的SH-SY5Y细胞中组蛋白H2A、H2B、H3表达的影响

目的:观察灯盏乙素对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中组蛋白H2A、H2B、H3表达的影响,探讨其针对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)发挥表观遗传方面治疗作用的可能性。方法:将SH-SY5Y细胞分为对照组、灯盏乙素处理组、Aβ处理组和Aβ+灯盏乙素不同剂量处理组,用CCK-8法检测细胞存活率;用流式细胞术测定各组细胞凋亡率;用蛋白质印迹法和实时定量聚合酶链法检测各组细胞H2A、H2B、H3蛋白和mRNA的表达。结果:与对照组比较,Aβ处理组细胞存活率显著降低,凋亡率显著升高,H2A、H2B、H3蛋白和mRNA表达显著升高,灯盏乙素干预可显著提高Aβ作用下细胞的存活率,显著降低H2A、H2B、H3 mRNA及蛋白表达。结论:灯盏乙素能调节Aβ毒性所致神经元中组蛋白H2A、H2B、H3的表达,可能通过改变AD表观遗传的信息异常来发挥预防和治疗作用。

灯盏乙素介入IP_3R-Ca^(2+)途径抑制β淀粉样蛋白诱导的神经细胞凋亡

目的:观察灯盏乙素(Scu)对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的细胞模型中1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP_3R)-Ca^(2+)途径的影响,探讨其在阿尔茨海默病(AD)病程中可能发挥的积极作用。方法:选用神经母细胞瘤细胞分为对照组、Scu处理组、Aβ处理组、Aβ+Scu(高、中、低)处理组及Aβ+IP_3R拮抗剂组,用CCK-8法筛选药物浓度并检测各组细胞生存率;用酶联免疫吸附法检测各组细胞中1,4,5-三磷酸肌醇(IP_3)的含量;用蛋白印迹和实时荧光定量聚合酶链反应方法检测各组细胞IP_3R和凋亡相关因子Caspase-3、Bcl-2、Bax的蛋白及mRNA的表达水平;用激光共聚焦显微镜观察各组细胞内Ca^(2+)浓度的变化;用AnnexinV/PI双染法测定各组细胞的凋亡率。结果:与对照组和Scu处理组相比,Aβ处理组细胞存活率下降,IP_3含量升高,IP_3R、Bax和Caspase-3的蛋白及mRNA表达上调,Bcl-2蛋白及mRNA的表达下调,细胞胞浆内Ca^(2+)浓度及细胞凋亡率升高;Aβ+Scu处理组细胞中各检测指标的变化与Aβ处理组的结果正好相反,IP_3R通道下游指标的变化与Aβ+IP_3R拮抗剂组基本一致。结论:Scu能够下调通路蛋白IP_3、IP_3R的表达,抑制Aβ介导的Ca^(2+)内流所致的细胞凋亡,可能通过对IP_3R-Ca^(2+)途径的调控来影响AD病程。