丙丁酚抑制氧化型低密度脂蛋白诱导系膜细胞转化生长因子-β_1表达

目的 观察丙丁酚对ox- LDL诱导系膜细胞AP -1活性和TGF -β1 表达的作用 ,探讨抗氧化剂治疗脂质肾损伤的分子机制。方法 大鼠系膜细胞随机分为正常细胞组、ox- LDL处理组和ox- LDL +丙丁酚处理组。运用凝胶迁移率实验检测AP-1活性变化 ,Western杂交检测c- Jun、JNK/SAPK磷酸化及TGF- β1 蛋白表达水平的改变。运用Northern杂交检测TGF- β1- mRNA表达。结果 丙丁酚 5 0 μmol/L预处理系膜细胞 2 0h ,显著降低ox LDL诱导系膜细胞AP 1活性。丙丁酚浓度为 5 0、1 0 0、2 0 0 μmol/L时 ,均显著抑制ox- LDL诱导JNK ,/SAPK磷酸化 ;且ox LDL +丙丁酚处理组的c Jun蛋白表达分别为ox- LDL处理组的 6 0 %、5 1 %和 4 6 %。Northern杂交显示 :ox LDL为 1 0 μg/mL时并不激活TGF- β1 mRNA表达 (P >0 .0 5 ) ;而当ox-LDL浓度增至 5 0、1 0 0 μg/mL时 ,TGF -β1 mRNA表达分别增加 1 .8和 1 .9倍。Western杂交显示ox -LDL呈剂量依赖方式增加TGF β1 蛋白质表达。加入丙丁酚后显著降低ox LDL诱导系膜细胞的TGF -β1- mRNA和蛋白质表达 (P <0 .0 5 )。结论 丙丁酚可能通过抑制JNK1 /SAPK磷酸化和AP 活性下调ox- LDL诱导系膜细胞TGF- β1 表达。

家蝇血淋巴的提取及抗菌物质的诱导

本文报道了大肠杆菌注射和超声波处理家蝇(Musca domestica)后对家蝇抗菌物质的诱导效果,抗菌物质的活性,抗菌的专一性,并研究了家蝇血淋巴的提取方法。结果表明,通过超声波法和注射法均可诱导家蝇产生抗菌物质,其活力高峰出现在诱导后60小时。诱导后48小时的血淋巴稀释100倍,对大肠杆菌的溶菌活力达0.115单位,其抗菌物质对大肠秆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphlococcus nureus)、大白菜软腐病菌(Erwiniacarotovora)、黑腐病黄色单胞菌(Xanthomonas campestris)苏云金杆菌(Bacillus thuringie-nsis)等均有抑菌作用,而对真菌白僵菌(Beauveria bassiana)未发现抑菌作用。对幼虫的诱导效果好于成虫。血淋巴的提取方法由以往的毛细管吸取法改为离心的方法使产量提高2倍,工作效率提高50倍。

家蝇幼虫抗菌物质组成及其理化性质

用抑菌圈、酸碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)等方法,对家蝇幼虫免疫血淋巴抗菌物质组成及其理化特性进行了研究。结果表明,家蝇抗菌物质是蛋白质,呈碱性和近中性,由5种成分组成。家蝇抗菌物质有较稳定的理化特性。如对热,对较高浓度盐溶液,较极端的pH溶液,室温放置6h及冻融12次等处理均有较高的稳定性。

用ELISA和Dot-ELISA方法检测植物病原的比较研究

比较了ELISA和Dot-ELISA方法检测番茄巨芽类菌原体(Tomato Big Bud Mycoplatma-Like Organism,TBB-MLO)、番茄斑萎病毒(Tomato Spotted Wilt Virus,TSWV)和青枯假单胞菌(Pseudomonas solanacearum)的差异,结果表明,两种方法对番茄斑萎病毒无明显差异,对番茄巨芽类菌原体,用Dot-ELISA比用ELISA的检测灵敏度高50—100倍,对青桔假单胞菌,用Dot-ELISA比用ELISA检泓抗原的灵敏度高20倍,而检测抗体的灵敏度高100倍。

小鼠杂交瘤细胞系的建立及抗兔IgG单克隆抗体的应用

经三次免疫一次细胞融合,得到分泌抗兔 IgG 的杂交瘤细胞克隆27个。细胞融合率100%,阳性孔率4%。经筛选和克隆化培养建立了杂交瘤细胞系3C8E4和6A3H6,其免疫球蛋白分别为 IgG2a 和IgG3。3C8E4腹水抗体滴度超过1:10240000 3C8E4除和兔 IgG 有反应外,还和人与马 IgG 有反应;6A3H6只和兔 IgG 有反应,与其它七种动物和人 IgG 无交叉反应。经用过碘酸盐法将3C8E4 MAb 和辣根过氧化物酶标记,制得酶标抗体,当使用浓度为1:10000时,其OD>2.0。用该酶标记抗体 ELISA 法检测植物病毒 PVX、PVY、TEV 和TuMV 效果良好。

a-生育酚抑制高糖诱导大鼠系膜细胞AP-1活性及TGFB_(1)表达

目的 研究α 生育酚对高糖诱导肾小球系膜细胞转录激活蛋白 1(AP 1)和转化生长因子 β1(TGF β1)的影响 ,探讨抗氧化剂治疗糖尿病肾病的机制。方法 采用凝胶迁移率实验 (Gelshiftassay)和超迁移率实验(Gelsupershiftassay)检测不同浓度及不同时间下葡萄糖对系膜细胞AP 1活性的影响、AP 1二聚体中Jun和Fos成分的变化、Western杂交检测TGF β1蛋白表达水平以及抗氧化剂α 生育酚对上述指标的影响。结果 高糖呈浓度和时间依赖性激活系膜细胞AP 1活性 ,AP 1二聚体中JunD、Fos参与这一作用。同时 ,葡萄糖增加系膜细胞TGF β1蛋白表达。加入α 生育酚预处理系膜细胞后 ,葡萄糖诱导的AP 1活性和TGF β1表达水平降低。结论 α 生育酚抑制高糖诱导的系膜细胞AP 1活性及TGF

纠正酸中毒对尿毒症患者骨骼肌蛋白质分解率的影响

目的:测定尿毒症患者尿3-MEH/Cr的变化及纠正代谢性酸中毒对其影响。方法:采用氨基酸自动分析仪测定尿毒症患者尿中3-MEH排泄量,以尿3-MEH/Cr比值作为骨骼肌蛋白质分解率指标。结果:在代谢性酸中毒情况下,给予低蛋白饮食,3-MEH/Cr比值升高。纠正代谢性酸中毒后3-MEH/Cr比值明显下降(P<0.01)。结论:尿3-MEH/Cr可作为蛋白质营养状况的指标,纠正代谢性酸中毒并限制蛋白质饮食可显著降低尿毒症患者骨骼肌蛋白质分解率。

昆虫抗菌物质的诱导和应用

昆虫抗菌物质的诱导和应用王远程，孙东旭（中国农业科学院生物技术研究中心，北京１０００８１）随着抗生素的广泛及长期使用，许多细菌都产生了耐药性。全新的抗生素研究一直是很多微生物学家、医药学家和植物保护专家的主攻目标。很早以前就注意到了昆虫有很强的抗病能...

论企业党建工作的“特质”打造

本文论述了三个方面的内容：一是突出“特质”打造，在企业党建工作围绕中心、深度融入上定准位。二是彰显企业特色，在企业党建工作争先创优、强筋壮骨上求作为。三是突显企业活力，在企业党建工作资源整合、能力再造上寻创新。

香椿组织培养与快速繁殖的研究

香椿组织培养与快速繁殖的研究王春林，杨群英，薛爱红，徐欣，王远程（中国农业科学院生物技术研究中心，北京１０００８１）关键词香椿，组织培养，快速繁殖，多孔板培养ＴｉｓｓｕｅＣｕｌｔｕｒｅａｎｄＭｉｃｒｏｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎｅｓｅｔｏｏｎａ...

丙丁酚对系膜细胞转录激活蛋白-1活性的影响

目的 :研究氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)诱导肾小球系膜细胞转录激活蛋白 1 (AP 1 )活性的改变及抗氧化剂丙丁酚对其影响 ,进一步探讨丙丁酚抗氧化作用的分子机制。 方法 :利用凝胶迁移率实验 (Gelshiftas say)和超迁移率实验 (Gelsupershiftassay)检测不同浓度及不同时相ox LDL对大鼠肾小球系膜细胞AP 1活性的影响、AP 1二聚体中c Jun和c Fos成分的变化及抗氧化剂丙丁酚对其影响。 结果 :ox LDL(1 0 0mg/L)作用系膜细胞后 6h ,核蛋白提取物中AP 1活性开始升高 ,36h达到最大值 ,48h与 36h相比较无明显变化 ;ox LDL作用 2 4h时 ,随着ox LDL浓度的增加 ,AP 1活性逐渐增加 ;超迁移率实验显示ox LDL(1 0 0mg/L)主要激活AP 1二聚体成分中c Jun ,而Fos蛋白未激活 ;丙丁酚 (5 0nmol/L)对一般培养状态下系膜细胞AP 1活性无明显抑制作用 ,但能明显抑制ox LDL(1 0 0mg/L)诱导的系膜细胞AP 1活性。 结论 :丙丁酚降低ox LDL诱导的系膜细胞AP

应用单克隆抗体免疫学技术检测种姜姜瘟病的初步研究

姜瘟病是由青枯病菌(PsedomonasSolanacearum)引起的一种细菌病害,俗称姜腐烂病。70年代以来,我国山东、浙江、福建和四川等生姜集产区均遭到其不同程度的危害。病地一般减产1至2成。

肾小球系膜细胞转化生长因子-β_1基因启动子中氧化低密度脂蛋白应答元件的研究

目的 :了解在氧化低密度脂蛋白 (Ox LDL)刺激下 ,转化生长因子 β1(TGF β1)基因启动子中顺式作用元件的应答情况。研究在大鼠肾系膜细胞中 ,Ox LDL对TGF β1基因启动子转录活性的影响作用。 方法 :用聚合酶链反应 (PCR)、酶切和亚克隆的方法 ,构建出 5个TGF β1启动子缺失体—虫荧光素酶 (luciferase)报告基因 ,利用其瞬时转染系膜细胞并检测luciferase相对活性。 结果 :在Ox LDL(10 0mg/L)刺激下 ,luciferase的活性 12h即出现 ,并于 36h达到平台期。对Ox LDL刺激的应答 ,TGF β1启动子 15 5 0到 845之间可能存在着增强子 , 6 2 9到 4 2 2之间则可能有抑制子。计算机软件分析表明 ,前者内有一转录激活蛋白 1(AP 1)精确识别位点。 结论 :在大鼠肾系膜细胞TGF β1基因启动子中 ,AP 1结合序列 (TGAGTCA)可能是应答Ox LDL的顺式作用元件。Ox LDL上调TGF β1的表达至少部分是通过AP 1蛋白来介导的 ,且Ox LDL可能通过蛋白激酶C(PKC)信号通路激活AP 1从而正调控TGF β1基因的转录过程。

草鱼生长激素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及鉴定

用经草鱼生长激素(gcGH)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/O-Ag14)融合,经3次克隆化培养和ELISA筛选,得到7株阳性杂交瘤细胞株,其中2株为强阳性。交叉试验表明,这些杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体(McAb)同大鳞大马哈鱼生长激素(sGH)、大鳞大马哈鱼促性腺激素(sGTH)及牛生长激素(bGH)均不起反应。小鼠腹水McAbs滴度高达1:1280000。受体-gcGH-McAb夹心试验表明,McAb确与有活性的gcGH有特异反应。用间接ELISA方法可检测到浓度为0.125#g/ml的gcGH。

慢性肾小球肾炎患者血清抗α_1受体和血管紧张素Ⅱ_1受体自身抗体与肾损害程度的分析

目的探讨慢性肾小球肾炎（chronic glomerulonephritis，CGN）患者血清中抗血管紧张素Ⅱ1受体自身抗体（AT1受体抗体）和抗α1肾上腺受体自身抗体（α1受体抗体）产生的阳性率与血清肌酐水平的关系。方法以合成的AT1和α1受体多肽片段为抗原，应用酶联免疫吸附测定（ELISA）技术，检测111例慢性。肾小球肾炎患者（CGN），61例高血压无肾损害患者，40例正常人血清中抗AT1和α1受体自身抗体。结果①CGN抗AT1和α1受体自身抗体阳性率分别为68．5％（76／111）和56．8％（63／111）明显高于单纯高血压组的34：4％（21／61）、27．9X（17／61）和正常对照组（分别为10．0％和12．5％）（P〈0．05，P〈0．01）；②CGN患者亚组比较，早期肾衰期抗AT1和α1受体自身抗体的检出阳性率最高，与晚期肾衰和尿毒症期比较具有显著性统计学意义（P〈0．01）；③血清肌酐水平比较分析（血清肌酐高于正常但〈450μmol／L组）抗AT1和抗α1受体自身抗体的检出阳性率，明显高于血清肌酐水平450～707μmol／L组和〉707μmol／L组，比较具有统计学意义（P〈0．01）。结论CGN发病与血清抗AT1和α1受体自身抗体产生有关，血清抗AT1和α1受体自身抗体与血清肌酐水平有关，免疫学机制可能参与CGN发病。

基于LabVIEW编程语言的重采样阶次比分析研究

阶次分析是旋转体机械振动监测及故障诊断的最重要方法之一,因为转速的波动会使频谱图上基频以及各次谐波分量变得模糊。基于重采样原理的阶次分析是实现信号从等时采样到等角度采样的一种信号处理方法,它主要能解决因转速波动而产生的谐波分量重叠所带来的困难。本文主要通过对比基于LabVIEW编程语言的频谱分析和阶次比分析在研究变速旋转体振动信号中的优劣势,深入探讨实现阶次比分析的原理过程。

马铃薯X、Y病毒的单克隆抗体及其在马铃薯病毒检测上的应用

1 前言晚疫病、环腐病、黑茎病、青枯病及病毒病是危害我国马铃薯生产的5种主要病害。其中病毒病发生最普遍,自70年代以来一直是困扰我国马铃薯生产的主要因素,引起马铃薯的退化,大幅度降低产量,马铃薯X病毒(PVX)。

应用单克隆抗体免疫荧光技术检测马铃薯青枯病潜伏侵染的初步研究

应用单克隆抗体免疫荧光技术(MIF)检测了青枯病在马铃薯种薯上的潜伏侵染。测试结果表明,MIF检测青枯病茵的灵敏度为2×10~3～2×10~4细菌/毫升。787.5倍荧光显微镜,每视野平坶有5个以上典型荧光细菌,即可判别为带菌(阳性),而1～4个荧光细菌则视为可疑,需作生物测定。从种薯脐部取样,经组织匀浆后采用低、高速离心收集细菌体,可提高样品青枯菌的检出率。

肺炎诱发性谵妄50例临床分析

目的 探讨肺炎诱发性谵妄的临床特征及治疗措施。方法 总结分析了我院资料完整的由肺炎诱发的 5 0例谵妄病例。结果 本组患者以老年为主 ,16例患者有脑部器质性病变 ,诱发因素有电解质紊乱及药物性因素 ,患者分别表现为兴奋性、抑制性及混合性谵妄。结论 老年肺炎谵妄发生率高 ,对老年期谵妄患者应常规行胸片检查及避免诱发因素发生。

烫伤大鼠比目鱼肌氧化还原状态变化与蛋白质分解代谢的关系

本文以一侧后肢(7％体表面积)全层烫伤大鼠为模型观察伤后比目鱼肌蛋白质分解速率与氧化还原状态的关系。结果指出伤后72h大鼠烫伤肢离体保温及在体比目鱼肌细胞内乳酸/丙酮酸比值、苹果酸/丙酮酸比值明显低于未伤肢,蛋白质分解速率升高。胰岛素(0.01u/ml介质)能显著升高比目鱼肌细胞内乳酸/丙酮酸与苹果酸/丙酮酸比值,同时降低蛋白质分解速率。从而提示:烫伤后大鼠比目鱼肌蛋白质分解速率的变化与胞液中氧化还原状态密切相关。