肿瘤抗原MAGEA4表达及其长肽疫苗的免疫活性

目的 设计针对黑色素瘤相关抗原(MAGEA)4的长肽,体外验证长肽的免疫原性。方法 使用在线数据库验证MAGEA4在不同肿瘤之间的表达情况及在不同肿瘤病理组织之间的表达情况。使用The Kaplan Meier plotter分析MAGEA4的表达情况对预后的影响。使用免疫表位数据库(IEDB)筛选已经鉴定过的MAGEA4 CD8^(+)T细胞表位,对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位集中区域选取合适长度的长肽,通过体外活性实验验证长肽是否具有免疫活性。酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测树突细胞(DC)荷长肽诱导的PBMCs中干扰素(IFN)-γ的释放;胞内因子染色检测表位肽诱导CTL的能力;CFSE细胞毒活性实验检测CTL对靶细胞的杀伤活性。结果 MAGEA4在结直肠癌、肺癌、皮肤癌、宫颈癌、乳腺癌中都高表达。在乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胃癌、头颈鳞状细胞癌、子宫内膜癌中高表达MAGEA4的患者有较差的预后。ELISPOT和胞内因子染色实验结果显示长肽P102-121和P280-294诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力。CFSE细胞毒实验结果显示表位P102-121和P280-294对靶细胞有一定的杀伤作用。结论 成功筛选出针对肿瘤抗原MAGEA4的两条长肽,可用作肿瘤免疫治疗的候选疫苗。

基于高效液相色谱指纹图谱的天麻饮片-标准汤剂-配方颗粒对比研究

目的研究天麻饮片、标准汤剂及配方颗粒化学成分种类和量的相关性,为天麻配方颗粒的临床应用和研究提供参考。方法建立高效液相色谱指纹图谱,从化学成分种类、相似度、共有峰峰面积、指标性成分含量4个方面对天麻饮片(12批)、标准汤剂、配方颗粒(A~D厂,各3批)进行对比研究。结果饮片、标准汤剂、配方颗粒的共有峰数目分别为13个、12个、12个,与饮片(0.935)相比,标准汤剂(0.972)的相似度较高,配方颗粒(A厂0.879,B厂0.866,C厂0.854,D厂0.863)相似度稍低。以12批饮片共有峰总峰面积的均值为基准1,天麻饮片、标准汤剂及配方颗粒的相对值为饮片(1.00)、标准汤剂(0.91)、配方颗粒(A厂0.62,B厂0.47,C厂0.52,D厂0.65)。测定了天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E共6种指标成分的含量,发现与饮片相比,标准汤剂、配方颗粒中各成分含量均有不同程度降低,成分相对值顺序为天麻素>巴利森苷C>对羟基苯甲醇>巴利森苷E>巴利森苷B>巴利森苷A。结论天麻饮片、标准汤剂及配方颗粒的化学成分种类和数目基本一致,但含量存在差异,其中配方颗粒中指标成分的含量差异较明显,说明应建立全面的质量控制体系、调整临床使用当量,以促进天麻配方颗粒的临床合理应用。

消萎汤辨证加味联合叶酸治疗胃癌前病变疗效分析

目的:探讨消萎汤辨证加味联合叶酸治疗胃癌前病变的疗效。方法:选取2017年1月~2019年10月本院收治的经胃镜活检病理证实为胃癌前病变的患者150例为研究对象,依据随机数字表法分为联合组(n=75)和叶酸组(n=75)。两组均采用叶酸(5 mg/次,tid)连续治疗6个月,联合组在叶酸治疗基础上联用消萎汤辨证加味连续治疗6个月。比较两组疗效,检测两组治疗前、治疗1、3和6个月的血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)、胃泌素和胃动素水平、萎缩、肠上皮化生、异型增生积分,统计比较两组不良反应发生率。结果:与叶酸组比较,联合组治疗有效率提高;治疗1、3和6个月的血清CEA、CA19-9、CA125水平以及同期萎缩、肠上皮化生、异型增生积分均降低,而血清胃泌素、胃动素水平增加(P <0.05)。与同组治疗前比较,联合组治疗1、3和6个月的血清CEA、CA19-9、CA125水平以及同期萎缩、肠上皮化生、异型增生积分均降低,而血清胃泌素、胃动素水平增加;叶酸组治疗3和6个月的血清CEA、CA19-9、CA125水平以及萎缩、肠上皮化生、异型增生积分均降低,而血清胃泌素、胃动素水平均增加(P <0.05);两组患者治疗期间均未出现明显不良反应。结论:消萎汤辨证加味联合叶酸治疗胃癌前病变疗效良好,可有效降低肿瘤标志物水平,提高血清胃泌素、胃动素水平,改善症状,且安全可靠。

地龙提取物制备工艺优化对其抗凝血作用及氨基酸含量的影响

目的:探讨地龙提取物制备工艺优化对其抗凝血作用及氨基酸含量的影响。方法:选择煎煮时间、醇沉比例和干燥方式作为影响因素,抗凝血效价和氨基酸含量作为评价指标,按L_(9)(3^(4))正交试验表设计方案,分析地龙提取物的制备工艺优化对抗凝血效价、氨基酸含量的影响。结果:煎煮时间(A)、醇沉比例(B)和干燥方式(C)对提取物抗凝血效价、氨基酸含量影响显著(P<0.05),影响大小排序为A>B>C;煎煮时间越长,醇沉比例越高,提取物的抗凝血效价、氨基酸含量越高;冷冻干燥制得提取物外观、颜色较好,抗凝血效价、氨基酸含量最高,含水量最低。以抗凝血效价、氨基酸含量为指标,最佳工艺为煎煮3 h,醇沉比例70%,干燥方式为冷冻干燥。以最佳制备工艺制备3批地龙提取物,外观疏松多孔、无塌陷,淡黄色,平均水分2.81%,平均抗凝血效价484 IU/mg,平均氨基酸总含量3.74%,3批各项指标相对标准偏差值<5%,批间差异小;氨基酸含量与抗凝血效价呈正相关(r=0.986,P=0.000)。结论:地龙提取物的制备工艺通过影响其氨基酸含量而影响抗凝血效价,最佳制备工艺为煎煮3 h,醇沉比例为70%,干燥方式为冷冻干燥,制得提取物批间差异小,重现性良好。

5例疑似低分子肝素引起药物性肝损伤的病例分析

目的:分析5例疑似低分子肝素引起药物性肝损伤的病例,为临床药师协助医师及时发现、诊治药物性肝损伤患者提供参考。方法:临床药师通过分析5例疑似低分子肝素引起药物性肝损伤的病例,协助医师制订个体化替代抗凝治疗和药学监护方案。结果:临床采用低分子肝素治疗时需加强对患者肝功能的监测,以促进临床安全用药。结论:为保障用药安全,临床药师应关注药物的罕见不良反应,采取必要的药学干预措施,从而改善患者的预后。

临床药师参与1例使用伏立康唑产生幻视幻觉不良反应的病例分析

目的通过对1名使用伏立康唑产生幻视幻觉不良反应患者进行分析,研究其药物应用方法、剂量等改进策略。方法男性患者,明显咳嗽症状,入院诊断为肺部感染与支气管扩张症,痰培养结果示念珠菌,使用氟康唑抗真菌治疗未好转,采用伏立康唑抗真菌治疗。结果使用一天后出现幻视幻觉,说胡话,但是咳嗽咳痰乏力症状好转,考虑与伏立康唑的不良反应有关,但也不能排除其他疾病因素引起相关症状。因此将伏立康唑剂量调整为100mgq12h治疗。但患者恶病质明显,感染性休克、Ⅱ型呼吸衰竭死亡。结论伏立康唑抗真菌感染治疗效果显著,但同样易引起幻视幻觉等不良反应的发生,在临床实际应用治疗过程中,应在临床药师的监督与管理下合理、谨慎选择剂量。

清胰合剂的指纹图谱建立及8种成分含量测定

目的 从定性和定量2个角度为清胰合剂(QM)的质量标准研究提供科学依据。方法 建立QM的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,对其进行化学模式识别分析,同时测定该制剂中绿原酸等8种成分的含量。以Agilent SB-C18为色谱柱、0.1%磷酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,柱温为35℃,流速为0.6 mL/min,检测波长为254 nm。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》、SPSS 20.0、SIMCA 14.1软件对QM样品进行相似度评价、聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析。结果 15批QM共标定了22个共有峰,相似度均超过0.975。对22个共有峰进行了归属,并指认出了其中8个成分。聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘法-判别分析均将15批QM分为了2类,同时筛选出了5种差异性成分,分别是峰9(菊苣酸)、峰14(黄芩苷)、峰18、峰19和峰21(黄芩素)。绿原酸、阿魏酸、菊苣酸、橙皮苷、黄芩苷、丹酚酸B、黄芩素和丹皮酚8种成分的含量分别为0.077~0.094、0.165~0.190、0.100~0.114、0.083~0.107、0.556~0.615、0.288~0.314、0.152~0.188、0.114~0.128 mg/g。结论 所建HPLC指纹图谱及含量测定方法可为QM的质量标准研究提供参考依据。