MEIA法测定乙肝病毒表面抗原的评价及临床应用

目的 对微粒子酶免疫测定法(MEIA法)检测乙肝病毒表面抗原进行方法学评价并研究低含量乙肝表面抗原人群阳性检出率。方法 采用美国雅培公司的AXSYM型化学发光仪对乙肝病毒表面抗原卫生部质控物、高浓度乙肝病毒表面抗原标本进行稀释测定,同时与ELISA法检测乙肝表面抗原进行比较;对低浓度(HBsAg≤1μg/L)的标本进行中和确证试验与采用PCR-ELISA法定量测定HBV DNA。结果 微粒子化学发光法检测乙肝病毒表面抗原具有较高灵敏度,达0.1μg/L;有较好的重复性和特异性;低浓度(HBsAg≤1μg/L)在人群中分布率为0.53％。结论 微粒子酶免疫法对提高低含量乙肝表面抗原阳性检出率具有重要意义。

毛细管等速电泳法分离血清脂蛋白

目的建立毛细管等速电泳（CITP）分析血清脂蛋白的方法。方法用盐酸和丙氨酸组成的不连续缓冲体系分离荧光标记的脂蛋白颗粒；各亚组分的相对峰面积（RPA）结合血清总胆固醇反映各脂蛋白胆固醇的含量。结果本法可在6min内将血清脂蛋白分出9条带，其中1—4为HDL，5为CM，6为VLDL／LDL，7—9为LDL。各组分的RPA批内CV为3．17％～13．55％，批间CV为4．55％～15．33％；血红蛋白〈20g／L、胆红素〈342μmol／L、清蛋白〈70g/L对结果无影响；HDL-C、LDL-C与均相法相关（r分别为0．87和0．84，P〈0．001）。结论CITP可快速、灵敏分离定量血清脂蛋白及其胆固醇含量，可用于临床分析脂质代谢异常。

高效毛细管电泳分离氨基酸部分影响因素的探讨

目的探讨高效毛细管电泳分离氨基酸的有关影响因素。方法用毛细管电泳法对20种常见氨基酸的2,4—二硝基氟苯(DNFB)衍生物进行了分离研究,分析缓冲液浓度、pH值、有机溶剂及表面活性剂对分离的影响。结果缓冲液浓度、pH值及有机溶剂对氨基酸的DNFB衍生物分离有很大的影响,而表面活性剂基本对其无影响。在优化条件下,17种氨基酸除亮氨酸、异亮氨酸外均达到基线分离。结论以浓度为30 mmol/L、pH值9.9的硼砂溶液含15%异丙醇为运行缓冲液,分离氨基酸DNFB衍生物效果最佳,分离时间30 m in,出峰17个。

高效毛细管电泳分离氨基酸对肝癌肝硬化的诊断价值

目的:建立高效毛细管电泳分离氨基酸的方法探讨肝癌肝硬化患者血清氨基酸变化, 方法:用毛细管电泳法对17种常见氨基酸的2,4-二硝基氟苯(DNFB)衍生物进行了分离研究,优化缓冲液浓度、pH、有机溶剂及表面活性剂对分离影响的条件,对正常人, 肝癌及肝硬化患者各20例的血浆游离氨基酸进行测定. 结果:在优化条件下,17种氨基酸除亮氨酸,异亮氨酸外均达到基线分离.9 min内分离18种氨基酸,线性在20- 1 000μmol/L范围,回收率为77.5-113.3%,批内精密度2.6-11.4%,批间精密度5.8-19.7%.肝硬化组酪氨酸、丝氨酸、色氨酸明显升高,丙氨酸明显下降;肝癌组酪氨酸、半胱氨酸、缬氨酸明显升高,脯氨酸明显下降. 结论:以浓度为30 mmol/L pH9.9的硼砂溶液含150 g/L异丙醇为运行缓冲液,分离氨基酸DNFB衍生物效果最佳,分离时间30 min, 出峰17个.毛细管电泳测定血浆游离氨基酸对肝癌肝硬化诊断和治疗有一定指导意义.

毛细管区带电泳分离血清脂蛋白

目的建立毛细管区带电泳分离血清脂蛋白的方法。方法Beckman毛细管电泳仪分离NBD-酰基鞘氨醇预染的血清脂蛋白,激光诱导荧光检测。比较几种缓冲体系缓冲溶液浓度、pH和表面活性剂对分离结果的影响。结果pH10·015mmo1/L硼砂溶液中添加0·001%Brij35,可在8min内将脂蛋白分出3条区带。结论毛细管电泳方法稳定,重复性好,与常规方法有一定可比性,可作为临床分析血清脂蛋白的选择方法。

毛细管等速电泳法分析肾病综合征患者的脂质代谢

目的探讨肾病综合征(NS)患者脂蛋白组成、含量和脂质代谢酶的活性。方法用毛细管等速电泳法(cITP)将血清脂蛋白分成9种成分,结合总胆固醇(TC)浓度定量分析高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),并根据代谢酶催化的底物/产物比值反映卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)、脂蛋白脂肪酶(LPL)和三酰甘油酶(HL)活性。慢高密度脂蛋白(sHDL)和快高密度脂蛋白(fHDL)相对峰面积的比值可反映LCAT活性;乳糜微粒(CM)/中间密度脂蛋白(IDL)和IDL/低密度脂蛋白(LDL)比值分别反映LPL和HL活性。底物/产物比值越大,酶活性越低。结果cITP定量测定HDL-C、LDL-C与常规方法呈正相关[相关系数(r)分别为0.86、0.83,P<0.001]。NS组sHDL/fHDL、CM/IDL、IDL/LDL比值均明显高于对照组,LCAT、LPL和HL活性均低于对照组。结论cITP可作为分析脂蛋白组成、含量和反映脂质代谢酶活性的新方法。

MDQ型毛细管电泳仪分离血清脂蛋白方法学建立与评价

目的建立毛细管区带电泳分离血清脂蛋白的方法。方法用75μm(i.d.)×60 cm(L)未涂层熔融硅毛细管,含0.001 g/d l B rij35 pH 10.0的硼砂溶液作电泳缓冲液,分离经NBD-酰基鞘氨醇预染的血清脂蛋白,激光诱导荧光(L IF)检测。结果10 m in内可将脂蛋白分成3条区带。结论毛细管区带电泳为血清脂蛋白分析提供了一种新的分析方法。该法简单、快速、重复性好。

白血病患者未成熟网织红细胞指数假性增高及原因探讨

目的研究白血病患者外周血未成熟网织红细胞指数（immaturereticulocyte fraction，IRF）出现的假性升高并分析其原因。方法运用SysmexXE-2100型血液细胞分析仪检测14例白血病患者外周血网织红细胞（reticulocyte，RET），得出各自的IRF，并对RET散点图进行分析。结果14例中有6例IRF明显增高，均大于30％，且RET散点图分布异常，其中有4例仪器出现“Flag”报警提示“RETAbnScattergram”；对6例中的4例白血病患者临床经去白细胞治疗后，IRF均小于20％，且RET散点图分布未见异常，仪器也未出现“Flag”提示“RETAbnScattergram”。结论白血病患者大量的白血病细胞导致不充分的荧光着染，产生大量的低荧光细胞，被仪器误认为不成熟的RET，从而引起IRF的假性升高。临床检验工作者须认真检查网织红细胞散点图形，从而对结果作出正确的判断。

毛细管电泳分离脑脊液中神经递质类氨基酸及其临床应用

目的建立快速测定人脑脊液中神经递质类氨基酸的方法。方法用高效毛细管电泳-激光诱导荧光法检测了40例正常脑脊液、38例病毒性脑炎病人脑脊液、42倒脑出血病人脑脊液神经递质类氨基酸。结果在20rain内分离出4种氨基酸，线性范围为0．1～50μmol／L，峰的迁移时间RSD0．56％～2．06％，峰面积RSD2．24％～3．79％；回收率为98％以上。结论高效毛细管电泳-激光诱导荧光法具有快速、准确、灵敏的特点，可作为临床检测脑脊液标本中的神经递质类氨基酸的方法。

黑龙江省工业发展格局研究

随着我国经济改革开放的进一步深入,我国各地区域经济都有着不同程度的改善和发展.但黑龙江省经济发展相对于其它国内地区经济的发展要滞后一些,这与黑龙江省的政策、环境、地理、人文等方面诸多因素都有着非常重要的关系.因此,黑龙江省经济改革除了要借鉴其它区域经济发展的成功经验外,必须要结合自己的实际情况,走自己发展之路.区域经济的发展工业要先行崛起,而区域经济的发展关键问题就是发展格局是否合理.因为,合理的工业格局,才能合理有效地利用现存的有限资源,避免浪费,集中优势力量,在面对越来越激烈的竞争环境中,提高产业整体竞争实力.所以,我们在认真研究该区域实际情况下,提出工业发展格局,为该区域工业长期稳定发展提出战略性建议,有效地促进该区域经济的长期持续地发展.

Technicon RA-XT型生化分析仪测定血清总胆汁酸及其临床应用

用日本第一化学药品株式会社生产的总胆汁酸（TBA）酶法试剂盒，在TechniconRA－XT型全自动生化分析仪上建立了测定空腹血清总胆汁酸的程序，对此方法作了初步评价。TBA浓度在560μmol／L以内成线性，三份高、中、低浓度的标未批内CV0．7％～1．5％（n=20），批间CV1．2％～3．2％（n=10）；结果（±s）μmol／L：96例献血员TBA浓度为8.86±2．84，急性肝炎组（n=26）为117．45±78．64，慢性活动性肝炎组（n=17）为94．34±34.60，肝硬化组（n=9）和肝癌（n=16）分别为33.55±12．70，47.72±1684，均明显高于献血员组（P＜0．001）；慢性迁延性肝炎组（n=10）为8．46±1．93，（P＞0．05）。78例肝病组TBA总阳性年为83．3％，ALT总阳性率为69．2％，而非肝病组（n=120）TBA阳性率为3．6％，而ALT阳性率为9．1％，结果表明空腹TBA增高可作为肝实质性损伤的灵敏指标。

早期B细胞因子3对HepG2细胞周期的影响

目的:克隆人早期B细胞因子3(EBF3)基因,构建真核表达载体pEGFP/EBF3,研究人EBF3对肝癌细胞株HepG2细胞周期的影响。方法:提取人胎盘组织总RNA,采用RT-PCR技术克隆人EBF3基因,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1,重组质粒双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染HepG2细胞,Western blot确证EBF3-EGFP融合蛋白的表达及亚细胞定位,流式细胞术分析转染细胞周期。结果:成功获得全长人EBF3基因,经双酶切和序列测定鉴定,真核表达质粒pEGFP/EBF3构建正确,将pEGFP/EBF3导入HepG2细胞24小时后,在倒置荧光显微镜下可观察到EBF3-EGFP融合蛋白主要表达于核内。Western blot证实转染pEGFP/EBF3后24小时和48小时细胞质和细胞核中均检出相对分子质量(Mr)为87 000的EBF3-EGFP融合蛋白。转染pEGFP/EBF3后48小时和72小时,S期细胞比例均明显高于pEGFP-N1转染细胞组,表明EBF3基因的导入可诱导细胞从G1期向G2期发展,从而促进细胞增殖。结论:成功构建了真核表达质粒pEGFP/EBF3,pEGFP/EBF3转染组S期细胞比例高于pEGFP-N1转染组,提示EBF3对人肝癌细胞株HepG2细胞有促进增殖作用。

实时荧光定量PCR检测肝癌组织中早期B细胞因子3 mRNA表达水平

目的建立SYBR Green I实时荧光定量RT—PCR（FQ—RT—PCR）检测肝组织中早期B细胞因子3（early B—cell factor 3，EBF3）mRNA含量的方法，探讨EBF3 mRNA在肝癌中的检测意义。方法在EBF3基因第8和第9外显子区，在内参β2M第1和第2外显子区设计特异性引物，实时检测PCR产物的荧光强度，以各自标准品建立标准曲线，由软件自动计算出待测样本中EBF3及β2M mRNA含量，以EBF3 mRNA和β2M mRNA含量的比值进行EBF3 mRNA表达水平评价。结果FQ—RT—PCR检测EBF3 mRNA含量线性范围为3．08×10^7～3．08×10^12 copies／L，批内和批阅变异系数分别为8．6％和13．7％。18例肝癌和配对远端肝组织中EBF3 mRNA与β2M mRNA的对数比值分别为0．52±0．17和0．28±0．23，差异有统计学意义0=3．56，P=0．0011）。结论FQ—RT—PCR检测EBF3 mRNA含量的方法具有较好的检测灵敏度和重复性，适用于临床研究。

不同浓度HBsAg血清中乙型肝炎标志物模式分析

目的 :分析不同浓度 HBs Ag血清中乙型肝炎标志物表现模式 ,以揭示其在人群中的分布特征。方法 :采用 ELISA法与微粒子酶免疫分析技术 (microparticle enzyme immunoassay,MEIA)测定 5 987例非肝炎流行区住院及门诊患者血清中 HBs Ag及其表面抗体 (抗 HBs)、乙肝 e抗原及 e抗体 (HBe Ag、抗 HBe)和乙肝病毒核心抗体 (抗 HBc) ;根据定值参比血清和样本 HBs Ag荧光速率值 /阴性对照荧光速率值之比 (S/N值 ) ,再结合中和确证试验结果来确定 HBs Ag浓度 ,同时分析乙肝病毒血清学标志物模式 ;对低浓度 (HBs Ag≤ 1μg/L )再用 PCR-EL ISA法定量测定 HBV DNA。结果 :共检出 HBs Ag阳性 784例 ,HBs Ag浓度≤ 1μg/L 32例(4.0 8%) ,～ 2μg/L 6 9例 (8.80 %) ,～ 5μg/L 47例 (5 .99%) ,>5μg/L 6 36例 (81.12 %)。低浓度 HBs Ag组以 1.4.5、1.3.5和 1.5为主要模式 ,高浓度 HBs Ag组以 1.4.5、1.3.5、1.3.4.5、1.5为主要模式。结论 :不同浓度 HBs Ag血清中乙肝病毒标志物表现模式在人群中具有不同的分布特征 ,低水平血清 HBs Ag人群不容忽视 ,提高 HBs Ag的检测灵敏度有重要意义。

毛细管电泳在氨基酸分析中的应用与进展

氨基酸在人体的许多生理过程中起着巨大的作用,氨基酸分析成为生命科学中最重要的技术之一,现主要从样品预处理、检测器、检测方法技术及应用等方面阐述毛细管电泳技术分离及检测氨基酸的新进展。

塑造良好产品形象 迎接入世挑战

企业的生产经营活动是围绕着如何以其产品和服务满足消费者需求这个中心进行的.产品是企业的支柱和基础,是影响企业经济效益好坏的决定性因素.产品形象的优劣直接关系到企业的竞争能力、关系到企业未来的生存和发展,因此必须重视产品形象的塑造.

企业现金流量定量分析

基于现金流量定量分析滞后,本文提出现金流量模式、经营现金营运定量分析、现金偿债定量分析和现金及现金等价物净增加额定量分析,建立现金营运指数模型;分析企业的财务状况、营运能力和获取现金流量的能力,解决影响企业发展的财务问题,提高企业利用现金流量加强财务管理的能力.