家蚕蛾吐出液的酶活性及蛋白质种类鉴定

家蚕羽化时用口腔吐出液溶解前端茧层的丝胶及少量丝素后脱茧而出,测定吐出液中各种酶类的活性以及鉴定吐出液中的蛋白质种类,对解析家蚕羽化过程的溶茧机制具有重要意义。在家蚕羽化前解剖收集嗉囊液,在家蚕羽化时收集蛾吐出液,解剖获取蛾下颚晶体,测定3组样品中的蛋白酶、酯酶、纤溶酶和丝胶酶活性:在蛾吐出液和嗉囊液中皆检测到4种酶的活性,2组检测样品除蛋白酶活性接近外,酯酶、纤溶酶和丝胶酶活性则是蛾吐出液比嗉囊液分别高出21%、57%、26%;下颚晶体不具有纤溶酶活性,其他3种酶的活性也皆比蛾吐出液和嗉囊液低。采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析技术在家蚕蛾吐出液中鉴定出29种蛋白质,其中包括14种酶类、4种蛋白酶抑制剂、5种30K蛋白、1种转运相关蛋白、2种免疫相关蛋白和3种其他蛋白质。研究结果显示了蚕蛾吐出液成分的复杂性,同时说明家蚕羽化时吐出液对丝胶和部分丝素的水解除了溶茧酶的作用外,可能还有其他成分的参与。

家蚕蜕皮物和蝉蜕制备壳聚糖的理化特性与抑菌活性分析

壳聚糖在医用材料等领域有广泛用途。以家蚕5龄幼虫、蛹的蜕皮物以及蝉蜕为材料制备壳聚糖,并测定样品的结构、理化性质和抑菌活性。3种材料制备壳聚糖的红外光谱与壳聚糖标准品基本相似,只存在个别峰值、峰位的差异,表明3种壳聚糖样品的基本结构相同。3种壳聚糖的粘度和分子质量存在一定差异,其中蝉蜕制备壳聚糖的粘度达到90.4 m Pa·s,家蚕5龄幼虫蜕皮物（简称5龄蚕蜕）制备壳聚糖的粘度则低至11.7 m Pa·s,蚕蛹蜕皮物（简称蛹蜕）和5龄蚕蜕制备壳聚糖的相对分子质量分别为2.6×10^4、1.2×10^4,均小于蝉蜕制备壳聚糖的相对分子质量（1.0×10^5）;蝉蜕和蛹蜕制备壳聚糖的脱乙酰度接近,均高于5龄蚕蜕制备壳聚糖的脱乙酰度。3种壳聚糖抑菌的最适p H在4.5～6.5,依据测量抑菌圈的大小,以5龄蚕蜕制备壳聚糖的抑菌效果最好,其次是蝉蜕和蛹蜕制备的壳聚糖。测试结果提示,家蚕5龄幼虫和蛹的蜕皮物以及蝉蜕等均是开发昆虫壳聚糖的优质原料。

有机磷农药辛硫磷对家蚕卵巢培养细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测

采用单细胞凝胶电泳技术检测农药对家蚕卵巢培养细胞(Bm N)DNA的损伤作用,从细胞毒理学方面确证农药对家蚕的残留毒性,并探讨家蚕培养细胞作为农药危害及残留检测生物标志物的可行性。以有机磷杀虫剂辛硫磷以及Bm N细胞供试,用0.05 mg/L辛硫磷药液(约为家蚕5龄第1天幼虫24 h LC50的1/100)处理正常Bm N细胞,24 h后观察到处理组Bm N细胞出现明显的凋亡现象,通过单细胞凝胶电泳检测到Bm N细胞的DNA条带有95.43%出现拖尾现象。试验结果表明Bm N细胞对辛硫磷非常敏感,低浓度辛硫磷即会对细胞DNA造成严重损伤,该项技术可用于农药对家蚕的危害及残留毒性鉴定,同时也说明Bm N细胞可以作为农药的细胞毒性研究材料。

家蚕蛹蜕皮物和蝉蜕成分的GC-MS分析

以家蚕蛹蜕皮物和蝉蜕为材料,在常温条件下用正己烷浸泡粉末的方式,进行两种材料的成分提取,采用GC-MS分析提取物成分。结果表明:家蚕蛹蜕皮物和蝉蜕都是以烷烃类为主要成分,相对含量分别为74.55%和86.75%,主要的烷烃皆为正二十六烷;另外还含有醇类、酯类,但相对含量两种材料有所差异,家蚕蛹蜕皮物中相对含量较高的是油醇和硬脂酸烯丙酯,蝉蜕中相对含量较高的是二十七烷醇和乙酸三十烷酯;只有家蚕蛹蜕皮物中含有15-羟基十五烷酸,且含量只占0.22%。

医学八年制神经生物学小班化探究教学实施研究

神经生物学是重要的医学基础课,是跨学科、多水平的综合课程,是基础医学、临床医学和预防医学专业的必修课程。本硕博连续的八年制是一种新型医学生培养模式,包含了从本科到博士的所有学习和研究阶段,对学生能力、教师能力尤其是教学方法都有较高要求。小班化探究式教学模式,充分融合教师引导与学生主体的共同教学行为,非常契合八年制学生神经生物学课程学习。在教学实施中,应用智慧教学云平台的爱课堂教学系统和专题研讨等交互手段,结合探究式教学策略,展现神经生物学课程内容综合性和前沿性。通过知识型、能力型和研究拓展型的递进式探究学习,促进八年制学生思维能力、创新能力和分析解决问题能力的综合提升。