B型钠尿肽在冠心病严重程度及预后评估中的应用

目的探讨B型钠尿肽(BNP)在冠心病严重程度及预后评估中的应用及作用。方法将胸痛并行冠状动脉造影的患者根据冠状动脉造影结果分为非冠心病组(95例)和冠心病组[256例,包括稳定性心绞痛(SA)组(111例)和急性冠状动脉综合征(ACS)组(145例)]。记录受试者的一般情况,记录患者病变支数和Gensini评分。用化学发光法检测基线BNP水平。冠心病患者随访1年,记录主要不良心血管事件。分析不同病例组、不同冠状动脉病变支数患者间及主要不良心血管事件发生患者与未发生患者间的差异。结果冠心病组BNP水平为(137.95±21.58)pg/mL,明显高于非冠心病组[(89.05±9.18)pg/mL](P<0.01),且患者BNP水平[(177.83±22.16)pg/mL]亦高于SA患者[(121.17±19.98)pg/mL](P<0.01)。冠状动脉三支病变组BNP水平>二支病变组>一支病变组(P<0.05)。按BNP水平把冠心病患者分为三分位[低、中、高分位BNP水平分别为112.05±9.52、147.56±17.12、(180.03±22.57)pg/mL],低分位患者Gensini积分为29.10±4.54,中分位患者为37.76±6.91,高分位患者为58.46±3.71,三者之间差异均有统计学意义(P<0.05)。随访1年共发生不良心血管事件29例,其中非心源性死亡3例、急诊或择期冠状动脉造影12例、再次经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)9例、心源性死亡5例)。不良心血管事件阳性患者BNP水平[(205.12±14.73)pg/mL]明显高于阴性患者[(108.27±11.96)pg/mL](P<0.01)。结论 BNP可应用冠心病严重程度及冠心病患者预后评估。

糖化血红蛋白对糖尿病的诊断价值

目的探讨糖化血红蛋白(HbA1c)在糖尿病(DM)诊断中的应用价值。方法随机选择DM初筛患者535例,均行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),用高效液相色谱法检测HbA1c水平。根据OGTT结果把受试者分为糖耐量正常(NGT)组、血糖调节受损(IGR)组和糖尿病(DM)组,NGT组和IGR组并称为非糖尿病组(non-DM)。用ROC曲线分析HbA1c、空腹血糖(FPG)诊断DM及IGR的能力。结果 DM组患者、FPG、餐后2 h血糖(2h PG)及HbA1c均显著高于其他组(P均<0.01);上述指标IGR组亦显著高于NGT组(P均<0.01)。DM组男性患者显著多于女性(P<0.01)。HbA1c的cut off值为6.1%时,诊断DM的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.849,敏感性为79.1%,特异性为78.4%,与7.0 mmol/L FPG的诊断能力无显著性差异(P>0.05)。2者联合应用显著提高诊断能力,AUCROC=0.885,敏感性为75.0%,特异性为88.0%。以HbA1c 5.7%为cut off值,诊断IGR(AUCROC=0.66)能力显著低于FPG(AUCROC=0.787),P<0.01。结论 HbA1c的cut off值为6.1%时可用于诊断DM,与7.0 mmol/L FPG联合应用可增加诊断DM的能力,但5.7%HbA1c对IGR的筛查能力较弱,不及5.6 mmol/L FPG。

流式细胞术分析户尘螨致敏的嗜碱性粒细胞活化试验及其临床意义

目的建立流式细胞术(FCM)分析嗜碱性粒细胞活化试验(BAT)的方法并评估其在过敏性疾病诊断中的意义。方法以CD63/CD203c/CD45抗体组合,建立用FCM分析户尘螨致敏的嗜碱性粒细胞脱颗粒的方法。以皮肤点刺试验(SPT)作为金标准方法,将FCM检测活化嗜碱性粒细胞与荧光酶联免疫吸附试验(FELISA)测定特异性IgE(sIgE)结果作比较,分析其临床应用价值。结果以CD45和CD203c联合设门,可以得到纯的嗜碱性粒细胞;CD63是活化嗜碱性粒细胞的最佳标志;Spearman相关系数显示,sIgE的Unicap分级与活化嗜碱性粒细胞呈中度相关;FCM检测活化嗜碱性粒细胞与FELISA测定sIgE结果在户尘螨过敏性疾病诊断中的差异无统计学意义(P>0.05),但前者的敏感度、符合率、阳性预测值以及阳性似然比各项指标都优于后者。结论通过FCM分析CD63的表达来确定活化嗜碱性粒细胞是诊断速发型超敏反应的一种有效、安全的体外检测方法。

酶法测定糖化白蛋白及其临床意义

目的评价酶法检测糖化白蛋白(GA)及临床意义。方法检测56名健康者血清GA水平,建立参考范围;检测所有试验者血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、尿素(Urea)、肌酐(Cr)、血脂[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1 c),统计GA与上述指标间的相关性。用GA高值血清和低值血清评估Luc ica GA-L试剂盒的精密度及其线性。结果健康人群GA值为(14.35±2.00)%;GA与血清ALT、AST、U-rea、Cr、TC、TG、HDL-C和LDL-C的相关系数(r)分别为0.010、0.012、0.003、0.061、-0.039、0.026、-0.038和-0.051,与FPG、2hPG、HbA1 c的r分别为0.818、0.803和0.854,HbA1 c与FPG、2hPG的r为0.845和0.820。健康者、临界者和糖尿病(DM)患者间GA差异有显著性(P<0.001)。该法批内变异系数(CV)<2%,批间CV<5%,线性测定r=0.999 6;结论酶法检测GA有良好的精密度和稀释直线性,且不受血清ALT、AST、Urea及血脂水平的影响,与HbA1 c一样能很好的反映FPG和2hPG水平,适用于监测高危人群和DM患者近期整体血糖水平。

阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征与急性冠状动脉综合征患者冠状动脉病变严重程度及预后的相关性

目的研究阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征与急性冠状动脉综合征患者冠状动脉病变严重程度及预后的相关性。方法将急性冠状动脉综合征患者根据冠状动脉造影结果和睡眠呼吸监测结果分为单纯急性冠状动脉综合征组及急性冠状动脉综合征合并轻度、中度和重度阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征组,以Gensin i评分比较各组冠状动脉病变严重程度,并分析Gensin i评分与呼吸暂停低通气指数和夜间最低血氧饱和度的关系。6个月内对患者进行随访,比较各组间心血管联合终点事件发生情况。结果三个合并阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征组呼吸暂停低通气指数明显高于单纯急性冠状动脉综合征组(P<0.01),而夜间最低血氧饱和度却明显低于单纯急性冠状动脉综合征组(P<0.01);合并中度和重度阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征组呼吸暂停低通气指数明显高于轻度阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征组(P<0.01),而夜间最低血氧饱和度则明显低于后者(P<0.01)。Gensin i评分合并中度和重度阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征组明显高于另两组(P<0.01),且合并重度阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征组的Gensin i评分明显高于中度阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征组(P<0.05)。Gensin i评分与呼吸暂停低通气指数成正相关,Gensin i评分与夜间最低血氧饱和度成负相关。四组患者6个月内心血管联合终点事件发生率分别为19.35%、22.58%、32.26%和43.33%,重度阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征组的心血管联合终点事件发生率显著高于单纯急性冠状动脉综合征组(P<0.05),其他各组间心血管联合终点事件差异无显著性(P>0.05)。血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征分级是急性冠状动脉综合征患者心血管联合终点事件发生的独立预测因子。结论中、重度阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征可能是加重急性冠状动脉综合征患者冠状动脉病变严重程度的重要因素,阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征会增加急性冠状动脉综合征近、中期预后的心血管联合终点事件发生率,尤其是重度阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征对急性冠状动脉综合征患者的预后有显著影响,阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征是急性冠状动脉综合征患者心血管联合终点事件的独立预测因子。

血糖调节异常者血脂代谢的初步研究

目的初步评价血糖调节受损患者血脂代谢异常情况。方法检测糖耐量正常(NGT)、单纯空腹血糖异常(IFG)、单纯糖耐量异常(IGT)、空腹血糖异常合并糖耐量异常(IFG+IGT)和糖尿病(DM)患者空腹血糖和餐后2 h血糖及空腹血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A-I(apo A-I)和载脂蛋白B(apo B)水平,计算非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)和血浆致动脉硬化指数(AIP),比较各组间血清脂质成分的差异。结果IFG组血清TC、LDL-C、non-HDL-C和apo B水平较NGT组明显升高(P<0.01),而TG、HDL-C、AIP差异无统计学意义(P>0.05)。IGT组血清TC、TG、LDL-C、non-HDL-C、apo A-I、apo B和AIP水平较NGT组显著升高(P<0.01),前6项指标与IFG+IGT组差异无统计学意义(P>0.05)。IFG+IGT组与NGT组比较,各指标差异均有统计学意义(P<0.01);HDL-C、non-HDL-C和AIP水平与IFG组比较差异有统计学意义(P<0.01)。DM组表现出典型的DM性脂代谢紊乱伴AIP水平显著异常。non-HDL-C和apo B间存在良好的相关性(P<0.01)。结论血糖调节受损者不同程度的存在血脂代谢异常,主要表现为TC、TG、LDL-C、non-HDL-C和apo B水平的升高和HDL-C、apo A-I的降低,伴不同程度AIP水平的改变。

慢性心力衰竭患者血清胱抑素C的检测及临床意义

目的评估慢性心力衰竭(CHF)患者血清胱抑素C检测的临床意义。方法选取CHF患者和老年健康体检者作为研究对象,检测血清肌酐、尿素氮、胱抑素C、总胆固醇、LDL-C、血糖及左心室射血分数。统计分析CHF患者与对照组间各指标的差异及血清胱抑素C与左心室射血分数的相关性。结果心功能Ⅳ级患者肌酐水平较其他受试者显著性升高。心功能Ⅲ级和Ⅳ级CHF患者血清胱抑素C水平明显高于心功能Ⅱ级CHF患者及对照组。血清胱抑素C水平与左心室射血分数间显著相关。结论血清胱抑素C水平随心力衰竭严重程度的增加而升高。

阿托伐他汀对急性冠状动脉综合症患者血清sdLDL-C的影响

目的探讨阿托伐他汀对急性冠状动脉综合症(ACS)患者治疗前、后血清小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)水平的影响。方法选取初发ACS患者131例及同期中老年健康体检者178名,记录受试者一般情况,给予ACS患者口服阿托伐他汀(10 mg/d)调脂治疗,检测受试者治疗前、后血脂水平及血清sdLDL-C水平。统计分析受试者治疗前、后各指标的差异。结果健康对照人群血清sdLDL-C水平第95百分位数为0.62 mmol/L。调脂治疗后,ACS患者血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)、TC/HDL-C比值和sdLDL-C水平与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后sdLDL-C降低程度与治疗前血清TC、TG、LDL-C和non-HDL-C水平显著相关[相关系数(r)分别为0.329(P<0.001)、0.320(P<0.001)、0.232(P=0.013)、0.385(P<0.001)],与HDL-C水平和TC/HDL-C比值之间无相关性[r分别为-0.155(P=0.100)、0.046(P=0.624)]。LDL-C<2.59 mmol/L的ACS患者调脂治疗后血清sdLDL-C明显降低(P<0.05),sdLDL-C异常率由治疗前的26.9%下降到8.6%,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论常规阿托伐他汀调脂治疗可降低ACS患者血清sdLDL-C水平,亦可明显降低血脂水平正常的冠心病患者sdLDL-C异常率。

血清三酰甘油水平与小而密低密度脂蛋白胆固醇的关系

目的探讨健康人群和血脂代谢异常者小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)水平分布及血清三酰甘油(TG)水平对sdLDL-C水平的影响。方法将693例血脂代谢异常者分为A组(542例,TG<1.70 mmol/L)和B组(151例,TG≥1.70 mmol/L),同时选取健康对照者181名。采用肝素-镁沉淀法检测血清sdLDL-C水平,同时检测空腹血糖、血脂[包括总胆固醇(TC)、TG、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]及载脂蛋白A1(apo A1)、载脂蛋白B(apo B)。分析各组各指标间的差异及血清TG水平对sdLDL-C的影响。结果 B组TC、aopB水平高于健康对照组和A组(P<0.05),HDL-C水平明显低于健康对照组和A组(P<0.05)。健康对照组sdLDL-C水平呈偏态分布,以第95百分位数(0.62 mmol/L)作为正常参考阈值。血脂异常组sdLDL-C水平为0.46(0.34～0.64)mmol/L,明显高于健康对照组[0.22(0.16～0.38)mmol/L](P<0.001)。多元逐步回归分析表明,对sdLDL-C水平有显著影响的因素为TG和LDL-C。17.6%的A组患者血清sdLDL-C水平高于正常参考阈值(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析表明,TG识别sdLDL-C水平升高的Cut-off值为1.36 mmol/L。结论血清sdLDL-C水平受TG的影响最大,判断sdLDL-C水平是否升高的TG的界值应适当调低。

RGD-M6P对原代肝星状细胞的影响

目的探讨精氨酸 -甘氨酸 -天冬氨酸 (RGD)和甘露糖 - 6 -磷酸 (M6P)的复合体 (RGD M6P)对原代肝星状细胞 (HSC)活化及细胞外基质分泌水平的影响。方法应用胶原酶原位灌注法分离原代HSC ,接种培养 4 8h后 ,随机分成空白对照组、转化生长因子β1(TGFβ1)组、M6P组、RGD组和RGD M6P组。培养 5d后 ,应用免疫组化方法检测各组HSCα SMA表达水平变化 ,双抗体夹心ABC酶免测定法检测培养 7d细胞的上清液中Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )含量。结果RGD M6P组原代HSC细胞上清液PCⅢ含量和α SMA表达明显低于TGFβ1组和M6P组 (P <0 .0 5 ) ,而与RGD组比较无显著差异。结论RGD M6P显著减少原代HSCα SMA的表达水平 ,明显降低培养上清中PCⅢ含量 。

小而密低密度脂蛋白的临床应用及检测

低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）是体内转运内源性胆固醇的主要脂蛋白,在动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的发生和发展中起着重要的调节作用.LDL具有明显的异质性,Austin等[1]根据非变性梯度凝胶扫描测定的LDL主峰颗粒直径（peak particle diameter,PPD）将LDL分成两种亚型：PPD≥25.5 nm 为A型LDL,即大LDL （large LDL,lLDL）,密度接近1.02 g/mL; PPD＜25.5 nm为B型LDL,即小而密低密度脂蛋白（small dense LDL,sdLDL）,密度接近1.06 g/mL.1 sdLDL的代谢LDL颗粒的不均一性是其代谢过程受多因素调节的结果,但具体生化机制尚不十分清楚.

多肿瘤标志物蛋白芯片技术在肺癌诊断中的应用

目的探讨多肿瘤标志物蛋白芯片技术在肺癌诊断中的应用价值。方法采用多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统检测36例肺癌、60例良性肺部疾病患者和39例健康体检者的12种常见肿瘤标志物。结果肺癌组糖抗原(CA)中CA125、CA153、CA242,癌胚抗原(CEA)和铁蛋白(FER)值较其他两组明显升高(P<0.01);联合检测灵敏度80.6%,灵敏度较单指标检测提高约30%。结论应用多肿瘤标志物蛋白芯片技术确定CA125、CA242、CA153和CEA的联合检测是筛检肺癌的优化组合,对肺癌的早期诊断有较高的临床应用价值。

冠状动脉性心脏病合并2型糖尿病患者的内皮细胞微粒水平

目的探讨冠状动脉性心脏病合并2型糖尿病患者的血浆内皮细胞微粒(EMP)水平,及其与单纯冠状动脉性心脏病患者及健康者的差异。方法选择单纯冠状动脉性心脏病患者(A组)78例,冠状动脉性心脏病合并2型糖尿病患者(B组)96例,健康者(C组)30名。采用生化法检测受试者的血脂水平,应用流式微球技术检测血浆EMP水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测内皮素-1(ET-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平,并对A组和B组的患者进行Gensini评分。比较各组间血脂、EMP、ET-1和ICAM-1水平的差异。结果 B组的三酰甘油(TG)水平显著高于A组和C组(P值均<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著低于A组和C组(P值均<0.01),A组与C组间血脂水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。A组和B组的血EMP水平及血清ET-1和ICAM-1水平均显著高于C组(P值均<0.01),B组上述指标均显著高于A组(P值均<0.01)。结论冠状动脉性心脏病患者存在一定程度的血管内皮功能异常,且冠状动脉性心脏病合并2型糖尿病患者进一步加重,提示高血糖和胰岛素抵抗加重了冠状动脉性心脏病患者血管内皮损伤程度。

血糖调节受损者糖化白蛋白与心血管危险因子的相关性

目的探讨血糖调节受损者糖化白蛋白(GA)与强预测因子高敏C反应蛋白(hsCRP)水平和总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值(TC/HDL ratio)的分布特征。方法受试者行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),同时检测空腹GA、hsCRP、TC和HDL水平。按2005年中华医学会糖尿病分会提出的血糖调节受损诊断标准,将所有受试者分为5组:糖耐量正常组、血糖调节受损组(包括单独空腹血糖受损组、单独糖耐量异常组、空腹血糖受损和糖耐量异常联合组)、糖尿病组,比较各组间GA、hsCRP、TC/HDL ratio和OGTT血糖曲线下面积的差异,并进一步分别按hsCRP、TC/HDL ratio四分位水平分组,分析各组GA水平的差异。结果血糖调节受损组及糖尿病组GA、hsCRP、TC/HDL ratio和OGTT血糖曲线下面积与糖耐量正常组之间有统计学差异(P<0.01);GA水平随hsCRP水平和TC/HDL ratio上升而明显升高(P<0.01)。结论初诊糖尿病患者和血糖调节受损者GA水平随hsCRP水平和TC/HDL ratio的升高而上升,其对糖尿病患者远期心血管事件的发生可能有一定的预测作用。

Smad7基因过表达对L02肝细胞株增殖的影响

目的观察外源Smad7基因对L0 2肝细胞株增殖活性的影响。方法分别以重组腺病毒AdSmad7和对照病毒AdGFP在体外感染L0 2肝细胞 ,以RT PCR和Western blot检测外源Smad7基因表达情况 ,MTT法检测L0 2肝细胞增殖活性 ,流式细胞仪检测其细胞周期变化。结果AdSmad7体外感染L0 2肝细胞后 ,Smad7mRNA和蛋白水平均显著上调。转化生长因子 β(TGFβ)可抑制L0 2细胞增殖 ,诱导其凋亡。导入外源Smad7可拮抗TGFβ的作用。结论利用AdSmad7导入外源Smad7基因可间接促进肝细胞增殖 。

人工合成RGD小肽对肝星状细胞分泌细胞外基质的影响

目的 :探讨精氨酰甘氨酰天冬氨酸肽 (Arg -Gly -Asp ,RGD)对肝星状细胞分泌细胞外基质 (extra cellularmatrix ,ECM)的影响。方法 :利用化学方法合成RGD ;应用胶原酶原位灌注法分离SD大鼠原代肝星状细胞 (hepaticstallatecell,HSC) ,接种培养 4 8h后 ,随机分成 4组 :①空白对照组 ;②转化生长因子 β1(transform inggrowthfactorβ1,TGFβ1)组 :只加TGFβ1(终浓度 5ng/ml) ;③RGD组 :只加RGD(终浓度 10 0 μg/ml) ;④联合加药组 :加RGD(终浓度 10 0 μg/ml)同时加TGFβ1(终浓度 5ng/ml)。连续培养 3d后 ,放射免疫分析细胞上清液各项ECM含量变化。结果 :与空白对照组相比 ,TGF β1组和联合加药组细胞上清液中透明质酸(hyaluronicacid ,HA)、层粘连蛋白 (laminin ,LN)和Ⅲ型前胶原 (procollagenⅢ ,PCⅢ )水平均显著增高 ,RGD组细胞上清中各项ECM水平则无明显改变 ;与TGFβ1组相比 ,联合用药组HSC细胞上清LN和PCⅢ水平明显降低。结论 :RGD明显降低HSC培养上清中LN和PCⅢ含量 ,表明RGD能抑制原代HSC合成及分泌ECM ,其机制可能与竞争性结合整合素有关。

TGFβ_1信号与肝纤维化

肝星状细胞 (HSC)是肝纤维化发生的关键细胞 ,转化生长因子 β1(TGFβ1)是活化HSC、促进细胞外基质 (ECM )分泌的重要细胞因子 ,其在肝纤维化的发生发展中有重要的调节作用 。

TGF-β_1激活与肝纤维化

TGF-β_1在激活肝星状细胞,促进细胞外基质大量合成中起关键作用,而TGF-β_1的激活是发挥其生理功能的首要条件。本文就TGF-β_1的激活机制及其与肝纤维化的关系的研究进展作一综述。

急性冠脉综合征患者夜间低氧血症对颈动脉硬化斑块的影响

目的研究急性冠脉综合征(ACS)患者夜间低氧血症对颈动脉粥样硬化斑块的影响。方法将110例ACS患者根据冠脉造影检查和睡眠呼吸监测结果分为三组:ACS组(Ⅰ组,n=37)、ACS合并阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征-轻度以下夜间低氧血症组(Ⅱ组,n=36)、ACS合并阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征-中度以上夜间低氧血症亚组(Ⅲ组,n=37)。所有患者均行颈动脉超声检查,对各组间颈动脉内膜中层厚度、斑块数量进行分析,并以Gensini积分比较不同组间冠脉病变严重程度。结果三组在传统冠心病危险因素差异无统计学意义(P>0.05),与Ⅰ组比较,Ⅱ组和Ⅲ组患者颈动脉内膜明显增厚,颈动脉斑块数明显增多(P<0.01);Ⅲ组比Ⅱ组颈动脉内膜明显增厚,总斑块数、软斑块数显著增多(P<0.01),混合斑块数、硬斑块数也明显增多(P<0.05);Ⅱ组和Ⅲ组中颈动脉IMT及斑块数量与夜间最低血氧饱和度成负相关;Ⅱ组与Ⅰ组Gensini积分无统计学差异(P>0.05)。Ⅲ组Gensini积分明显高于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.01)。结论夜间低氧血症对ACS患者颈动脉粥样硬化及斑块的形成可能具有一定作用。

外源Smad7基因对四氯化碳诱导大鼠实验性肝纤维化的影响

目的研究外源Smad7基因对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠实验性肝纤维化的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组。第一组为正常对照组,其余3组采用CCl4皮下注射法建立大鼠肝纤维化模型,并在实验第2周和第4周分别经尾静脉导入生理盐水、重组复制缺陷型腺病毒AdSmad7或对照病毒AdGFP。标准酶法测定各组大鼠肝功能情况;放射免疫法测定血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)水平;RT-PCR法检测大鼠肝组织Smad7 mRNA表达。免疫组织化学法测定α-肌动蛋白(α-SMA)、Smad7表达;肝组织切片采用HE和VG染色进行肝纤维化程度分级。结果与模型对照组相比,AdSmad7导入组大鼠血清谷丙转氨酶(GPT)和碱性磷酸酶(AKP)水平有不同程度的降低,GPT降低更明显;血清PCⅢ和LN水平也显著下降(P<0.05)。RT-PCR和免疫组织化学染色证实,AdSmad7导入组大鼠肝组织Smad7表达显著上调,而α-SMA表达则明显下降(P<0.05)。病理学检查显示:AdSmad7导入组大鼠肝组织结缔组织增生程度减轻,纤维间隔变细,假小叶形成不明显,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论重组复制缺陷型腺病毒AdSmad7经尾静脉注射后可在大鼠肝组织中表达;外源Smad7基因可改善纤维化大鼠肝功能,降低血清PCⅢ水平,下调α-SMA表达,减轻大鼠肝纤维化程度。