反向传播人工神经网络结合正交试验优化荷叶降脂方的提取工艺

目的:使用反向传播(BP)人工神经网络结合正交试验优化荷叶降脂方中药物的提取工艺,为药物的规范化生产和产业化形成提供可靠的研究基础。方法:采用水回流提取法提取,以荷叶碱的含量为评价指标,以正交试验设计筛选提取工艺,并将正交试验层次分析法得到的实验数据作为反向神经网络的输入层,评价指标的综合得分作为网络的输出层,对主要影响因素进行仿真优化,得到最优提取工艺。结果:优化得到的提取工艺条件为12倍量水、提取3次、0.5 h/次。结论:BP人工神经网络结合正交试验方法可用于荷叶降脂方提取工艺的优化,科学合理,稳定可行,符合中药制剂研发的需求。

薄荷醇、苏合香挥发油对川芎嗪纳米粒跨血脑屏障模型转运行为的影响

目的以bEnd. 3细胞单层模拟血脑屏障,研究薄荷醇、苏合香挥发油对血脑屏障的生物相容性及二者对川芎嗪纳米粒跨细胞单层转运行为的影响。方法以细胞存活率为指标,采用MTT法研究薄荷醇、苏合香挥发油对血脑屏障细胞的生物相容性;采用乳化—溶剂挥发法制备川芎嗪纳米粒并进行表征;采用bEnd. 3细胞单层模型研究配伍薄荷醇、苏合香挥发油对川芎嗪纳米粒跨膜转运的影响,并对转运过程中细胞单层跨膜电阻值(transepithelial electrical resistance,TEER)进行检测。结果生物相容性实验结果显示薄荷醇在25、50、75μg/mL浓度下不具有细胞毒性,苏合香挥发油在25、50μg/mL浓度下不具有细胞毒性,相对于薄荷醇,苏合香挥发油具有更高的细胞毒性。实验成功制备了川芎嗪纳米粒,平均粒径为(152.9±2.6) nm,稳定性良好。跨膜转运实验结果显示,川芎嗪纳米粒的跨细胞单层转运表观渗透系数(Papp)值为(15.9199±0.3677)×10^(-6)cm/s,配伍薄荷醇(50μg/mL)、苏合香挥发油(50μg/mL)后川芎嗪纳米粒的转运Papp值为(15.5661±0.3242)×10^(-6)cm/s、(15.1416±0.2451)×10^(-6)cm/s,三者无差异。TEER值结果显示在给予50μg/mL薄荷醇、苏合香油后,细胞单层TEER值的变化趋势与单独给予川芎嗪纳米粒组相近,整体均呈现下降趋势。结论薄荷醇相对于苏合香挥发油具有更好的细胞相容性。在保障生物相容性的配伍浓度范围内,配伍薄荷醇、苏合香挥发油对川芎嗪纳米粒的跨细胞单层转运无影响。

高速公路养护施工安全管理措施探析

现阶段我国高速公路使用年限不断增长,过往建造的高速公路随着使用年限的增长而出现破损、老化的问题,新建设的高速公路也因为近些年交通流量的不断增加而承担超负荷的压力.针对以上现象,我国不断在各地开展高速公路养护施工工程.但因为多方因素影响,高速公路养护施工安全管理上存在着一定的问题,使得高速公路养护施工难以顺利展开.本研究主要分析了现阶段我国高速公路养护施工安全管理中出现的问题以及相应的优化措施.

基于成分定量和指纹图谱的化学模式识别法评价胆木不同部位的差异性

目的建立胆木不同部位的UPLC指纹图谱,结合成分定量与化学模式识别,评价胆木不同部位的差异性。方法采用Waters Acquity BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱;检测波长240 nm;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃,对胆木不同部位异长春花苷内酰胺的含量进行测定,利用化学模式识别法通过SPSS 20.0对色谱数据进行聚类分析和通过SIMCA 14.1软件对胆木9部位进行主成分分析,并将所有色谱峰化为分类数据对药材不同部位的差异性进行分析。结果对于异长春花苷内酰胺而言,植株地下部位(根皮、去皮根茎)的累积量要高于地上部位的累积量,在地下部位,根皮部位的含量高于去皮根茎部位的含量,地上部位中叶含量最高,其次为茎干部位,最后为枝部位,茎干部位趋势从高到低大致为去皮茎干、带皮茎干、茎皮,枝部位趋势从高到低大致为枝皮、去皮枝茎、带皮小枝。3批次9部位(27份)药材UPLC图谱有9个共有峰,指认了其中獐牙菜苷、绿原酸、马钱苷酸3个色谱峰。当平方欧氏距离为10时,9部位被聚为3类:3批叶聚为一类,3批根皮、3批茎皮、3批枝皮共聚为一类,3批去皮根茎、3批带皮茎干、3批去皮茎干、3批带皮小枝、3批去皮枝茎聚为一类。所有色谱峰化为分类数据后,在皮部位中,根皮能区分于茎皮和枝皮,色谱图中根皮也存在区别于茎皮和枝皮的特征峰;在去皮部位中,去皮根茎可区分于去皮枝茎和去皮茎干,色谱图中去皮根茎也存在区别于去皮枝茎和去皮茎干的特征峰,同时去皮枝茎和去皮茎干可通过色谱图中的特征峰区分开来;在带皮部位中,带皮小枝与带皮茎干可以区分开来。结论胆木皮部位(根皮、枝皮、茎皮)、带皮部位(带皮小枝、带皮茎干)、去皮部位(去皮茎干、去皮枝茎、去皮根茎)、叶部位存在差异,可为胆木的进一步开发利用提供依据。

不同刚度纳米粒配伍薄荷醇/莪术醇对bEnd.3细胞力学性质的影响研究

探究不同刚度纳米粒PLGA-NPs和介孔二氧化硅纳米粒(MSNs)配伍薄荷醇或莪术醇前后对bEnd.3细胞力学性质的影响。采用马尔文粒度仪测定PLGA-NPs和MSNs的粒径分布情况,并通过原子力显微镜(AFM)对两者的刚度进行定量研究;体外培养bEnd.3细胞,以细胞表面形貌、粗糙程度、杨氏模量为考察指标,表征细胞表面的粗糙程度和刚度,采用AFM观察细胞力学性质的变化,并采用激光共聚焦显微镜成像观察细胞骨架肌动蛋白F-actin的结构和表达。结果显示,2种纳米粒均具有良好的分散性,PLGA-NPs的粒径为(98.77±2.04)nm,PDI为0.140±0.030,杨氏模量值为(104.717±8.475)MPa;MSNs的粒径为(97.47±3.92)nm,PDI为0.380±0.016,杨氏模量值为(306.019±8.822)MPa,PLGA-NPs刚度显著低于MSNs。PLGA-NPs和MSNs分别单独作用于bEnd.3细胞后,细胞表面均出现细微孔洞,粗糙程度增大,杨氏模量值减小,F-actin条带均出现轮廓模糊、断裂等现象,平均灰度值均显著降低;PLGA-NPs配伍薄荷醇或莪术醇后,与PLGA-NPs作用相比,bEnd.3细胞表面孔洞加深且密集分布,粗糙程度增加,杨氏模量值显著降低,F-actin条带断裂现象更加明显,平均灰度值显著降低。MSNs配伍薄荷醇后,与MSNs作用相比,bEnd.3细胞表面孔洞加深且密集分布,粗糙程度增加,杨氏模量值显著降低,F-actin条带断裂更加明显,平均灰度值显著降低;配伍莪术醇后,与单独作用相比,无显著差异。由此推测,芳香性成分能通过改变bEnd.3细胞的生物力学性质,增加纳米粒胞内摄取量和转运量。

小儿止哮平喘颗粒质量标准的研究

目的:建立小儿止哮平喘颗粒的药品质量标准,更好地控制产品质量。方法:建立处方药味蜜麻黄、黄芩、地骨皮、赤芍、丹参的TLC鉴别法;建立盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、黄芩苷含量测定的HPLC法,盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱含量以乙腈-0.1%磷酸水(4∶96)为流动相;检测波长为210 nm;柱温为30℃;黄芩苷含量以甲醇-0.1%磷酸水(45∶55)为流动相;检测波长为280 nm;柱温为30℃。结果:建立的TLC图谱与相应的对照药材在相同位置上显现相同颜色的斑点,阴性样品无干扰。HPLC法测定盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、黄芩苷含量,进样量分别在0.026 9~1.721 6,0.010 5~0.670 7,0.102 4~0.768 0μg范围内线性关系良好(r为0.999 9~1.000 0);平均加样回收率分别为96.8%,96.1%,100.31%,RSD均小于3%。结论:实验建立的TLC鉴别法和HPLC含量测定法专属性强、重现性好,可用于小儿止哮平喘颗粒的质量控制。

经典名方易黄汤物质基准的量值传递分析

目的:以指纹图谱、指标成分含量及出膏率为评价指标探索饮片-物质基准的量值传递关系,考察15批易黄汤物质基准的关键质量属性,初步建立其物质基准的质量标准。方法:制备15批易黄汤物质基准冻干粉样品,采用高效液相色谱法(HPLC)对15批饮片和物质基准进行指纹图谱、指标成分含量测定,流动相选择乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~6 min,97%B;6~12 min,97%~92%B;12~25 min,92%~90%B;25~35 min,90%~89%B;35~50 min,89%~82%B;50~75 min,82%~72%B;75~85 min,72%~35%B),检测波长230 nm,结合出膏率明确特征峰的归属及其与对照图谱的相似度范围,京尼平苷酸、盐酸小檗碱的含量范围及转移率范围,物质基准的出膏率范围及变化幅度等。结果:建立的HPLC指纹图谱检测方法精密度、重复性和稳定性均良好,能同时适用于饮片、物质基准指纹图谱的检测。15批易黄汤物质基准指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.99;共归属15个特征峰,经对照品比对后指认了8个特征峰信息,其中6个来自盐黄柏,1个来自酒车前子,1个来自炒山药。15批易黄汤物质基准中京尼平苷酸、盐酸小檗碱质量分数范围分别为0.10%~0.16%,0.63%~1.05%,转移率范围分别为20.91%~32.65%,19.60%~29.59%;物质基准出膏率范围8.45%~9.92%。结论:采用指纹图谱、出膏率及指标成分含量测定相结合的模式,对经典名方易黄汤物质基准的量值传递过程进行分析,可初步拟定易黄汤物质基准的质量标准,可为该经典名方的质量控制及相关制剂开发提供依据。