三七总皂苷对Alzheimer’s病大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用

目的:观察三七总皂苷(PNS)对老年性痴呆 (AD)大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用。方法:以d 半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸 (IBA)损毁双侧大脑Meynert基底核建立AD大鼠动物模型,利用免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰基转移酶 (ChAT)免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变。结果:PNS能明显减轻由d 半乳糖损害和鹅膏蕈氨酸损毁导致的大脑胆碱能神经元数量减少和ChAT水平降低。结论:PNS对AD大鼠模型大脑胆碱能神经的病理损害具有保护作用。

余甘子叶化学成分没食子酸对人肝癌BEL-7404细胞株凋亡的影响

目的:探讨余甘子叶化学成分没食子酸对人肝癌细胞株BEL-7404凋亡的影响。方法:采用MTT法测定余甘子叶化学成分没食子酸在体外对BEL-7404细胞增殖的影响;普通光学显微镜、倒置相差显微镜和荧光显微镜观察余甘子叶化学成分没食子酸作用BEL-7404细胞后的形态学变化;AnnexinV/PI双标记法流式细胞术检测余甘子叶化学成分没食子酸诱导BEL-7404细胞早期细胞凋亡的情况;Tunel法检测BEL-7404细胞的晚期凋亡情况及其凋亡率。结果:MTT法和显微镜观察显示余甘子叶化学成分没食子酸能不同程度抑制BEL-7404细胞的增殖,可致细胞形态学改变,出现典型的凋亡特征;AnnexinV/PI双标记法检测显示早期凋亡细胞随作用时间的延长而增加,Tunel法检测晚期凋亡细胞,其凋亡率亦随作用时间的延长而增大。结论:余甘子叶化学成分没食子酸能抑制BEL-7404细胞的增殖并诱导其产生凋亡,其对BEL-7404细胞的凋亡影响呈时间依赖性。

排钱草总生物碱对免疫性肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF-β_1表达的影响

目的 :观察排钱草总生物碱对免疫性肝纤维化大鼠肝脏胶原沉积和转化生长因子 β1(TGF β1)表达的影响 ,研究其对肝纤维化形成的抑制作用 ,并探讨可能的作用机制。方法 :设立模型对照组、药物对照组、排钱草总生物碱高、中、低剂量组和正常对照组 ,以腹腔注射猪血清方法诱导大鼠肝纤维化动物模型。排钱草总生物碱高、中、低剂量组大鼠在注射猪血清的同时分别灌服排钱草总生物碱 3 0mg/kg ,2 0mg/kg ,10mg/kg ,1次 /d ,共 8周。大鼠肝脏HE染色 ,观察各组大鼠肝组织的炎性坏死与胶原纤维沉积变化 ;免疫组化观察大鼠肝纤维化形成过程中腓钱草总生物碱对肝脏表达Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白及TGF β1的影响。结果 :与正常对照组比较 ,模型组大鼠肝脏出现典型的肝纤维化表现 ,肝脏胶原纤维间隔广泛形成 ,肝小叶与肝窦内胶原增生沉积明显 ,Ⅰ ,Ⅲ ,Ⅳ型胶原 (1. 2 8± 2 .5 9vs13 .82± 6. 5 5 ,1 .0 0± 1. 2 2vs 14. 69± 7 .16,1 0 3± 1 46vs 12. 44± 6/ 89,P值均 <0 . 0 0 1)及TGF β1表达明显增多。高、中、低剂量排钱草总生物碱均可以明显减轻大鼠肝脏内胶原纤维增生沉积 (P <0 . 0 5 ) ,抑制肝脏Ⅰ ,Ⅲ ,Ⅳ型胶原蛋白 (P值均 <0 0 5 )及TGF β1的合成表达。结论

手法对兔膝骨性关节炎软骨细胞DNA氧化性损伤的防治作用

为研究手法对膝关节骨性关节炎治疗的作用机制,采用新西兰兔进行动物造模而形成膝关节骨性关节炎模型,随机将实验动物分为手法组、施沛特组和对照组并进行实验。8周后取动物右膝关节软骨进行DNA提取,并采用LCMS2010型液-质联用仪检测标本中8-羟基脱氧鸟苷含量。结果显示,施沛特组含量最少,手法组次之,对照组最多。提示手法治疗可能对减轻氧自由基对软骨细胞DNA的损伤有一定的作用。

三七总皂苷对老年性痴呆动物模型快速老化小鼠大脑Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)表达的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对快速老化小鼠SAMP8大脑Aβ1-40、Aβ1-42表达的影响。方法:采用免疫组织化学方法,随机选取快速老化小鼠大脑顶叶皮层、海马周围白质连续五个视野在高倍显微镜下观察,并计数五个视野下Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性细胞的平均个数。结果:PNS能明显减少快速老化小鼠大脑Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性神经元的数量。结论:PNS对SAMP8小鼠大脑Aβ1-40及Aβ1-42的表达有明显的抑制作用。

三七总皂苷对阿尔茨海默病大鼠脑胆碱能神经的保护作用(英文)

背景:现代医学目前对阿尔茨海默病尚无有效的治疗方法,三七总皂苷治疗阿尔茨海默病已引起重视和关注,但其作用机制仍不十分清楚。目的:观察具有化瘀止血、活血定痛功效的三七总皂苷对阿尔茨海默病动物模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用。设计:完全随机分组设计,对照试验。单位:广西中医学院神经科学研究所。材料:实验于2003-06/2005-04在广西中医学院中药药效研究实验室完成,选用清洁级健康Wistar大鼠90只,雌雄各半。其中15月龄老年鼠75只,3月龄青年鼠15只。方法:实验于2003-06/2005-04在广西中医学院中药药效研究实验室(广西重点实验室)完成。①选用清洁级健康Wistar大鼠90只,雌雄各半。其中15月龄老年鼠75只,3月龄青年鼠15只。设3月龄15只为青年对照组。于15月龄75只中随机抽取15只作为老年对照组。对其余60只大鼠进行造模。以D-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸损毁双侧大脑Meynert基底核建立阿尔茨海默病大鼠模型。青年对照组和老年对照组均在相同条件下以生理盐水作平行对照。②2周后将存活的造模大鼠随机分为4组:模型组,三七总皂苷高、低剂量组和石杉碱甲组,每组12只。三七总皂苷高、低剂量组分别按200和100mg/kg灌胃三七总皂苷(云南玉溪维和制药厂生产),1次/d;石杉碱甲组按0.3mg/kg灌胃给药,1次/d,连续4周;模型组、青年对照组和老年对照组以等体积的生理盐水灌胃,连续4周。③给药结束后行大脑组织病理切片,利用免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰基转移酶免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变。应用IBAS图像分析系统对胆碱乙酰转移酶免疫阳性神经元进行图像分析处理,测定胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均截面积和平均吸光度(A值);用显微镜测微尺测定计算胆碱乙酰转移酶阳性神经元数目。④采用单因素方差分析进行计量资料间差异比较。主要观察指标:三七总皂苷对阿尔茨海默病大脑胆碱能神经元分布和胆碱乙酰基转移酶的影响。结果:老年大鼠75只和青年大鼠15只均进入结果分析。①青年对照组胆碱乙酰转移酶免疫阳性神经元最多,免疫阳性物质染色最深;三七总皂苷高剂量组免疫阳性神经元明显多于石杉碱甲组和模型组;模型组免疫阳性神经元较其他各组的神经元小,且数目明显减少,胞体的轴突及树突变短。②基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞数:模型组明显少于其他各组(P<0.05),三七总皂苷低剂量组、石杉碱甲组、模型组明显少于老年对照组(P<0.05),石杉碱甲组、模型组明显少于三七总皂苷高、低剂量组(P<0.05),青年对照组明显高于其他各组(P<0.05)。基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均A值:变化与各组免疫阳性细胞数变化基本相同。基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均截面积:三七总皂苷低剂量组和模型组明显小于青年对照组(P<0.05),其他各组间差异不明显(P>0.05)。结论:三七总皂苷对老年性痴呆大鼠动物模型大脑胆碱能神经元具有较强的保护作用,通过改善和修复受损神经元而提高细胞存活的数量和质量、提高胆碱乙酰转移酶的含量和活性,从而保护和改善中枢胆碱能系统的功能,发挥抗老化、抗痴呆的作用。

三七总皂苷对快速老化小鼠SAMP8大脑β-淀粉样蛋白前体蛋白表达的影响

目的探讨三七总皂苷(PNS)对快速老化小鼠SAMP8β-淀粉样蛋白前体蛋白(APP)表达的影响。方法采用免疫组织化学方法,在高倍显微镜下随机选取小鼠大脑顶叶皮层和海马周围白质连续五个视野,并计数五个视野APP免疫阳性细胞平均个数。结果PNS能明显减少快速老化小鼠大脑APP阳性细胞数量。结论PNS对SAMP8 APP的表达有明显抑制作用。

艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力和大脑皮质、海马区c-fos蛋白表达的影响

目的观察艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力的影响与学习记忆相关脑区c-fos蛋白表达的关系。方法健康3月龄昆明雄性小鼠体质量(30±2)g,60只,水迷宫检测后按随机区组设计分为:生理盐水组,造模组,艾灸1、2组,尼莫地平组等5组,每组各12只。造模组,艾灸1,2组,尼莫地平组连续42 d颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;生理盐水组连续42 d颈背部皮下注射等量生理盐水,12 d后艾灸1、2组,分别选取小鼠"足三里、悬钟","关元、百会"行艾柱灸治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日1次,共15次。采用水迷宫检测学习记忆、免疫组化方法观察各组小鼠大脑皮层、海马CA3区c-fos蛋白的表达。结果模型组潜伏期较生理盐水组、艾灸1、2组、尼莫地平组延长(P<0.01或P<0.05),模型组原象比、垮台次数较其他各组缩短、降低(P<0.01或P<0.05),模型组小鼠大脑皮质、海马CA3区c-fos蛋白表达的神经元密度较生理盐水组、艾炷灸组、尼莫地平灌胃治疗组降低(P<0.01)。结论艾炷灸足三里、悬钟,关元、百会穴位处方可能通过提高D-半乳糖衰老小鼠脑组织大脑皮层、海马CA3区c-fos蛋白的表达改善学习记忆能力。

艾灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆、大脑组织NOS/NO-cGMP信号系统及c-fosmRNA的影响

目的探讨艾灸疗法改善学习记忆的作用机制。方法将72只雄性小鼠随机分为生理组、模型组、艾灸1组、艾灸2组、电针组和尼莫地平组,每组12只。模型组及艾灸组连续42 d于小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖,生理组注射等量生理盐水。造模第13天开始干预治疗,艾灸1组灸足三里、悬钟穴,艾灸2组灸关元、百会穴,隔天治疗1次,共治疗15次。采用水迷宫检测学习记忆,检测脑组织匀浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量,原位杂交检测各组小鼠大脑皮层、海马CA3区c-fosmRNA的表达。结果模型组"潜伏期"较生理组、艾灸1组、艾灸2组、尼莫地平组延长(P<0.01,P<0.05),模型组"原象比"和"垮台次数"较其他各组缩短、降低(P<0.01,P<0.05)。模型组脑组织NO含量、总一氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力较其他5组均显著升高(均P<0.01),模型组脑组织cGMP含量较其他5组均显著降低(均P<0.01)。模型组小鼠大脑皮质、海马CA3区c-fosmRNA表达的神经元密度较其他5组均降低(P<0.01,P<0.05)。结论艾灸疗法可能通过提高cNOS的活力,生成生理活性的NO,增加第二信使cGMP的含量,即通过NO-cGMP信号转导系统,促进大脑皮质、海马CA3区神经元细胞c-fosmRNA表达,维持长时程增强(LTP),改善学习记忆能力。

沿皮浅刺内关公孙穴对脑梗塞大鼠Bcl-2 Bax的影响

目的:研究浅刺针法对脑缺血大鼠细胞凋亡调控基因Bcl-2(B cell lymphoma/leukemia-2)、Bax(Bcl-2Associated X protein)的影响。方法:将240只Wistar大鼠随机分造模组和空白组,采用血栓栓塞法建立脑梗塞大鼠模型,后将造模成功的180只大鼠随机将为浅刺针法组(Ⅰ组)、常规针刺组(Ⅱ组)、模型对照组(Ⅲ组),空白组为正常对照组(Ⅳ组)。通过神经体征评分、脑组织Bcl-2和Bax蛋白的表达等几个指标,观察经过治疗后的Ⅰ、Ⅱ组大鼠和相应时间未经治疗的III、IV组大鼠的大脑细胞凋亡情况。结果:3个时间点的浅刺针法组大鼠脑组织Bax蛋白表达明显低于模型组和常规组针刺组,而Bcl-2则明显高于模型组和常规组针刺组(P<0.01),说明浅刺针法可有效改善脑梗塞大鼠的神经缺损体征。结论:浅刺内关、公孙穴位通过下调Bax蛋白表达和上调Bcl-2蛋白的表达,抑制细胞凋亡,发挥神经保护作用。并在分子水平证实经络在体表有其物质基础,浅刺可取得有效的刺激作用,使浅部组织的经络特异性能充分显示出来。

艾炷灸、电针对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力和脑组织c-fos mRNA的影响

目的观察艾炷灸、电针对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力及相关脑区c-fos mRNA的影响。方法健康3月龄昆明雄性小鼠体重(30±2)g72只,水迷宫检测后按随机区组设计分为:生理组、造模组、艾灸1、2组、电针组、尼莫地平组组,每组12只。造模组、艾灸12、组、电针组、尼莫地平组,连续42 d颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;生理盐水组连续42 d颈背部皮下注射等量生理盐水1,2 d后艾灸1、2组,分别选取"足三里、悬钟","关元、百会"行艾柱灸治疗,电针组选取"足三里、悬钟",尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日/次,共15次。采用水迷宫检测学习记忆、原位杂交检测各组小鼠大脑皮层、海马CA3区c-fos mRNA的表达。结果模型组潜伏期较生理组、艾灸1、2组、尼莫地平组延长(P<0.01或P<0.05),模型组原象比、垮台次数较其他各组缩短、降低(P<0.01或P<0.05),模型组小鼠大脑皮质、海马CA3区c-fos mRNA表达的神经元密度较生理组、艾炷灸、尼莫地平灌胃治疗组降低(P<0.01)。结论艾炷灸"足三里、悬钟","关元、百会"穴位处方可能通过提高D-半乳糖衰老小鼠脑组织大脑皮层、海马CA3区c-fosmRNA的表达改善学习记忆能力。

艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠大脑组织形态和超微结构的影响

目的观察艾炷灸对脑组织形态和超微结构的影响。方法将健康3月龄昆明雄性小鼠按随机区组设计分为:造模组、生理组、艾灸1组、艾灸2组、电针组、尼莫地平组6组,每组各12只。另设自然衰老组(16月龄)昆明雄性小鼠12只。造模组、艾灸1,2组、电针组、尼莫地平组,连续42 d颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;生理盐水组连续42 d颈背部皮下注射等量生理盐水,12 d后艾灸1,2组,分别选取小鼠"足三里、悬钟","关元、百会"行艾柱灸治疗,电针组取"足三里、悬钟"治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日1次,共15次。采用光镜观察脑组织形态学变化和神经元密度,电镜下观察脑组织超微结构。结果①生理组大脑皮层、海马CA3区细胞结构正常。模型组、自然衰老组可见皮层、海马CA3区变薄,大部分神经元变性,胞核与胞浆界限模糊,核固缩,核仁消失。艾灸1,2组、电针组和尼莫地平组仍有不同程度的神经细胞变性,但变性神经细胞数量显著减少。②各组小鼠脑皮质及海马CA3区神经元密度差异有显著性意义(P<0.01),模型组、自然衰老组与生理组、艾灸1,2组、电针组、尼莫地平组神经元密度比较差异有显著性意义(P<0.01),模型组、自然衰老组神经元细胞密度下降。③大脑皮质超微结构,生理组神经细胞结构清晰,胞浆较宽,细胞器丰富,核仁清楚。模型组和自衰组神经元细胞变性,凋亡细胞器减少。其他各治疗组超微结构损伤较模型组和自衰组减轻。结论艾炷灸"足三里、悬钟","关元、百会"可减轻D-半乳糖造成的氧化损伤,保护脑组织形态及其神经元细胞超微结构。

HER2基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨HER2基因表达、扩增与胃癌生物学行为的关系。方法应用FISH技术,检测20例胃癌标本中HER2扩增情况,应用IHC技术检测胃癌组织中HER2表达情况。结果应用FISH技术检测胃癌组织中HER2基因扩增率为35%,IHC技术检测胃癌组织中HER2蛋白阳性表达率为30%;HER2基因扩增及蛋白阳性表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及病理分期有关(P<0.05)。结论 HER2基因表达与胃癌浸润和转移有关,可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要指标。

七方胃痛颗粒对PU患者T淋巴细胞亚群与TNF-α的影响

目的:评价七方胃痛颗粒对消化性溃疡(PU)患者T淋巴细胞亚群分布与血清TNF-α水平的影响。方法:PU伴Hp阳性患者共80例纳入研究,分为治疗组与对照1组,各40例,并取20例健康成人做对比。治疗组、对照1组共80例均以奥美拉唑肠溶片、阿莫西林胶囊、甲硝唑片3联疗法根除Hp,治疗组加用七方胃痛颗粒,疗程6周。治疗前后行电子胃镜检查,并检测T淋巴细胞亚群分布与血清TNF-α水平。结果:疗程结束后,治疗组、对照1组两组总有效率相似,治疗组Hp根除率优于对照1组(P<0.05)。治疗前治疗组、对照1组的CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及TNF-α水平均明显异常,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。疗程结束后,治疗组CD4+及CD4+/CD8+比值水平明显提高,CD8+与TNF-α水平明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:七方胃痛颗粒能有效的调节PU患者T淋巴细胞亚群分布以及TNF-α的表达,其防治PU的作用机制可能与调节免疫功能有关。

蝙蝠草和铺地蝙蝠草的显微鉴别

目的对豆科植物蝙蝠草和铺地蝙蝠草进行显微鉴别比较研究,为鉴别和进一步开发利用这两种药用植物提供鉴别依据。方法采用传统的方法对药材性状进行鉴定;采用石蜡切片法对根、茎、叶进行切片;采用常规的显微技术观察组织构造和显微特征;采用生物显微摄影技术真实还原细胞的显微结构特征,并附组织结构及粉末彩图。结果蝙蝠草和铺地蝙蝠草根横切面的皮层、韧皮部和木质部均密布大量纤维;蝙蝠草和铺地蝙蝠草茎横切面韧皮部外侧均具有纤维束,木质部细胞壁均较厚;蝙蝠草和铺地蝙蝠草叶横切面的中脉维管束均呈半月形,韧皮部外侧均具有厚壁细胞,下表皮细胞均具有乳突状小突起;蝙蝠草与铺地蝙蝠草的粉末均具有晶鞘纤维和草酸钙方晶和针晶,均具有具缘纹孔导管和螺纹导管。结论以上显微特征可作为蝙蝠草和铺地蝙蝠草的主要鉴别依据。

独脚金的显微结构鉴别

目的:为鉴别独脚金及制定完善的质量标准提供参考依据。方法:对独脚金进行显微鉴别。结果:独脚金根部次生构造不发达,最外一层为表皮细胞;茎的韧皮部外侧有纤维束,木质部呈三角形;等面叶;粉末中可见类椭圆形、黄棕色、表面有网状纹理的种子,腺毛、非腺毛易见。结论:以上显微特征对独脚金有鉴别意义。

七方胃痛颗粒对消化性溃疡胃黏膜抗炎及抑制Hp感染的研究

目的:客观评价七方胃痛颗粒对消化性溃疡患者胃黏膜抗炎及抑制Hp感染的作用。方法:共80例伴Hp感染消化性溃疡患者纳入研究,分为治疗组与对照组各40例,并取20例健康成人做对比。两组均以奥美拉唑肠溶片、阿莫西林胶囊、甲硝唑片3联疗法根除Hp,治疗组同时给予七方胃痛颗粒(党参、白术、黄芪、苓、白芍、木香等)疗程6周。治疗前后进行电子胃镜检查,并取溃疡灶周围粘膜组织进行病理学检查,分析粘膜炎症程度;治疗前后检测Hp。结果:疗程结束后,治疗组胃黏膜炎症程度显著减轻,与治疗前对比,P<0.01;与对照组比较,P<0.05。治疗组Hp根除率为85%,而对照组为62.5%,治疗组优于对照组,P<0.05。结论:七方胃痛颗粒能有效清除胃粘膜炎症,抑杀Hp,有助于溃疡愈合。

清酒缸的生药学研究

目的为鉴别和开发利用清酒缸提供科学依据。方法对清酒缸进行性状鉴别、显微鉴别。结果清酒缸的显微特征为:根韧皮部有纤维束成群散在;茎韧皮部可见维管束断续排列成环;叶的主脉有外韧型维管束,呈凹槽形。结论上述特征可作为清酒缸鉴定的依据。