PBL教学法结合传统讲授法在临床微生物学及检验教学中的应用

传统教学是采用LBL（lecture based learning,LBL）的教学模式,即以授课为基础的学习[1]。这种教学方式主要是以教师为主体,以讲课为中心,采取全程灌输教学。但随着医学科学、医学信息的迅猛发展和社会医学模式的改变,社会对医学学生的素质提出了更高的要求,低效传统的医学教学模式正,

蓝莓预防大鼠肝损伤实验研究

目的探讨蓝莓对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的预防保护作用。方法SD大鼠随机分为蓝莓汁低、高两个剂量预防组、齐墩果酸阳性药对照组、正常对照组及模型组,采用CCl4致大鼠急性肝损伤模型。测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)以及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA),光镜下观察肝脏病理变化。结果蓝莓各剂量组及阳性对照组血清ALT及AST均明显低于模型组(P<0.01)。与模型组比较,齐墩果酸组、蓝莓汁高剂量组肝匀浆GSH、SOD、CAT明显升高,MDA明显降低(P<0.01或P<0.05);蓝莓汁低剂量组肝匀浆GSH升高不明显,肝匀浆SOD、CAT升高,MDA降低(P<0.05)。结论蓝莓对CCl4所致大鼠急性肝损伤具有良好的预防保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化作用有关。

类风湿性关节炎与转化生长因子β1基因多态性

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因第一外显子+869T/C多态性与贵州省汉族人群类风湿性关节炎(RA)的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析105例类风湿性关节炎患者及110例正常对照组的TGF-β1基因第一外显子+869T/C多态性。结果病例组与正常对照组+869T/C基因型频率分布的差异有统计学意义(P<0.05),+869 TT基因型RA组高于对照组(34.3%,27%),而+869 CC基因型明显低于正常对照组(16.2%,31%);病例组+869T/C位点的等位基因频率与正常对照组比较差异也有统计学意义(P<0.05),病例组T等位基因频率显著高于对照组(59%,48.2%),C等位基因频率低于对照组(41%,51.8%)。结论TGF-β1基因第一外显子+869T/C多态性与贵州省汉族人群类风湿性关节炎(RA)显著相关,T等位基因可能是类风湿性关节炎的易感基因。

蓝莓对急性肝损伤大鼠抗氧化能力的影响

目的探讨蓝莓对四氯化碳(CCl4)所致急性肝损伤大鼠肝组织核转录相关因子2(Nrf2)和Ⅰ型血红素氧化酶(HO-1)mRNA表达的影响。方法 SD大鼠48只随机分为正常对照组10只、蓝莓汁低、高剂量各组10只(1g/100g、2g/100g)、齐墩果酸(7.5mg/100g)组及模型组各9只,用CCl4致大鼠急性肝损伤模型。采用TRIzol提取肝组织总RNA,实时荧光定量PCR技术测定大鼠肝组织Nrf2及HO-1 mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组肝组织Nrf2、HO-1 mRNA表达有所增加,差异无统计学意义。与模型组比较,蓝莓汁低、高剂量组及齐墩果酸组肝组织Nrf2、HO-1 mRNA表达明显增高,P<0.05。结论蓝莓可激活大鼠肝脏Nrf2增加HO-1的表达,提高机体的抗氧化应激能力,这可能是蓝莓预防CCl所致大鼠急性肝损伤的机制之一。

贵州汉族TGF-β_1基因多态性与系统性红斑狼疮相关性的研究

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析80例SLE患者及95例正常对照组的TGF-β1基因启动子-509C/T多态性。结果:SLE组与正常对照组-507C/T基因型频率分布有差异(P<0.05),-509CC基因型SLE组高于对照组(35% vs 21.1%),而-509TT型SLE组明显低于正常对照组(18.75% vs 36.8%);SLE患者组-509位点的等位基因频率与正常对照组比较差异也有显著性(P<0.005),SLE组C等位基因频率显著高于对照组(58.1% vs 42.1%),T等位基因频率低于对照组(41.9% vs 57.9%)。结论:贵州汉族人群TGF-β1基因启动子-509C/T多态性与SLE显著相关。

结核分枝杆菌稳定L型致病性的研究

目的探讨结核分枝杆菌稳定L型的致病性.方法将不同浓度结核分枝杆菌稳定L型纯培养物经腹部皮下注射感染豚鼠,观察动物局部皮肤反应、腹股沟淋巴结肿大情况、结核菌素试验、病理变化、病变组织涂片染色及分离培养.结果剂量为2×104个/ml的结核分枝杆菌稳定L型注射后15d发生腹股沟淋巴结肿大,但局部皮肤未见红肿.2×106个/ml在12d后可见腹股沟淋巴结肿大,局部皮肤也未见红肿.病变组织病理切片是非特异性改变,切片抗酸染色未见抗酸菌但可见抗酸阴性的圆球体,分离培养未能够检出结核分枝杆菌L型或细菌型.结论结核分枝杆菌稳定L型仍然具有致病性,但毒力显著减弱,大剂量时能够引起动物局部组织发生非特异性的炎性病变.

Nrf2-Keap1抗氧化系统与肝脏疾病

核转录相关因子(NF-E2-related factor 2,Nrf2)是重要的转录因子,在氧化应激等情况下被激活与Kelch样ECH联合蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)解离进入胞质启动Ⅱ相解毒酶及抗氧化酶基因的表达,增加细胞对氧化应激和亲电子化学物质的抗性.活性氧族和氧化应激在肝脏疾病的发病中取着重要的作用.本文对Nrf2-Keap1抗氧化系统与肝脏疾病的关系进行探讨.

TGF-β1-509C/T基因多态性与类风湿性关节炎相关性研究

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群类风湿性关节炎(RA)的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析90例RA患者及95例正常对照组的TGF-β1基因启动子-509C/T多态性。结果RA组与正常对照组-509C/T基因型频率分布有显著差异(P<0.05),-509CC基因型RA组高于对照组(33.3%vs21.1%),而-509TT型明显低于正常对照组(21.1%vs36.8%);RA患者组-509位点的等位基因频率与正常对照组也有显著差异(P<0.01),RA组C等位基因频率显著高于对照组(56.1%vs42.1%),T等位基因频率低于对照组(43.9%vs57.9%)。结论TGF-β1基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群类风湿性关节炎显著相关。

聚合酶链反应检测稳定L型结核分枝杆菌

目的探讨聚合酶链反应(PCR)在结核分枝杆菌稳定L型检测的应用价值.方法采用结核分枝杆菌染色体基因重复保守序列为引物的PCR诊断试剂检测非高渗培养的结核分枝杆菌稳定L型纯培养物的染色体DNA.结果结核分枝杆菌稳定L型的染色体DNA经PCR扩增后电泳可见2条DNA带,其中1条主带与其亲代细菌型一致,另1条为相对分子质量较小的次带.结论结核分枝杆菌稳定L型仍保留了与细菌型染色体PCR引物反应的特异性序列和出现1条相对小分子质量的带,但仍然可用结核分枝杆菌PCR对其进行特异性检测与鉴定.

结核分支杆菌稳定L型染色体DNA的限制性酶切分析

目的探讨结核分支杆茵稳定L型变异的分子机制。方法对结核分支杆茵稳定L型纯培养物的染色体DNA的特异性PCR扩增片段进行HaeⅢ限制性内切酶分析。结果结核分支杆茵稳定L型的染色体DNA具有与其亲代细菌型一致的主要酶切片段,但也显示出不同于其亲代细茵型DNA的酶切片段。结论结核分支杆茵稳定L型可保留与其亲代细茵型一致的特异性染色体基因,但也发生了染色体基因的改变。

结核分枝杆菌稳定L型变异的聚合酶链反应研究

目的 :探讨结核分枝杆菌稳定L型变异的分子机制。方法 :采用结核分枝杆菌聚合酶链反应 (PCR)诊断试剂扩增结核分枝杆菌稳定L型纯培养物的染色体DNA ,琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyscry lamidgelelectrophoresis ,PAGE)及薄层凝胶扫描分析。结果 :结核分枝杆菌稳定L型比细菌型多一DNA条带。结论 :结核分枝杆菌稳定L型的形成可能与基因突变有关 ,在特异性PCR反应中可形成与其亲代细菌型有差异的产物。

结核分枝杆菌稳定L型染色体DNA的PCR-SSCP分析

目的探讨结核分枝杆菌稳定L型变异的核酸分子基础。方法对结核分枝杆菌稳定L型纯培养物的染色体DNA特异性聚合酶链反应(PCR)扩增产物进行产物单链构象多态性分析。结果产物单链构象多态性分析显示稳定L型的染色体DNA保留了与其亲代细菌型一致的主要带型,但也显示出少数不同于其亲代细菌型的DNA条带。结论结核分枝杆菌稳定L型可保留与其亲代细菌型一致的特异性染色体基因,但也发生了染色体基因的点突变。

医学检验专业开展“综合性、设计性、应用性”实验的初探

在医学检验专业的教学中,实验教学是其重要的组成部分。"综合性、设计性、应用性"的实验调动了学生学习的积极性和主动性,使学生成为实验教学的主体。不仅巩固和强化学生的实践动手能力,也培养学生综合分析问题、解决问题的能力。

蓝莓对大鼠肝纤维化TGF-β_1/Smads信号通路的影响

目的观察蓝莓对大鼠肝纤维化的预防作用及对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子(transformin ggrowth factor,TGF)-β1/Smads信号通路的影响。方法 45只健康SD大鼠被随机分为正常对照组、模型组、蓝莓预防组、丹芍化纤胶囊预防组、蓝莓┼丹芍化纤胶囊预防组。每组9只。用四氯化碳(CCl4)制作大鼠肝纤维化模型,共8周。测定肝脏指数及血清ALT、AST并进行肝组织病理学检查,采用实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1、Smad4 mRNA的表达,免疫组织化学法检测肝脏组织TGF-β1、Smad4及Smad7蛋白的表达。结果与正常对照组比较,模型组TGF-β1及Smad4的表达增高(P<0.05),而Smad7的表达降低(P<0.05)。与模型组比较,各预防组血清ALT及AST均明显降低(P<0.05),TGF-β1及Smad4的表达均降低(P<0.05),而Smad7的表达均增高(P<0.05)。结论蓝莓对CCl4所致大鼠肝纤维化有一定的预防保护作用,其机制可能与蓝莓影响TGF-β1/Smads信号转导通路,从而下调TGF-β1及Smad4的表达,同时上调Smad7的表达有关。

吴茱萸碱对肝癌HepG2细胞侵袭和迁徙的影响

目的:研究吴茱萸碱对人肝癌细胞Hep G2细胞外调节蛋白激酶(extracellular-regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)表达的影响.方法:Transwell小室检测吴茱萸碱对Hep G2细胞侵袭及迁徙的影响.集落形成实验检测吴茱萸碱对Hep G2细胞集落形成能力的影响.Western blot检测Hep G2细胞ERK1/2、phospho-ERK1/2(P-ERK1/2)蛋白.结果:吴茱萸碱5、25、50μmol/L作用后,H e p G 2细胞侵袭细胞数分别为3 2.3个±1.3个、22.3个±2.5个、10.6个±3.7个,对照组为97.6个±6.3个,差异有统计学意义(P<0.05);迁徙细胞数为57.7个±3.2个、26.8个±1.6个、15.4个±3.9个,对照组为106.3个±3.2个,差异有统计学意义(P<0.05).5、25、50μmol/L吴茱萸碱作用Hep G2细胞集落形成数分别为147.0个±12.1个、94.3个±4.0个、0个,对照组为231.3个±15.4个,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot分析5、25、50μmol/L吴茱萸碱处理Hep G2细胞24 h及30μmol/L吴茱萸碱处理Hep G2细胞24、48 h后,ERK1/2蛋白的表达无明显变化,但其活化形式P-ERK1/2蛋白的表达量减少.结论:吴茱萸碱可显著抑制人肝癌Hep G2细胞侵袭和迁徙及克隆增殖能力,其机制可能与吴茱萸碱抑制ERK1/2蛋白活化有关.

细胞壁缺陷型伤寒沙门菌染色体的PCR-SSCP分析

目的 了解伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株 (CWDMs)的染色体特点 ,探讨伤寒沙门菌CWDMs变异的分子机制。方法 对伤寒沙门菌CWDMs染色体DNA进行特异性PCR扩增及SSCP分析。结果 PCR SSCP显示伤寒沙门菌CWDMs具有与亲代细菌型相同的双链DNA和一条单链DNA ,但缺少了一条单链DNA。结论 伤寒沙门菌CWDMs仍保留了与其亲代细菌型一致的特异性染色体基因 ,但也发生了染色体基因的突变。

血清胱蛋白抑制剂C在原发性高血压患者早期肾损害检测中的应用

肾脏病变是原发性高血压的并发症之一[1],寻找及时有效检测轻度肾功能损害的检测方法对控制原发性高血压患者肾脏损害的发展和治疗有重要意义.本文采用ELISA双抗体夹心法检测原发性高血压患者血中胱蛋白酶抑制剂C(CystatinC,CysC)的浓度并与临床常规肾功能指标尿素氮(Bun)、肌酐(Cr)作比较,旨在寻找简便、灵敏并能早期发现肾脏损害的指标.

蓝莓花青素对氧化应激诱导肝星状细胞活化、增殖和凋亡的影响及机制探讨

目的观察蓝莓提取物花青素对氧化应激诱导肝星状细胞HSC-T6活化、增殖的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期HSC-T6细胞分为观察组、对照组、空白组,观察组先加入600μg/m L蓝莓花青素干预24h后,加葡萄糖氧化酶(GO)100 U/L孵育3 h,对照组加入GO 100 U/L孵育3 h,空白组不做任何处理。干预24 h时采用细胞免疫化学法检测各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),ELISA法检测胞质Ⅰ型胶原(ColⅠ);采用MTT法观察各组细胞增殖情况,采用流式细胞仪观察各组细胞凋亡情况;采用硫代巴比妥酸法检测各组胞质丙二醛(MDA),黄嘌呤氧化酶法检测各组胞质SOD,微量酶标法测定各组胞质谷胱甘肽(GSH)。结果干预24 h时,各组α-SMA相对表达量为空白组<观察组<对照组,P均<0.05。干预24 h时,观察组细胞增殖率低于对照组,P<0.05。干预24 h时,观察组细胞凋亡率高于其余两组,P均<0.05。干预24 h时,观察组胞质MDA低于对照组(P<0.05),SOD、GSH均高于空白组(P均<0.05)。结论蓝莓花青素可抑制氧化应激诱导的肝星状细胞的活化与增殖,并促进细胞凋亡;其机制可能与抑制胞质内MDA表达,促进SOD、GSH表达有关。