肝郁脾虚证腹泻型IBS模型大鼠结肠紧密连接蛋白、AQP3及AQO4的变化

目的研究肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠在模型复制过程中腹泻症状及结肠紧密连接蛋白、水通道蛋白(AQP)3及AQP4的变化。方法采用给予番泻叶联合束缚应激的方法复制D-IBS大鼠模型,并设立单纯灌服番泻叶组及单纯束缚组作为对照,分别于实验前、实验第7、14、21及28天检测各组稀便级及模型大鼠结肠紧密连接蛋白、AQP3及AQP4表达。应用免疫组化法和Western印迹检测结肠紧密连接蛋白、AQP3及AQP4表达。结果与正常组比较,除肝郁1组外,各建模组灌服番泻叶后5 h内稀便级显著升高,结肠紧密连接蛋白、AQP3、AQP4阳性表达及表达量均显著下调(P<0.05,P<0.01);与脾虚3组、肝郁1组比较,肝郁脾虚1组稀便级显著增加,结肠紧密连接蛋白、AQP3、AQP4阳性表达及表达量均显著下降(P<0.05,P<0.01);与脾虚4组、胆郁2组比较,肝郁脾虚2组稀便级显著增加,结肠紧密连接蛋白、AQP3、AQP4阳性表达及表达量均显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论紧密连接蛋白、AQP3、AQP4与肝郁脾虚证D-IBS腹泻密切相关,可能为D-IBS肝郁脾虚证病机的物质基础中一类重要因素,为肝郁因素加重脾虚症状提供实验依据。

戊己丸不同配伍方对炎症后肠易激综合征模型大鼠结肠运动及5-羟色胺含量的影响

目的:评价戊己丸不同配伍方对炎症后肠易激综合征(post-infectious irritable bowelsyndrome,PI-IBS)模型大鼠结肠运动功能的作用,并从5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)角度初步探讨其作用机制.方法:采用乙酸灌肠加束缚应激建立PI-IBS大鼠模型,应用戊己丸不同配伍方进行干预,应用BIOPAC MP150型多导生理记录仪描记大鼠结肠运动曲线,计算结肠运动指数和运动指数变化率,同时利用高效液相法检测血清、结肠、海马、下丘脑和额叶中5-HT的含量及5-HT转化率,甲苯胺蓝染色法计算结肠肥大细胞数目和脱颗粒率.结果:经戊己丸治疗后,中、高剂量组PI-IBS模型大鼠结肠运动指数(1770.10、1504.97、1700.64、1467.22 vs 2112.15)和运动指数变化率(68.10、40.16、59.97、39.33 vs 104.69)均显著下降(P<0.01).结肠组织中5-HT含量显著下降(3493.38、2640.41、2086.08、3255.63、2688.69、2129.13 vs 4168.36),血清中5-HT转化率(3.20、4.60、6.61、2.86、3.40、4.05 vs2.08)明显升高(P<0.05,P<0.01).中、高剂量组中枢边缘系统中5-HT含量(243.16、295.03、250.28、303.61 vs 124.42;303.51、397.30、339.94、353.02 vs 198.58;260.87、302.75、254.65、298.92 vs 166.71)显著升高(P<0.01),5-HT转化率(134.69、98.61、130.57、95.87vs 281.91;209.43、184.55、189.56、186.75vs 262.01;109.36、86.52、115.41、88.47 vs268.36)明显下降(P<0.05,P<0.01).结肠黏膜肥大细胞数目(6.40、5.11、6.48、5.57 vs 10.47)和脱颗粒率(23.81、17.94、23.25、19.19 vs34.10)亦明显下降(P<0.01).结论:戊己丸不同配伍方改善PI-IBS模型大鼠结肠运动功能的作用机制可能是通过改善5-HT含量及肥大细胞的异常状态,从而调节脑-肠轴功能实现的.

健脾化湿颗粒对D-IBS模型大鼠脑中5-HT及5-HTR3,5-HTR4表达的影响

目的:从前额叶皮质、海马及下丘脑中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和5-羟色胺受体3(5-hydroxytryptamine receptor3,5-HTR3),5-羟色胺受体4(5-HTR4)角度探讨健脾化湿颗粒改善腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,D-IBS)模型大鼠结肠运动和内脏敏感性的作用机制.方法:采用番泻叶灌胃结合束缚应激法建立D-IBS大鼠模型,应用健脾化湿颗粒进行干预,采用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠海马中5-HT含量,采用免疫组织化学法检测前额叶皮质、海马及下丘脑中5-HT、5-HTR3、5-HTR4阳性表达,采用逆转录-聚合酶链反应法检测海马中5-H T R3 m R N A和5-H T R4m RNA的表达水平.结果:与正常组相比,模型组海马中5-HT含量(327.30±22.35 vs 265.33±13.60),前额叶皮质、海马、下丘脑中5-HT阳性表达(0.16±0.02 vs 0.08±0.01,0.19±0.02 vs 0.09±0.01,0.17±0.02 vs 0.08±0.01)明显升高(P<0.01);前额叶皮质、海马、下丘脑中5-HTR3阳性表达(0.29±0.02 vs 0.10±0.01,0.23±0.02 vs 0.09±0.01,0.22±0.02 vs 0.09±0.02)及5-HTR4阳性表达(0.25±0.02 vs0.11±0.01,0.28±0.02 vs 0.10±0.02,0.27±0.02 vs 0.11±0.02)明显升高(P<0.01);海马中5-H T R3 m R N A和5-H T R4 m R N A的表达(0.54±0.01 vs 0.17±0.05,0.73±0.08 vs 0.10±0.02)显著升高(P<0.01).与模型组相比,阳性对照组、中、高剂量组海马中5-H T含量(298.92±12.16、286.29±24.43、279.86±20.05 vs 327.30±22.35)显著下降(P<0.05,P<0.01),中、高剂量组前额叶皮质中5-HT表达(0.12±0.01、0.11±0.01 vs 0.16±0.02)显著下降(P<0.01),阳性对照组、中、高剂量组海马、下丘脑中5-H T表达显著下降(P<0.05,P<0.01);各治疗组前额叶皮质、海马、下丘脑中5-H T R3表达及5-H T R4表达下降显著(P<0.05,P<0.01);各治疗组海马中5-H T R3 m R N A表达及5-H T R4 m R N A表达显著降低(P<0.05,P<0.01).结论:健脾化湿颗粒可能通过下调脑中5-HT、5-HTR3、5-HTR4表达来改善D-IBS模型大鼠结肠运动和内脏敏感性.

健脾化湿颗粒对D-IBS模型大鼠脑-肠轴中CRF和CRFR1的影响

目的:从结肠、海马及下丘脑中促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin releasing factor,CRF)和CRF受体1(CRF receptor 1,CRFR1)角度探讨健脾化湿颗粒改善腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,D-IBS)模型大鼠结肠运动和内脏敏感性的作用机制.方法:采用番泻叶灌胃结合束缚应激法建立D-I B S大鼠模型,应用健脾化湿颗粒进行干预,采用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠结肠中CRF含量,采用免疫组织化学法检测结肠中CRFR1及海马、下丘脑中CRF,CRFR1阳性表达,采用RT-PCR法检测结肠、海马中CRF m RNA和CRFR1 m RNA的表达水平.结果:与正常组相比,模型组结肠中CRF含量(67.1±3.8 vs 36.0±3.0),海马、下丘脑中CRF阳性表达(0.23±0.02 vs 0.09±0.01,0.17±0.02 v s 0.09±0.01)明显升高(P<0.01);结肠、海马、下丘脑中C R F R1阳性表达(0.17±0.01 vs 0.03±0.01,0.20±0.02 vs 0.09±0.01,0.19±0.02 vs 0.07±0.01)明显升高(P<0.01);结肠、海马中C R F m RNA和CRFR1 m RNA的表达(结肠:0.89±0.04 vs 0.09±0.01,1.09±0.09 vs 0.21±0.04;海马:0.56±0.01 vs 0.15±0.05,1.26±0.14 vs 0.23±0.06)显著升高(P<0.01).与模型组相比,各治疗组结肠、海马中C R F(51.0±3.4,54.6±4.1,45.1±4.7,43.3±3.9 vs 67.1±3.8;0.18±0.02,0.19±0.02,0.15±0.02,0.11±0.01 vs 0.23±0.02)显著下降(P<0.01),阳性对照组、中、高剂量组下丘脑中CRF(0.15±0.02,0.13±0.01,0.12±0.01 vs 0.17±0.02)下降显著(P<0.05,P<0.0 1);阳性对照组、中、高剂量组结肠、海马、下丘脑中C R F R1表达(结肠:0.10±0.01,0.08±0.01,0.05±0.01 vs 0.17±0.01;海马:0.16±0.01,0.14±0.02,0.13±0.01 vs 0.20±0.02;下丘脑:0.15±0.02,0.13±0.01,0.11±0.01 vs 0.19±0.02)下降显著(P<0.05,P<0.01);结肠中CRF m RNA表达(0.63±0.04,0.76±0.06,0.32±0.06,0.13±0.03 v s 0.89±0.04)及中、高剂量组海马中CRF m RNA表达(0.76±0.11,0.67±0.10 v s 1.09±0.09)显著降低(P<0.01);阳性对照组、中、高剂量组结肠中C R F R1m RNA表达(0.47±0.03,0.40±0.06,0.24±0.06 vs 0.56±0.01)及中、高剂量组海马中CRFR1 m RNA表达(0.62±0.06,0.60±0.07vs 1.26±0.14)显著降低(P<0.05,P<0.01).结论:健脾化湿颗粒可能通过下调结肠、海马及下丘脑中CRF、CRFR1表达来改善D-IBS模型大鼠结肠运动和内脏敏感性.

戊己丸不同配伍方对结肠平滑肌细胞5-HT3,4受体及下游信号传导通路主要元件的影响

目的:观察戊己丸不同配伍方对平滑肌细胞5-羟色胺3,4受体及其下游信号通路的影响。方法:采用Bitar的方法分离培养大鼠结肠平滑肌细胞,α-actin免疫组化鉴定。应用免疫荧光法和钙离子探针检测5-羟色胺3,4受体表达及Ca2+浓度;应用ELISA试剂盒检测cAMP,PKA的浓度。结果:1号方和2号方对大鼠结肠平滑肌细胞5-羟色胺3,4受体的表达及Ca2+浓度均具有抑制作用(P<0.05);可显著下调平滑肌细胞的cAMP和PKA水平(P<0.05);2号方作用效果优于1号方。结论:戊己丸可抑制5-羟色胺3,4受体表达及下调Ca2+,cAMP,PKA水平。

健脾化湿颗粒对IBS模型大鼠小肠运动的影响

目的观察健脾化湿颗粒对脾虚型肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)模型大鼠小肠运动的影响。方法采用束缚应激刺激2周加灌服番泻叶煎剂的方法造成脾虚型肠易激综合征大鼠模型;通过测量小肠碳末推进率和离体肠管的振幅、频率来分析健脾化湿颗粒对脾虚型肠易激综合征模型大鼠小肠运动的影响。结果模型组大鼠小肠运动明显加快,经健脾化湿颗粒治疗后显著减慢(P<0.05)。结论中、高剂量健脾化湿颗粒可显著改善大鼠的腹泻症状,减慢小肠运动,改善IBS症状。

健脾化湿水提液干粉 冰冻液及汤剂的药效学比较

目的:探讨现代制剂工艺中低温提取、冰冻浓缩对中药药效是否有影响。方法:采用灌服番泻叶加束缚应激制造脾虚型肠易激大鼠模型,分别应用健脾化湿水提液干粉、冰冻液及健脾化湿汤进行治疗,观察大鼠番泻叶灌胃后5h的稀便级及小肠碳末推进率的变化。结果:健脾化湿液干粉、健脾化湿汤在改善脾虚型肠易激综合征模型大鼠的稀便级和小肠碳末推进率方面要明显好于健脾化湿冰冻液,但二者之间没有统计学差异。结论:低温提取、冰冻浓缩对健脾化湿水提液药效无明显影响,而长期冰冻保存可使其疗效显著下降。

健脾化湿颗粒对IBS模型大鼠结肠NO和NOS的影响

目的:观察健脾化湿颗粒对肠易激综合征(IBS)模型大鼠结肠NO、NOS的作用。方法:采用束缚应激刺激2周加灌服番泻叶煎剂的方法建立腹泻型IBS大鼠模型;采用硝酸还原酶法测量结肠一氧化氮合酶(NOS)及一氧化氮(NO)的含量。结果:健脾化湿颗粒中、高剂量可显著提高IBS模型大鼠结肠诱生型NOS(iNOS)及NO含量(P<0.01);且效果优于健脾化湿颗粒低剂量和得舒特(P<0.01)。结论:健脾化湿颗粒中、高剂量可通过提高IBS模型大鼠结肠iNOS和NO的含量,达到治疗IBS的目的。

健脾化湿颗粒对大鼠结肠上皮细胞OCLN、AQPs及平滑肌细胞cAMP、AC的影响

目的探究健脾化湿颗粒对大鼠结肠上皮细胞OCLN、AQPs及平滑肌细胞cAMP、AC的影响。方法采用CCK⁃8法检测不同浓度健脾化湿颗粒对上皮细胞的存活率影响;利用Western blot检测健脾化湿颗粒对上皮细胞OCLN、AQP3、AQP4蛋白表达的影响;分别用健脾化湿颗粒及Ach、阿托品干预平滑肌细胞后,利用显微标尺测量平滑肌细胞长度,ELISA法检测平滑肌细胞cAMP、AC的水平。结果健脾化湿颗粒(≤1 mg/mL)处理上皮细胞24 h后,细胞存活率≥90%。与正常组比较,健脾化湿颗粒上调上皮细胞OCLN、AQP3,AQP4蛋白表达,促进结肠平滑肌的舒张,下调结肠平滑肌AC、cAMP的水平(P<0.05,P<0.01)。健脾化湿颗粒可抑制Ach引起的平滑肌细胞收缩,及cAMP、AC水平的上调;与阿托品协同作用促进平滑肌细胞舒张,及cAMP、AC水平的下调(P<0.05,P<0.01)。结论健脾化湿颗粒可能通过调节离体大鼠结肠OCLN、AQP3、AQP4蛋白表达及平滑肌细胞舒缩功能来改善D⁃IBS腹泻症状。

健脾化湿颗粒对IBS模型大鼠血浆胃动素的影响

目的:观察健脾化湿颗粒对脾虚型肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)模型大鼠血浆胃动素(MTL)水平的影响。方法:采用束缚应激刺激2周加灌服番泻叶煎剂的方法建立脾虚型IBS大鼠模型;采用放射免疫法检测血浆MTL水平。结果:健脾化湿颗粒中、高剂量可明显降低IBS模型大鼠血浆MTL水平(P<0.05),且作用优于健脾化湿颗粒低剂量和得舒特(P<0.05)。结论:健脾化湿颗粒中、高剂量可显著降低IBS大鼠血浆MTL水平,改善大鼠的腹泻症状。

肠易激综合征发病机理的研究进展

肠易激综合征（Irritable Bowel Syndrome，IBS）是最常见的消化系统疾病之一，它是包括一组腹痛、腹胀、排便习惯和大便性状异常，持续或间歇发作，而又缺乏明显形态学和生化异常改变的症候群。其特点是肠道的易激惹性。临床上常分为腹泻型、便秘型和腹泻便秘交替型。该病的发病率较高，影响范围广。在西方国家约有20％-30％的人群有此病症状，但就诊者仅为其中的1／4，男女之比约1：2，患者以20—40岁的青壮年居多，给工作、生活造成一定影响。到目前为止，该病仍被认为是一种心身性、功能性疾病，且病因不明。

健脾化湿颗粒对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠5-羟色胺、5-羟色胺3受体的影响

目的探讨健脾化湿颗粒对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠中5-羟色胺(5-HT)和5-羟色胺3受体(5-HT3R)水平的影响。方法选用60只SD雄性大鼠,按体重随机分成六组,分别为正常组,模型组,健脾化湿颗粒低、中、高剂量组,阳性对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠结肠黏膜中5-HT含量,采用免疫组化法检测结肠黏膜下5-HT3R阳性细胞的表达量,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测结肠中5-HT3R mRNA的表达水平。结果与正常组相比,模型组结肠中5-HT水平显著升高(P<0.05),结肠黏膜下层5-HT3R阳性细胞的含量明显升高(P<0.05),结肠中5-HT3R mRNA的表达水平亦显著升高(P<0.05);健脾化湿颗粒可以降低5-HT水平,5-HT3R水平及其mRNA表达量。结论健脾化湿颗粒可能通过降低结肠黏膜5-HT含量,减少结肠5-HT3R的表达量,减弱5-HT3R神经元兴奋性,从而改善内脏痛觉敏感状态,消除肠道反应。

健脾化湿颗粒对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠运动及中枢c-fos的影响

目的:观察健脾化湿颗粒对腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,D-IBS)模型大鼠结肠运动功能的影响,并从中枢c-fos角度探讨其作用机制.方法:采用番泻叶灌胃结合束缚应激法建立D-I B S大鼠模型,应用健脾化湿颗粒进行干预,采用Maclab/4e四导生理记录仪描记大鼠结肠运动曲线,计算结肠运动指数,并用免疫组织化学法检测脊髓腰膨大、前额叶皮质、海马、下丘脑中c-fos的表达,ELISA法检测脊髓腰膨大和海马中c-fos的含量.结果:与正常组相比,D-IBS模型组大鼠结肠运动指数(939.01±91.96 vs 574.78±53.33)明显增加(P<0.01).中枢c-fos的表达(0.25±0.03 v s 0.08±0.01、0.15±0.02 v s 0.06±0.01、0.23±0.02 vs 0.08±0.02、0.16±0.02vs 0.07±0.01)明显升高(P<0.01).c-fos含量(19.68±1.17 v s 11.10±2.59、12.32±1.22vs 5.38±0.88)明显增加(P<0.01).与模型组相比,健脾化湿颗粒中、高剂量组大鼠结肠运动指数(731.91±67.34、695.20±80.58 vs939.01±91.96)明显降低(P<0.01).中枢c-fos的表达(0.14±0.02、0.10±0.01 vs 0.25±0.03;0.11±0.01、0.09±0.02 vs 0.15±0.02;0.16±0.01、0.12±0.01 vs 0.23±0.02;0.12±0.01、0.09±0.01 vs 0.16±0.02)明显降低(P<0.01).c-f o s含量(16.02±1.58、15.62±1.64 vs 19.68±1.17;8.53±2.05、7.28±1.54vs 12.32±1.22)明显降低(P<0.01).结论:健脾化湿颗粒改善D-IBS模型大鼠结肠运动功能的作用机制,可能与其调节中枢c-fos的表达有关.

盆炎平方口服配合中药保留灌肠治疗湿热瘀结型慢性子宫附件炎的临床疗效及作用机理探讨

目的:探讨盆炎平方口服配合中药保留灌肠治疗湿热瘀结型慢性子宫附件炎的临床疗效及作用机理。方法:将120例湿热瘀结型慢性子宫附件炎患者按就诊先后顺序随机分为2组,每组各60例,其中对照组给予黄藤素分散片配合苦参素栓纳肛治疗,治疗组口服盆炎平方配合中药保留灌肠治疗,比较2组临床疗效及治疗前后血液流变学指标变化。结果:治疗组有效率为91.67%,显著高于对照组的76.67%(P<0.05);治疗组治疗后高切全血黏度、低切全血黏度和血浆黏度分别为(2.12±0.21)mPa·s、(7.20±1.72)mPa·s和(1.12±0.13)mPa·s,均显著低于治疗前和对照组,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:盆炎平方口服配合中药保留灌肠治疗湿热瘀结型慢性子宫附件炎疗效显著,可有效改善患者临床症状,具有较好的临床应用价值。

参芪止血胶囊急性和长期毒性实验研究

目的观察参芪止血胶囊（SQHC）的急性毒性和长期毒性反应,为临床安全用药提供参考依据。方法以SQHC最大允许浓度混悬液,50 m l/kg体积给小鼠灌胃,观察急性毒性反应,连续14 d。Wistar大鼠,以SQHC 5.0,2.5和1.25 g/kg连续灌胃给药28 d,分别于给药28 d和停药后第14天,进行血液学、血液生化指标、脏器系数及病理组织学检查。结果 SQHC单次给药的最大耐受量〉25 g/kg（相当临床用量的416.7倍）;长期用药第2~4周,5.0 g/kg和2.5 g/kg剂量组大鼠体质量低于空白对照组（P〈0.05）;用药28 d结束时SQHC各剂量组Hb含量高于对照组,与对照组比较差异显著（P〈0.05）;SQHC各剂量组子宫和卵巢系数明显高于对照组（P〈0.05）,其它血液学、肝功能、肾功能和脏器系数与对照组比较差异均无明显意义（P〉0.05）;主要脏器组织病理检查未见与药物毒性相关的形态学改变;无动物死亡。停药第14天后,各组动物的血液学指标、肝功能、肾功能、脏器系数等均正常,与对照组比较差异无显著意义（P〉0.05）。结论大鼠口服给参芪止血胶囊Hb含量、子宫和卵巢系数高于对照组,机制有待探讨。其它各项检测指标均无异常改变。无延迟毒性反应。

脑-肠轴及其在肠易激综合征发病机制中的作用

肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）是一种常见的功能性肠病，其发病机制尚未完全清楚，可能与肠动力改变、内脏感知异常、脑一肠轴功能失调、情志失调等因素有关。IBS是一种世界范围内的多发病，它既影响患者的生活质量和工作效率，又消耗大量的公共卫生资源。

5-HT信号通路在肠易激综合征发病机制中的研究进展

肠易激综合征（IBS）是临床上常见的消化道疾病之一。近年来,大量有关5-HT信号通路在IBS中的研究报道不断涌现,主要包括5-HT、EC、TPH1、SERT等,从这些相关研究中可以得出5-HT信号系统与IBS的发病机制密切相关。IBS是以腹痛、腹部不适为主要症状,并伴有排便习惯改变及大便性状异常的功能性胃肠道疾病。相关研究认为,肠易激综合征的病理生理学基础主要涉及内脏感觉和胃肠动力学异常[1]。

满药赤雹根不同提取物急性毒性实验研究

目的观察赤雹根水提取物(WETR)和乙醇提取物(EETR)灌胃给药对小鼠的急性毒性,为赤雹根的临床安全用药和长期毒性研究提供实验依据。方法昆明种小鼠100只,随机分为10组,每组10只,分别接受不同剂量的赤雹根水提取物或乙醇提取物。观察给药后小鼠中毒反应及死亡情况,连续观察14d。结果赤雹根水提取物的LD50为16.80(生药)g/kg,95%可信限为15.91～17.68g/kg;赤雹根乙醇提取物LD50为12.72(生药)g/kg,95%可信性限为11.42～14.15g/kg。结论赤雹根水提取物和乙醇提取物对小鼠灌胃给药的LD50分别相当成人临床用药剂量(15g/人/日的67倍和51倍,属于小毒药材。

热河满族变迁探析

自夏商周开始,满族先民就生活在热河地区,到清代,热河满族文化的发展达到顶峰,经过时代的变迁,虽然满族文化与汉文化有了广泛的融合,但在热河地区,尤其是满族聚集区,满族文化底蕴深厚,满族特色依然浓郁。通过对热河满族文化变迁的探索研究,对于抢救和保存满族文化,继承民族文化的精髓意义重大,有利于弘扬和发展民族传统文化,坚定文化自信,推动民族文化的发展。