肿瘤低氧微环境影响巨噬细胞极化的研究进展

巨噬细胞是人体重要的免疫细胞之一,具有可塑性和高度异质性,可极化成不同的表型:经典激活的M1型巨噬细胞和交替激活的M2型巨噬细胞,两者统称为肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)。与正常细胞不同,在肿瘤组织中,由于肿瘤细胞增殖活跃,代谢活动增强,以及脉管系统不发达导致肿瘤组织供氧不足,所以容易导致肿瘤微环境(TME)缺氧。目前认为肿瘤低氧微环境是恶性肿瘤发展的关键驱动因素[1]。TME中的TAMs以M2型为主,具有免疫抑制作用,有利于肿瘤的生长和转移,与不良预后有关。肿瘤低氧微环境如何影响TAMs极化是当前的研究热点,明确其机制可能为临床治疗提供新方案。

Keyhole术与Sugarbaker术治疗造口旁疝效果比较

探讨Keyhole术式及Sugarbaker术式术后治疗效果及并发症情况。通过回顾研究近10年88例造口旁疝手术患者的临床资料,分为Keyhole组(n=26)和Sugarbaker组(n=62),比较两组手术时间、术中出血量、住院时间、排气排便时间及术后并发症等情况。两组住院时间、排气排便时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但术中出血量、手术时间组间比较,Sugarbaker组少于Keyhole组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组出现短期并发症腹胀、切口感染、术后疼痛等情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);长期并发症肠梗阻、复发等发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。采用Keyhole和Sugarbaker术进行造口旁疝修补,Sugarbaker组较Keyhole组手术时间及住院时间较短,两组在术后并发症比较无明显差异,Sugarbaker组较Keyhole组复发率更高,但差异无统计学意义。

腹腔镜结直肠手术学习曲线的分析

目的:探讨腹腔镜结直肠手术的学习曲线。方法:回顾分析2006年1月至2011年12月为120例患者行腹腔镜结直肠手术的临床资料,按手术先后次序分为6组(n=20),每20例为一学习曲线阶段,对比分析各阶段的手术时间、手术频度、并发症发生率、中转开腹率及术后住院时间等。结果:6组患者在手术方式、并发症发生率及中转开腹率等方面差异无统计学意义,但手术时间、手术频度及术后住院时间6组相比差异有统计学意义。结论:腹腔镜结直肠手术约40例后,手术技术即可达到较熟练的状态,但除手术例数外,手术频度也是重要的影响因素。

短肽型肠内营养制剂在围手术期的应用

研究短肽型肠内营养制剂在围手术期的应用价值。将接受该研究的患者随机分为4组:SS组接受术前和术后肠内营养制剂、NN组在手术前后均未接受肠内营养制剂、SN组在术前接受肠内营养制剂、NS组在术后接受肠内营养制剂。比较4组患者术后营养学指标(体质量、总蛋白、白蛋白、前清蛋白、转铁蛋白)、术后并发症(吻合口瘘、刀口感染)以及术后排气时间、住院时间等指标。患者术后第3天白蛋白:SS组(35.2±3.9)g/L,NN组(28.5±6.2)g/L(P<0.05);前清蛋白(mg/L):SS组(334.3±59.3)g/L、NS组(332.7±48.6)g/L、NN组(298.4±56.1)g/L,SS组、NS组高于NN组(P<0.05)。患者术后第8天总蛋白:SS组(58.3±4.6)g/L、NN组(55.4±3.3)g/L(P<0.05);白蛋白:SS组(34.5±2.9)g/L、NS组(35.4±5.7)g/L、NN组(29.3±7.2)g/L,SS组、NS组高于NN组(P<0.05);前清蛋白:SS组(336.3±37.8)mg/L、NS组(337.6±50.7)mg/L、NN组(286.5±58.9)mg/L,SS组、NS组高于NN组(P<0.05)。患者术后排气时间及住院时间SS组低于NN组(P<0.05)。并发症:腹泻SS组高于NN组(P<0.05)。围手术期给予短肽型肠内营养制剂,改善了患者术后的营养水平,降低了并发症的发生,缩短了住院时间。

CD68和Sema 4D蛋白在胃癌组织中的表达相关性及临床意义

目的:比较肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)标记抗原CD68和轴突导向因子4D(Sema4D)在胃癌组织和正常组织中的表达,探讨两者之间的相关性及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测86例胃癌组织和癌旁正常组织中CD68和Sema4D的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果:胃癌组织中CD68和Sema4D蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(72.1%vs23.3%和74.4%vs29.1%,均P<0.01)。CD68和Sema4D蛋白与胃癌组织分化类型、TNM分期和淋巴结转移明显相关(P<0.05),且两者表达呈正相关(r=0.467,P<0.01)。结论:胃癌组织中CD68和Sema4D表达明显增高,且呈显著正相关,两者的联合检测有助于预测胃癌的发展趋势。

MAPKs信号转导通路在DHA诱导胃癌细胞凋亡中的作用

目的:探讨二十二碳六烯酸(DHA)对人胃癌细胞系SGC-7901的作用及对MAPKs信号转导通路中ERK1/2通路蛋白及凋亡蛋白caspase-3表达的影响。方法:采用MTT法及流式细胞仪技术对细胞增殖和凋亡进行观察和分析;应用Westernblot技术检测不同浓度的DHA诱导胃癌细胞的丝裂原活化蛋白激酶ERK1/2及其磷酸化水平的表达以及其下游通路中凋亡蛋白caspase-3的表达。结果:DHA对于SGC-7901胃癌细胞的增殖有明显抑制作用,呈现时间和浓度依赖性(P<0.01)。DHA可诱导SGC-7901细胞凋亡,凋亡率随DHA的作用浓度增加而增加(P<0.01)。ERK1/2在对照组和不同DHA浓度组稳定表达,且表达无差异;P-ERK1/2活性随DHA作用浓度的增高而降低,差异有统计学意义(P<0.05);caspase-3随着DHA浓度的增高表达不断增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DHA可能通过下调ERK1/2的磷酸化过程,激活凋亡蛋白caspase-3的表达,诱导胃癌细胞的凋亡。

轴突导向蛋白4D在肿瘤发病中的作用及对结直肠癌的意义

轴突导向蛋白4D(Semaphorin4D,Sema4D)是轴突导向蛋白Ⅳ亚族(SemasⅣ)的重要成员之一,包括游离型及膜结合型,研究表明,其在结直肠癌患者的肿瘤生长及转移等方面有重要的生物学功能。介绍Sema4D在结直肠癌中的研究进展。

微生态肠内营养在结直肠癌患者围手术期的应用

目的:探讨微生态肠内营养在结直肠癌患者围手术期应用中的疗效。方法:将90例结直肠癌患者随机分为3组:常规治疗组(RT)、肠内营养组(EN)及添加微生态制剂肠内营养组(EMN)。观察患者术中肠道清洁度以及术后排气时间、吻合口漏、感染情况以及菌群失调情况,并监测手术前后内毒素、CRP、TNF水平变化及淋巴细胞计数改变。结果:术后排气时间EN组及MEN组均早于RT组(P<0.05),而EMN组早于EN组(P<0.05);第1次排便后细菌油镜计数结果示EN组及MEN组均明显低于RT组(P<0.05),而EMN组低于EN组(P<0.05)。术后外周血内毒素及CRP水平EN组及MEN组均低于RT组(P<0.05),而EMN组低于EN组(P<0.05);外周血淋巴细胞计数EMN组较术前有所增加(P<0.05),其他两组无明显变化;TNF水平各组均高于术前水平(P<0.05)。肠腔清洁度、吻合口漏、切口感染率及腹腔感染率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:添加微生态制剂肠内营养能有效防治患者肠道菌群失调,增强机体免疫力,促进肠道功能恢复。

兔肝肿瘤介入栓塞后血清VEGF早期改变的实验研究

目的:探讨对兔VX2肝肿瘤模型进行胃十二指肠动脉介入栓塞术,早期血清VEGF的改变及意义。方法:将40只接种VX2肿瘤组织2周的荷瘤兔随机分为两组:碘油组(n=20)和对照组(n=20),通过超选择插管胃十二指肠动脉分别给予超液化碘油(0.3 mL/只)、生理盐水(1 mL/只)。1周后,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定兔血清VEGF的变化,免疫组织化学法(ABC)检测残余肿瘤组织的蛋白表达,定量PCR检测VEGF mRNA的表达改变。结果 :介入栓塞后,碘油组血清VEGF1.42±0.29 ng/mL,对照组1.12±0.21 ng/mL,二者相比差异有统计学意义(P<0.01)。碘油组残余肿瘤细胞VEGF的表达明显高于对照组(P<0.01),VEGF mRNA表达也高于对照组(P<0.05)。结论:应用碘油介入栓塞兔VX2肝肿瘤术后,残余肿瘤组织表达VEGF明显升高,可作为预测残余肿瘤细胞转移复发的有效指标之一。

腹腔镜结直肠手术学习曲线影响因素分析

目的 :探讨腹腔镜结直肠手术学习曲线影响因素。方法:回顾性分析2006年1月—2009年12月100例腹腔镜结直肠手术的临床资料,固定手术团队,按手术先后次序分为5组,每组20例,以每20例为一手术的学习阶段,比较各阶段的肿瘤部位及分期、手术方式、手术时间、手术频度、中转开腹率、并发症发生率、术后住院时间以及患者术后生存时间等,分析不同阶段的手术类型及近远期手术效果。结果:5组患者在肿瘤部位及分期、手术方式、并发症发生率、中转开腹率及术后生存时间等方面无显著差异,但手术时间、手术频度及术后住院时间存在组间差异。结论:行腹腔镜结直肠手术约40例后,手术技术即可达到较为熟练的状态,手术例数及手术频度是重要影响因素,但手术熟练程度对患者的近、远期疗效无显著影响。

Sema4D蛋白高表达与结直肠癌血管形成和临床进展的相关性

目的:探讨轴突导向因子4D(Semaphorin 4D,Sema4D)在结直肠癌组织中的表达及结肠癌细胞分泌Sema4D对血管形成的影响。方法:采用免疫组织化学SP法检测86例结直肠癌组织和52例正常结直肠组织中Sema4D的表达,并分析其与临床病理特征的关系;单纯血管内皮细胞组为空白对照组,结肠癌Lovo细胞和血管内皮细胞共培养组为实验组,应用ELISA检测2组Sema4D蛋白的表达,并观察其对内皮细胞成管的影响。结果:Sema4D蛋白在结直肠癌组织阳性表达率为60%,在正常结直肠组织中阳性表达率为12%,差异有统计学意义(P<0.05),且Sema4D蛋白表达与组织分化类型、TNM分期和淋巴结转移明显相关(P<0.05),而与年龄、肿瘤大小无关(P>0.05);ELISA检测结果显示,对照组和实验组Sema4D蛋白分别为(663.54±21.59)pg/mL、(1 320.99±28.42)pg/mL(P<0.05);内皮细胞管形成实验显示,对照组和实验组小管数目分别为7.25±1.26、15.25±0.96(P<0.05)。结论:Sema4D蛋白表达与结直肠癌组织分化类型、TNM分期和淋巴结转移相关;Sema4D蛋白促进内皮细胞管形成。

基于人体血液学检测的机器学习辅助泌尿系肿瘤筛查

目的探索应用人工智能机器学习算法单纯基于肝、肾功等血液学检查来辅助筛查泌尿系统肿瘤。方法分别利用支持向量机和神经网络算法对3136例正常人员和泌尿系统恶性肿瘤患者肝肾功数据进行分析,找到肝肾功数据与泌尿系统恶性肿瘤的相关性。结果对于泌尿系统恶性肿瘤通过5次交叉验证的最优平均分类准确率达到了92.05%,支持向量机与神经网络算法结果基本一致。结论机器学习算法可以单纯通过肝、肾功等血液学检测分类正常人和泌尿系统恶性肿瘤患者,表明该方法有望成为一种泌尿系统肿瘤辅助筛查手段。

细胞密度调节结肠癌细胞整合素ανβ6表达——癌细胞永生化侵袭生长机制的研究

目的:探讨细胞高密度和细胞挤压状态对结肠癌细胞表面整合素ανβ6表达的影响效果,探讨结肠癌细胞永生化侵袭生长的机制。方法:用流式细胞术检测结肠癌细胞系WiDr、SW480细胞株和人正常角质细胞系HaCaT细胞株,在高低密度培养条件下各细胞表面的ανβ6表达水平;同时将100例结肠癌标本高细胞密度易侵袭的肿瘤边缘部分及低细胞密度的肿瘤中心部分制作成200点的组织芯片,用免疫组织化学方法检测整合素ανβ6在结肠癌不同部位的分布和表达差异。结果:表达ανβ6的结肠癌细胞出现细胞密度依赖的ανβ6表达增加,而缺乏ανβ6表达的癌细胞和正常角质细胞系HaCaT细胞在高低密度培养条件下ανβ6表达没有改变。组织芯片免疫组织化学检查结果显示结肠癌ανβ6阳性表达率为38%,在癌细胞密度高、细胞拥挤的肿瘤边缘部分ανβ6高表达占73.7%(28/38),且ανβ6密布于肿瘤侵袭边缘,而肿瘤中央组织以ανβ6低表达为主,高表达仅占28.9%(11/38)。结论:细胞高密度和细胞挤压状态诱导癌细胞ανβ6表达可能是构成结肠癌细胞永生化侵袭性生长的基础。

肿瘤相关巨噬细胞和Sema4D与胃癌浸润转移的关系

目的:研究肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)对人胃癌SGC-7901细胞系生物学功能的影响。方法 :采用佛波酯(PMA)、白细胞介素IL-4和IL-13体外诱导人M2型巨噬细胞,细胞免疫荧光鉴定TAMs。Transwell非接触式共培TAMs和胃癌SGC-7901细胞,侵袭实验、迁移实验检测肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)对胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移的影响,酶联免疫吸附法(ELISA)检测实验组和空白对照组胃癌SGC-7901细胞上清中分泌型Sema4D的变化。结果:细胞免疫荧光鉴定M2型巨噬细胞诱导成功;在Transwell共培养体系中,TAMs共培养的胃癌SGC-7901细胞形态学发生改变;Transwell侵袭实验、迁移实验表明,细胞侵袭转移力增强(P<0.01)。与TAMs共培养的胃癌SGC-7901细胞的上清液分泌型Sema4D蛋白明显增多,较空白对照组差异有统计学意义(1224.13±29.43比637.15±33.84,P<0.01)。结论 :TAMs可促进胃癌细胞的浸润转移,其原因可能与分泌型Se m a4D蛋白的表达上调有关。

基于尿常规的机器学习辅助泌尿系统肿瘤筛查

目的探索利用机器学习基于尿常规检查结果的数据,进行辅助筛查泌尿系统肿瘤。方法利用PTSVM算法对500位正常人和408位泌尿系统疾病患者的尿常规数据进行分析,找到其与泌尿系统恶性肿瘤的相关性。结果对于泌尿系统恶性肿瘤,通过5次交叉验证,机器学习的最优平均分类准确率达到了85. 78%。结论 PTSVM算法可以通过尿常规检查数据区分正常人和泌尿系统恶性肿瘤患者,表明该方法有望成为一种泌尿系统肿瘤辅助筛查手段。

大肠癌组织中TGF-β1和HIF-1α和VEGF的表达及其临床意义

目的:通过检测转化生长因子β1(TGF-β1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在大肠癌及癌旁组织中的表达情况,探讨其临床意义和预后价值。方法:采用免疫组织化学法检测100例大肠癌及相应的癌旁组织中TGF-β1、HIF-1α和VEGF的表达,分析其表达与大肠癌临床病理特征及预后的关系。结果:1)TGF-β1、HIF-1α和VEGF在大肠癌组织中阳性率分别为63%、59%和63%;在癌旁组织中阳性率分别为11%、22%和13%,三者在大肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。2)TGF-β1的表达与肿瘤的浸润深度明显相关(P<0.05);HIF-1α、VEGF的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期明显相关(P<0.05)。3)TGF-β1、HIF-1α与VEGF在大肠癌组织中的表达呈正相关(P<0.05、P<0.01);生存单因素分析显示HIF-1α、VEGF均与患者的预后有关(P均<0.05)。结论:大肠癌组织中TGF-β1、HIF-1α、VEGF表达与肿瘤的生物学特征密切相关,可能是肿瘤侵袭转移的机制之一;联合检测TGF-β1、HIF-1α、VEGF对预测肿瘤侵袭转移及判断预后具有一定价值。

右美托咪定复合乌司他丁对老年急腹症患者术后肺功能的影响

目的:观察术中应用右美托咪定复合乌司他丁对老年急腹症患者术后肺功能的影响。方法:选择山东省立医院收治的老年急腹症患者急症手术80例,分为4组:对照组(C组)、右美托咪定组(D组)、乌司他丁组(U组)和右美托咪定复合乌司他丁组(D+U组),所有患者分别于术前1 d,术后1、3及5 d行动脉血气分析,计算氧合指数,并测定血清TNF-α和IL-8的浓度。记录术后拔管时间,ICU带管时间、ICU治疗天数、总的住院时间及术后肺部并发症及死亡率。结果:(1)T0时4组氧合指数差异无统计学意义(P>0.05),而T1、T2和T3时,D+U组较D组、U组及C组,明显升高(P<0.05),D组和U组较C组升高(P<0.05);(2)血清TNF-α及IL-8的浓度,T0时4组间差异无统计学意义(P>0.05),而T1时,D+U组较D组、U组及C组明显升高(P<0.05),D组和U组也高于C组(P<0.05)。T2时D+U组较D组、U组及C组,明显升高(P<0.05),U组低于C组(P<0.05);(3)术后带管时间,ICU治疗时间和住院天数,D+U组较D组、U组及C组,明显缩短(P<0.05),而D组和U组较C组也减少(P<0.05)。术后肺部并发症(肺不张,肺感染等)D+U组(18%)低于C组(26%)、D组(32%),U组(38%,P<0.05)。结论:老年急腹症患者术中联合应用右美托咪定和乌司他丁可减轻术后炎症反应,对术后肺功能有保护作用。

TGF-β和HIF-1与肿瘤关系的研究进展

转化生长因子β(TGF-β)是一种功能广泛的多肽类细胞因子,在调节细胞的增殖、分化和迁移中发挥重要作用。缺氧诱导因子(HIF)是在低氧环境下维持氧稳态的核心转录因子,能使许多蛋白质合成增加,促进肿瘤新生血管的形成,增强肿瘤的侵袭性。近年来的研究发现,TGF-β和HIF-1的表达异常与肿瘤的发生发展密切相关,并在肿瘤的侵袭转移过程中起着重要作用。就其研究进展作一综述。

加速康复外科在腹腔镜结肠次全切除联合改良Duhamel手术围术期的应用

目的:通过腹腔镜结肠次全切除联合改良Duhamel手术治疗慢传输型便秘(STC),研究围手术期加速康复外科(ERAS)应用的安全性和有效性。方法:回顾性分析2014年1月-2018年1月期间27例重度慢传输型便秘,进行腹腔镜结肠次全切除联合改良Duhamel手术,随机分为两组:加速康复组(ERAS组)12例按加速康复外科理念进行围手术期治疗,对照组15例按传统理念行围手术期治疗。对两组结果进行比较并对分析。结果:ERAS组的离床时间、肠道功能恢复时间、自行排尿时间、进流食时间、术后营养状态较对照组均显著提前,术后住院时间缩短(P<0.05)。术后不良反应发生率ERAS组3例,对照组4例。结论:ERAS技术的应用能加速慢传输型便秘手术患者的术后康复。

靶向ING1基因的miR-622真核表达载体在胃癌细胞MKN-45中的鉴定及其功能

目的:研究构建靶向ING1基因的miR-622真核表达载体并验证其转染人胃癌细胞株MKN-45细胞后对ING1基因的干扰效果及其功能.方法:将外源性重组真核表达载体pSuper/miR-622转染到人胃癌细胞株MKN-45内,经G418筛选并建立高表达miR-622的稳定转染胃癌细胞株.稳定表达该miR-622的胃癌细胞为:MKN-45-pSuper/miR-622组,转染空质粒细胞及未处理细胞为对照组(MKN-45-pSuper组和MKN-45组),采用实时荧光定量PCR验证miR-622在稳定转染细胞的表达,蛋白印迹检测其对ING1基因表达的干扰效果,通过细胞增殖和周期实验验证miR-622在胃癌细胞MKN-45中的功能.结果:与pSuper空载体组相比,转染了pSuper/miR-622高表达质粒的MKN-45细胞中ING1蛋白表达明显减少,降低了4.63倍(1.83±0.86vs8.47±1.43,P<0.05);与转染pSuper空载体的MKN-45细胞对照组相比,转染了pSuper/miR-622高表达质粒的MKN-45细胞地促进了胃癌细胞增殖(P<0.05),而转染了pSuper空载体的MKN-45细胞组与正常组组间无统计学意义(P>0.05).pSuper/miR-622组在胃癌细胞G0/G1期为21.45±0.16而pSuper空载体组48.21±0.34;pSuper/miR-622组在胃癌细胞G2/M期为53.67±0.41而pSuper空载体组20.27±0.18,与pSuper空载体组细胞相比较,miR-622的高表达促进了胃癌细胞周期的演化.结论:miR-622真核表达载体构建和稳定表达胃癌细胞筛选成功,为继续深入的研究miR-622在胃癌中的功能奠定了基础.