HIV-1 CN54 Gag P55和P24蛋白的高效表达、纯化和鉴定

目的 探讨HIV 1中国株CN5 4GagP5 5和P2 4重组蛋白的高效表达并纯化 ,为研究HIV疫苗和诊断试剂创造条件。方法 分别将CN5 4GagP5 5和P2 4基因克隆至 pBV2 2 0和 pThioHisC载体 ,构建非融合表达载体 ;将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1codonplus RIL ,对工程菌进行诱导表达。Western Blot检测目的蛋白 ,用DEAE SeparoseFF阴离子交换层析柱纯化目的蛋白 ;纯化的P5 5和P2 4抗原蛋白分别包被酶标板作ELISA检测。结果 P5 5以包涵体的形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 30 % ,P2 4实现了可溶性表达 ,表达量占总菌体总蛋白的4 0 % ;纯化后P5 5纯度达到 80 % ,P2 4纯度超过 90 %。Western Blot和ELISA检测均显示了良好的的灵敏度和特异性。结论 HIV 1CN5 4GagP5 5和P2 4抗原蛋白可在大肠杆菌中高效表达 ,纯化的抗原蛋白具有良好抗原性 。

缺血再灌卒中后抑郁小鼠模型的建立

目的探讨并建立卒中后抑郁小鼠动物模型。方法先利用结扎颈总动脉造成小鼠不完性全脑缺血再灌注病理损伤,利用悬尾和强迫游泳方法诱导小鼠抑郁模型,利用正交试验设计全面考察其影响因素,确定最佳造模条件。结果以缺血5 min,再灌10 min,再缺血5 min所诱导抑郁模型最为明显,且死亡率较低。结论利用此方法所造卒中后抑郁模型具有操作简便、成功率较高且经济的特点,适用于该类药物筛选。

DNA疫苗的安全性研究

DNA疫苗作为第三代疫苗与传统疫苗相比具有很多优越性,对其安全性的评价主要包括DNA疫苗与宿主细胞基因整合的可能性,接种后诱导宿主免疫耐受和自身免疫病的可能性,以及临床试验中受试者的耐受性等方面。本文就DNA疫苗安全性研究进展和相应法规的制定情况作一综述。

黄芪注射液拮抗阿霉素心脏毒性作用的研究

目的 :研究黄芪注射液对阿霉素心脏毒性的保护作用及其机制。方法 :采用阿霉素体外损伤大鼠心肌线粒体和体内小鼠心脏毒性两种模型 ,应用生化方法测定黄芪注射液对其心脏毒性的保护作用。结果 :阿霉素体外引起大鼠心肌线粒体丙二醛 (MDA)水平升高、谷胱甘肽 (GSH)含量降低及线粒体肿胀等 ,黄芪注射液对上述损伤有明显的保护作用。体内实验表明 ,黄芪注射液对阿霉素引起的小鼠心肌线粒体丙二醛 (MDA)、血清肌酸磷酸激酶 (CK)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性水平增高及超氧化物歧化酶 (SOD)活性降低等损伤均有较好的保护作用。结论 :黄芪注射液能拮抗阿霉素引起的心脏毒性 ,为临床应用黄芪注射液作为抗肿瘤辅助药物提供了实验依据。

知母宁(Chinonin)对阿霉素的减毒增效作用

采用阿霉素体外损伤大鼠心脏线粒体模型 ,研究天然抗氧化剂知母宁对阿霉素毒性及抗肿瘤活性的影响。结果表明 :阿霉素体外引起大鼠心脏线粒体丙二醛( MDA)生成、ATP酶活性丧失及膜流动性降低等 ,知母宁对上述毒性损伤均有明显的保护作用 ;MTT法检测发现 ,知母宁对阿霉素的抗肿瘤活性无明显影响。这说明知母宁拮抗阿霉素引起的心脏毒性但不影响其抗肿瘤活性 ,这对临床应用知母宁以减轻阿霉素毒副的可能性提供了实验依据。

德国草药药品管理和中草药出口欧盟的思考

介绍了目前德国草药药品管理相关机构的组成、职能和市场准入申请程序以及德国的特殊医疗系统(PTS)和草药注册的最新情况。由于德国草药市场在欧盟占有极其重要的地位,本文旨在通过对其分析为中草药进入欧盟提供思路。