两种系列新型季铵盐Gemini表面活性剂的杀菌活性

考察系列季铵盐Gemini表面活性剂C12-S2En-C12·2Br(n=1,3)和C12-S(?)-C12·2Br(s=2,3,4,6)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的悬液定量杀菌效果,并与十二烷基三甲基溴化铵(C12TABr)的效果比较.结果表明,C12-S2En-C12·2Br和C12-S(?)-C12·2Br具有比C12TABr优良得多的杀灭大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的能力.作用10 min后,对这3种菌均达到杀灭99.9％以上的效果.

季铵盐Gemini表面活性剂杀菌活性及其与分子结构的关联

The bactericidal activities of two series of quaternary Gemini surfactants have been examined by the suspension quantitative germicidal tests against Escherchia, Staphylococcus aureus and Candida alibicans respectively, the dodecyltrimethylammonium bromide(C 12TABr) was used for comparison. All of the quaternary Gemini surfactants showed superior bactericidal activities to C 12TABr due to higher densities in both headgroup charge and alkyl chains.

Real-time PCR检测核酸疫苗中宿主基因组残留DNA

目的建立Real-time PCR方法,用于定量检测核酸疫苗中宿主基因组的残留DNA。方法以Lightcycler平台为基础,选择大肠杆菌23S核糖体RNA基因为靶标基因设计扩增引物,建立基于SYBR GreenⅠ荧光染料的Real-time PCR检测方法,并用于核酸疫苗纯化过程中间产物的检测。结果整个检测过程可在30min内完成,特异性强,检测灵敏度可达10fg/μl,其标准曲线的相关系数为-0.99。结论该方法可用于核酸疫苗中宿主基因组残留DNA的检测。

HIV-1 CN54 Gag P55和P24蛋白的高效表达、纯化和鉴定

目的 探讨HIV 1中国株CN5 4GagP5 5和P2 4重组蛋白的高效表达并纯化 ,为研究HIV疫苗和诊断试剂创造条件。方法 分别将CN5 4GagP5 5和P2 4基因克隆至 pBV2 2 0和 pThioHisC载体 ,构建非融合表达载体 ;将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1codonplus RIL ,对工程菌进行诱导表达。Western Blot检测目的蛋白 ,用DEAE SeparoseFF阴离子交换层析柱纯化目的蛋白 ;纯化的P5 5和P2 4抗原蛋白分别包被酶标板作ELISA检测。结果 P5 5以包涵体的形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 30 % ,P2 4实现了可溶性表达 ,表达量占总菌体总蛋白的4 0 % ;纯化后P5 5纯度达到 80 % ,P2 4纯度超过 90 %。Western Blot和ELISA检测均显示了良好的的灵敏度和特异性。结论 HIV 1CN5 4GagP5 5和P2 4抗原蛋白可在大肠杆菌中高效表达 ,纯化的抗原蛋白具有良好抗原性 。

小议中学课堂管理

在课堂教学过程中，会出现各种各样的突发事件，在处理这些事件时，应该注意到任何课堂问题行为都涉及三个要素：行为的主体、行为发生的时间及行为的性质。问题一旦发生，教师在决策时应对这三个因素进行全面考虑：究竟是什么样的学生产生了问题；行为是发生在正式上课之前，课程进行当中，还是临近下课之时；这些问题行为究竟会在多大程度上妨碍教学活动。

技改大修工程服务进度管理精益提升研究

针对县公司技改大修项目工程服务进度管理远远落后于管理目标的问题,对里程碑计划执行率低和资金完成率低的现状进行分析,采用精益六西格玛DMAIC管理流程,找出关键影响因素并验证,运用5S管理的工具和方法实施改善。实践证明应用精益六西格玛管理能有效地解决管理问题,并对同类问题有着广泛的推广意义。

放管服形势下边远民族地区10kV配电网项目可研管理策略

随着国家电网公司"放管服"改革的持续推进,各地市供电公司10 kv配电网项目可研管理模式也发生巨大变化,下文中笔者结合自己的工作经验从政策变化、管理模式变革等几个方面对放管服形势下10 kV配电网可研管理问题进行分析并提出改进建议,为电网企业更好落实放管服改革要求提供一定参考。

一名女大学生和她父亲的焦虑

接案:大学生小兰突然不想读书了一天,在邢台市临西县委统战部工作的社工接到了一位民营企业家李总的求助电话。这位企业家说,他的女儿小兰突然不想继续读大学了,现宅在家里,精神不振,不想活了。他非常担忧女儿目前的状况及以后的前途,没有心思做生意,给社工打电话希望能提供帮助。李总经营一家轴承门市,是县委统战部联系的民营企业家,因女儿出现问题影响了做生意。县委统战部的社工接到电话后,立即入户进一步了解情况。

提高内毒素去除效果的质粒DNA层析纯化工艺的优化

目的优化质粒DNA分子筛或离子交换层析工艺,提高内毒素去除效果。方法在经精胺沉淀初步纯化的质粒DNA溶液中,加入不同浓度的EDTA(5、10和20mmol/L)或SDS(0.1%、0.2%和0.5%),分别进行Sephacryl S-1000分子筛层析及Source30Q离子交换层析,收集质粒峰,测定内毒素含量。结果用含0.5%SDS的质粒溶液进行分子筛层析,用含10～20mmol/L EDTA或0.1%～0.5%SDS的质粒溶液进行离子交换层析,质粒DNA的内毒素含量均<5EU/mg。结论添加一定浓度的EDTA或SDS可提高质粒DNA分子筛层析或离子交换层析去除内毒素的效果。综合考虑安全性因素,推荐用含10mmol/L EDTA的质粒溶液进行Source30Q离子交换层析。

共表达不同水平的IL-12对于HBV DNA疫苗质粒免疫原性的影响

目的 在HBsAg DNA疫苗质粒中共表达IL-12佐剂分子,研究IL-12的表达水平对于HBV DNA疫苗质粒免疫原性的影响.方法 构建携带来源于中国地区C型HBV参照序列CHN-HBV07-C经密码子优化的preS2-S基因的DNA疫苗质粒pHBV,并将3个不同IL-12表达水平的佐剂分子表达盒序列分别克隆入该疫苗质粒中,通过瞬时转染293T细胞以检测重组质粒IL-12分子及乙肝表面抗原的表达情况.将不同IL-12表达水平的疫苗质粒免疫BALB/c雌性小鼠,IFN-γ的ELISPOT方法检测HBsAg抗原特异性的细胞免疫应答,化学发光定量ELISA法检测HBsAg特异的抗体水平.结果 成功构建3个不同IL-12表达水平的HBV DNA疫苗质粒,293T细胞转染结果显示：不携带IL-12分子表达盒的对照疫苗质粒pHBV的HBsAg表达水平可达70 ng/ml;低表达IL-12的疫苗质粒pHBV-12l的HBsAg表达水平为18 ng/ml;而高表达IL-12的重组疫苗质粒pHBV-12h的HBsAg表达水平仅为6 ng/ml.BALB/c小鼠的免疫结果表明：高表达IL-12分子的疫苗质粒pHBV-12h所诱导的细胞免疫及体液免疫水平相对于对照疫苗质粒pHBV均显著降低了.低表达IL-12分子的疫苗质粒pHBV-12l所诱导的抗体水平也显著降低了,但其细胞免疫应答水平却显著提高了.结论 在同一疫苗质粒中,高表达IL-12分子的质粒可能会影响到抗原蛋白的表达,而低表达IL-12分子的疫苗质粒却能增强细胞免疫应答.因此,平衡好佐剂分子及抗原蛋白的表达水平对于诱导高水平的免疫应答是个重要的因素.

HIV-1中国株CN54 Gag蛋白在毕赤酵母中的表达纯化和鉴定

目的 利用毕赤酵母表达系统高效表达HIV 1中国株CN5 4的Gag蛋白,初步确立发酵和纯化工艺。方法 PCR扩增CN5 4Gag基因,插入毕赤酵母表达载体pPS1 0 ,电转化毕赤酵母菌株GS115 ,G4 18筛选高表达工程菌,利用5L发酵罐进行高密发酵,通过SPSepharoseFF和DEAESeparoseFF柱层析,用HIV 1阳性血清和p2 4抗原检测试剂盒对纯化后的Gag蛋白进行免疫学性质的鉴定。结果 构建了高效表达CN5 4Gag蛋白的毕赤酵母工程菌株,发酵罐培养的菌体密度吸光度(A6 0 0 值)超过30 0 ,Gag蛋白表达量达到12 0mg L。纯化后的Gag蛋白纯度高于90 % ,p2 4检测强阳性并能够与HIV 1阳性血清发生特异的抗原抗体结合反应。结论 本研究在毕赤酵母中高效表达了HIV 1中国株CN5 4的Gag蛋白,并进行了纯化和鉴定,为针对我国新一代HIV蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。