姜虎汤对结缔组织病相关间质性肺病模型小鼠免疫炎性损伤的影响

[目的]探讨姜虎汤对博来霉素(BLM)诱导结缔组织病相关间质性肺病(CTD-ILD)模型小鼠肺间质病变的影响。[方法]采用SPF级雄性C57/BL6小鼠,经BLM(2 mg/kg)气管内滴注诱导间质性肺病模型,将造模成功的30只小鼠随机分为模型组6只、阳性药组6只、姜虎汤高、中、低剂量组各6只,另选6只未造模小鼠作为正常对照组。正常对照组和模型组予蒸馏水10 mL/(kg·d),阳性药组予泼尼松7.5 mg/(kg·d),姜虎汤高、中、低剂量组分别予姜虎汤26.66、13.33、6.67 g/(kg·d)剂量灌胃给药,其中姜虎汤高剂量组每日分2次灌胃给药。干预4周后处死小鼠,采集肺组织标本。以苏木精-伊红染色法(HE)观察肺组织病理改变;蛋白免疫印迹(Western Blot)技术检测肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、转化生长因子β1(TGF-β1)、核因子-κB p65(NF-κB p65)、单磷酸腺苷(AMP)活化蛋白激酶α1(AMPKα1)、磷酸化AMPKα1(pAMPKα1)蛋白表达水平。[结果]模型组小鼠较正常对照组有明显病理改变(P<0.01),主要表现在肺组织炎症细胞浸润、间质纤维化;阳性药组肺组织炎症病变较模型组有改善(P<0.05);姜虎汤中、低组小鼠肺组织炎症细胞浸润较模型组有改善(P<0.05),姜虎汤高、中、低剂量组小鼠肺组织间质纤维化较模型组有改善(P<0.05)。Western Blot结果显示,与正常组比较,模型组小鼠肺组织中HMGB1、NF-κB p65蛋白表达水平显著升高(P<0.01),TGF-β1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),AMPKα1、pAMPKα1蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,姜虎汤中、低剂量组小鼠肺组织中HMGB1、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05),姜虎汤高剂量组小鼠肺组织TGF-β1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),阳性药组小鼠肺组织中AMPKα1蛋白表达水平明显上调(P<0.05),姜虎汤高剂量组小鼠肺组织中pAMPKα1蛋白表达水平明显上调(P<0.05);与阳性药组比较,姜虎汤高剂量组小鼠肺组织中TGF-β1蛋白表达水平明显下调(P<0.05);姜虎汤各剂量组间比较,姜虎汤高剂量组TGF-β1蛋白表达水平与姜虎汤中剂量组差异明显(P<0.05)。[结论]姜虎汤中、低剂量组在改善小鼠肺组织炎症病理损伤,及抑制免疫炎性因子高表达的作用更具优势;姜虎汤高剂量组在改善小鼠肺组织间质纤维化、抑制纤维化生成因子高表达及上调免疫炎性抑制因子的作用更强。其分子机制可能与激活AMPK,从而抑制HMGB1/NF-κB/TGF-β1免疫炎性信号通路相关。

虎杖苷对间质性肺病模型小鼠免疫炎性代谢性损伤的影响

目的 探讨虎杖苷(Polydatin, PD)对博来霉素(Bleomycin, BLM)诱导肺间质病变小鼠的干预作用及机制。方法 采用SPF级雄性C57/BL6小鼠,体质量(20±2)g,经BLM气管内滴注诱导间质性肺病模型,将造模成功的30只小鼠按随机数表法分为模型组6只、阳性药组6只、PD高、中、低剂量组各6只,另选6只未造模小鼠作为正常对照组。正常对照组和模型组予蒸馏水10 ml/(kg·d),阳性药组给予泼尼松7.5 mg/(kg·d),PD高、中、低剂量组分别给予PD 200 mg/(kg·d)、100 mg/(kg·d)、50 mg/(kg·d)剂量灌胃给药,其中PD高剂量组2次/d灌胃给药。干预4周后处死小鼠,采集肺组织标本。以HE染色观察肺组织病理改变;RT-PCR技术检测肺组织AMPKα1、PPARγ、PGC-1α mRNA转录水平;Western Blot技术检测肺组织AMPKα1、pAMPKα1、PPARγ、PGC-1α、HMGB1、TGF-β1、NF-κB p65蛋白表达水平。结果 模型组小鼠较正常对照组有明显病理改变(P<0.01),主要表现在肺组织炎症细胞浸润、间质纤维化;阳性药组肺组织炎症病变较模型组有改善(P<0.05);PD各治疗组小鼠出现肺组织炎症细胞浸润、间质纤维化较模型组有改善(P<0.05)。RT-PCR结果显示模型组小鼠肺组织中AMPKα1、PPARγ、PGC-1α mRNA转录水平较正常对照组有下降趋势,阳性药及PD各治疗组小鼠肺组织中AMPKα1、PPARγ、PGC-1α mRNA转录水平较模型组均有升高趋势;阳性药组及PD各组间变化无明显差异。Western Blot结果显示,与正常组比较,模型组小鼠肺组织中HMGB1、NF-κB p65蛋白表达水平明显升高(P<0.01),AMPKα1、pAMPKα1、PPARγ、PGC-1α蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,阳性药组及PD高剂量组AMPKα1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),PD高、低剂量组pAMPKα1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),PD中剂量组PPARγ蛋白表达水平明显升高(P<0.05);阳性药组HMGB1、PD低剂量组NF-κB p65蛋白表达水平明显下降(P<0.05),其余各治疗组HMGB1、TGF-β1、NF-κB p65较模型组均有下降趋势;阳性药组及PD各组间变化无明显差异。结论 PD能够改善CTD-ILD模型小鼠肺组织炎症病理损伤,改善肺间质纤维化病理改变,抑制免疫炎性损伤,其作用机制可能是通过激活AMPKα1/PPARγ/PGC-1α信号通路,抑制下游免疫炎性因子HMGB1、NF-κB的高表达,改善肺组织免疫炎性损伤;抑制纤维化细胞因子TGF-β1的释放,改善肺组织免疫炎性损伤及间质纤维化。

磁共振技术在糖尿病周围神经病变中应用的研究进展

目前,糖尿病周围神经病变的早期诊断和评估方式均存在局限性。近些年研究表明,影像学磁共振神经成像可以直观地显示周围神经病变的结构改变,并能够定量评估病变的范围。此外,其功能成像可以定量评估神经纤维损伤的程度,并与临床症状相一致。认为磁共振对糖尿病周围神经病变的早期诊断和疗效监测具有优势,有望成为可靠的定量评估方法。随着磁共振在糖尿病周围神经病变方面的研究受到了越来越多的关注。本文梳理了近5年来国内外关于糖尿病周围神经病变的磁共振研究文献,总结其中的重点内容,希望通过这些研究成果,为揭示该疾病的病理机制、临床诊断和效果评估提供参考。

腹股沟区皮下埋藏睾丸对兔精子发生的影响

目的探讨采用腹股沟区皮下埋藏睾丸的方式修复阴囊皮肤缺损对睾丸精子发生的影响。方法普通级健康6～8月龄新西兰大白兔60只,雄性36只,雌性24只,体重2.5～2.7kg。将雄兔随机分为实验组及对照组,每组各18只。实验组动物将双侧睾丸分别移位埋藏至双侧腹股沟区皮下,以制备睾丸埋藏修复阴囊皮肤缺损模型;对照组未作处理。两组于造模后8周末时采集精液进行常规分析,每组随机取6只兔测量睾丸表面温度,另随机每组取6只兔的睾丸进行活检,应用TUNEL法检测生精细胞凋亡情况。同时将两组未采集活检的雄兔分别与雌兔一一配对喂养,观察生育情况。结果对照组精液密度为(237.3±39.7)×109/L,精子活动率为76.9%±3.8%;实验组精液密度为(4.7±2.7)×109/L,精子活动率为0;两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组的睾丸表面温度为(36.15±0.64)℃,实验组为(38.02±0.36)℃,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。TUNEL检测示:实验组生精上皮变薄,仅存的精原细胞和初级精母见明显凋亡,凋亡指数(apoptotic index,AI)为89.69%±3.76%;对照组可见散在精母细胞和精子细胞凋亡,AI为7.73%±4.95%;两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组配对后对应的母兔均未受孕生崽;对照组配对后对应母兔均受孕生崽,平均生崽数为6只;两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论与皮瓣重建阴囊一样,腹股沟区埋藏睾丸修复阴囊皮肤缺损将导致兔生殖功能障碍,主要因睾丸局部环境温度升高诱导生精细胞过度凋亡所致。

阴囊皮瓣修复后局部温度变化对生精细胞凋亡的影响

目的:探讨采用皮瓣重建阴囊后局部温度变化及其对生精细胞凋亡和生育能力的影响.方法:24只健康雄性新西兰大白兔随机分成重建组(皮瓣重建阴囊组)和对照组,每组12只.雌性12只用于配对试验.重建组建立皮瓣重建阴囊模型前采集精液进行计数,埋藏法测量阴囊内睾丸表面的温度,然后建立皮瓣重建阴囊模型.于重建阴囊第8周,重建组再次采集精液及测量阴囊内睾丸表面的温度,并随机取重建组及对照组各6只动物进行睾丸活检.应用原位末端标记(TUNEL)法检测生精细胞凋亡.将两组未行睾丸活检的各6只雄兔分别与雌兔配对喂养观察生育情况.结果:皮瓣重建阴囊后第8周睾丸表面温度明显高于皮瓣重建阴囊前的温度,精子计数明显低于阴囊重建前的精子计数(P<0.05).与对照组相比,重建组睾丸生精细胞凋亡指数显著升高(P<0.05).配对喂养结果显示,重建组没有生育,而对照组平均生育幼兔(6.0±1.3)只(P<0.05).结论:皮瓣重建阴囊后兔睾丸局部温度升高,睾丸的生精细胞过度凋亡,导致雄兔不育.皮瓣不宜被临床继续选用于重建阴囊.

术中区域性高浓度抗生素预防感染的研究

采用局部组织注射金黄色葡萄球菌制成创伤感染模型。实验组术中区域性高浓度注射抗生素，预防家兔肢体远端创伤后感染。对照组作为常规治疗。结果实验组无一肢体发生感染，对照组组织细菌培养有细菌生长，病理切片示急性炎性反应，且可见小脓肿。

睾丸皮下埋藏对精子发生影响的可逆性探讨

目的探讨新西兰大白兔睾丸皮下埋藏导致精子发生障碍后,将埋藏之睾丸放回正常阴囊内其精子发生障碍是否可逆。方法育龄期雄性新西兰大白兔42只,曾有过生育史的雌性12只,将雄兔应用随机数字表法完全随机分成3组:空白组(12只);双埋组(双侧睾丸埋藏组12只);单埋组(单侧睾丸埋藏组18只)。双埋组将睾丸埋藏于两侧腹股沟区皮下;单埋组将一侧睾丸置于腹股沟区皮下,另一侧睾丸保留在阴囊内;空白组不作任何处理。模型成功后第9周空白组、双埋组、单埋组分别随机取6只进行睾丸活检,均行HE染色及采用TUNEL法检测生精细胞凋亡情况,同时对空白组及双埋组的剩余6只与分别与雌兔一一配对喂养观察生育情况。同期将单埋组未取活检的12只动物的未处理侧睾丸从正常阴囊内移出埋藏至同侧腹股沟区皮下,而将前期埋藏之睾丸放回刚移走睾丸的对侧正常阴囊内。单埋组睾丸放回阴囊后第4周及第9周分别对放回阴囊之睾丸取6只取活检,HE染色及TUNEL法检测生精细胞凋亡情况。结果与空白组相比双埋组模型建立后第9周的HE染色见曲细精管内生精细胞明显减少,排列紊乱,管腔内未见精子;TUNEL法检测结果显示精原细胞也有明显凋亡征象,生精细胞凋亡指数(apoptotic index,AI)明显高于空白组(P<0.05);配对喂养雌兔均无生育,生育率明显低于空白组(P<0.05)。单埋组模型建立后第9周埋藏之睾丸活检HE染色结果与双埋组相似,TUNEL法检测结果生精细胞的凋亡指数与双埋组相比较差异无统计学意义。埋藏睾丸放回阴囊术后第9周的HE染色示曲细精管内生精细胞层数增多,可见成熟精子,凋亡指数与双埋组比较明显降低。结论睾丸皮下埋藏与皮瓣重建阴囊一样会导致睾丸精子发生障碍,但这种损害是可逆的。

术中区域性高浓度抗生素防治手部创伤后感染

对45例手部创伤后需在止血带下进行清创修复术的病人,施行在止血带远端的前臂浅静脉内注射高浓度抗生素,使手术在局部高浓度抗生素维持下进行,预防术后感染。同期入院的另45例病人仅术后应用抗生素作对照。结果治疗组感染1例,对照组感染8例(P<0.05)。本方法为肢体远端创伤后预防性抗生素的应用提供了一种新的、可靠的给药途径。

急性失血性休克早期肠道细菌移位发生率研究

以成年健康家兔作实验动物．设计以失血量判断休克的轻重、不控制血压变化类似临床的休克模型．探讨急性失血性休克早期不同失血量、休克时间肠道细菌移位的发生率．以及休克复苏对肠道细菌移位的影响。实验组动物40只，以放血量占总血量的35％及50％各20只分两大组．再以复苏与否分四小组．每小组10只动物。复苏组于放血后1h开始复苏，全部动物分别于放血后1、3、5h抽血培养（5h处死动物取肠系膜淋巴结培养）。另5只不放血作对照组。结果无一动物血培养及肠系膜淋巴结（MLNS）培养阳性。另对27例急性失血性休克病人进行早期血培养．也无一例有阳性培养结果。初步提示急性失血性休克早期肠道细菌移位发生率不高。

烧伤病人早期肠源性感染临床研究

目的 探讨临床烧伤早期肠源性感染的发生率。方法 对 15 0例烧伤面积在 35 %～ 95 %的病人 ,按烧伤至入院时间分伤后 4h内、4～ 8h、8h以上 3个时相组 ,在入院即刻抽血培养检查。结果 伤后 3个时相组血培养检查无 1例阳性结果发现。结论 临床烧伤病人早期肠道细菌移位的发生率远没有实验研究那么高 ,就其原因进行了分析。

低剂量环磷酰胺减轻烧伤早期全身炎症介质综合征发生的实验研究

目的探讨低剂量环磷酰胺对烧伤大鼠全身炎症介质综合征 (SIRS)的控制作用。方法以大鼠为实验动物 ,分为空白组、对照组、实验组。对照组、实验组制作 5 0 %Ⅲ°烫伤模型 ,实验组于伤后 1小时腹腔内注射低剂量环磷酰胺 (2mg/kg) ,对照组腹腔内注射等量生理盐水。分别在伤后 2h、3h、6h测量 2组血液及肝脏组织中肿瘤坏死因子 (TNF -a)的含量。喂养至动物死亡观察两组动物的生存时间。结果实验组、对照组伤后 2小时血液及肝脏内TNF -a的含量明显高于未烧伤的空白组 (P <0 0 5 )。实验组伤后 2h、3h、6h血液及肝脏内TNF -a的含量明显低于对照组 (P <0 0 5 )。实验组动物的生存时间明显延长 (P <0 0 5 )。结论低剂量环磷酰胺能够减少烧伤后炎症介质的释放 ,能减轻烧伤后SIRS的发生。

创伤性皮肤缺损延迟一期皮瓣移植

1985年9月～1995年6月，对24例创伤性皮肤缺损采用延迟一期皮瓣移植；其中伤后2～5天修复17例，6～15天修复7例。1例皮瓣远端1／4坏死，余全部成活，无感染发生。皮瓣延迟一期移植便于手术者有充足的时间设计手术方案，组织有关人员进行手术，同时可使一些严重污染的创面变为相对清洁的创面提高了手术的成功率，尤其适合于显微外科开展尚不普及的基层医院。

岛状皮瓣修复会阴部皮肤软组织缺损

目的报道岛状皮瓣修复会阴部皮肤软组织缺损的效果 ,探讨皮瓣的选择。方法对2 0例不同类型的会阴部软组织缺损 ,分别采用髂腹股沟岛状皮瓣、腹壁浅动脉岛状皮瓣、胸脐岛状皮瓣进行修复。结果皮瓣均一期成活 ,随访外形及功能恢复好。结论会阴部皮肤软组织缺损首选局部皮瓣修复 ,皮瓣的选择应以手术简便、损伤小为原则。

分叶状腹壁任意超薄皮瓣修复多指指背皮肤撕脱伤

超薄皮瓣是近年来修复重建外科出现的一种新型皮瓣,它不受传统任意皮瓣长宽比不超过1:1.5的限制,扩大了任意皮瓣的使用范围。因此,越来越受临床医生重视。1991年6月至1992年3月,我科使用分叶状腹壁任意超薄皮瓣修复3例多指指背皮肤撕脱伤创面,效果满意,报道如下。

岛状皮瓣修复足部皮肤软组织缺损

目的 报道岛状皮瓣修复足部皮肤软组织缺损的效果 ,探讨皮瓣的选择。方法 采用 6种岛状皮瓣修复足部皮肤软组织缺损 4 2例 ,对比观察了各种皮瓣的修复效果。结果 4 1个皮瓣 1期成活 ,1例小腿内侧筋膜皮瓣远端发生坏死 ,但病人负重行走后 ,有 2例小腿内侧筋膜皮瓣及 1例足背皮瓣用于足跟负重部分修复者发生皮肤破溃及溃疡。结论 足部负重部分的修复应采用血供丰富、耐压、耐磨、厚度适中、可吸收震荡的皮瓣。

穿支皮瓣的临床应用原则专家共识

皮瓣手术的应用在人类史上已有两千多年,其发展主要经历了最初的局部旋转皮瓣和后来的远位带蒂皮瓣、游离皮瓣、带血管蒂皮瓣、穿支皮瓣等阶段。近40余年来由于显微外科技术的诞生解决了小血管吻合难题和显微解剖研究深入认识了皮瓣的血供规律,先后诞生了游离皮瓣和穿支皮瓣。

胫后动脉穿支蒂小腿内后侧链型供血复合组织瓣修复足踝部感染创面

以胫后动脉穿支为蒂的小腿内侧皮瓣广泛应用于临床,可修复小腿下段、足踝部创面,但筋膜组织的代谢率低,筋膜皮瓣的抗感染能力差。肌瓣以及肌皮瓣具有丰富可靠的血供、抗感染能力强、可改善局部血液循环,可转移组织量大、容易塑形、充填缺损等诸多优点。文献报道切取腓肠神经营养血管皮瓣时可携带部分腓肠肌形成肌皮瓣，携带的肌肉可获得足够血供，转移覆盖感染创面获得良好效果。我们在此基础上设计了胫后动脉穿支蒂小腿内后侧链型皮瓣或复合组织瓣，扩大了以往胫后动脉穿支皮瓣的切取范围，并且携带了肌或骨形成复合组织瓣，扩大了临床使用的范围，共使用12例，获得良好临床效果，现报告如下。