司美格鲁肽对糖尿病心肌病机制及作用研究进展

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy, DCM)是糖尿病的一种慢性并发症,主要以心力衰竭为临床表现,是糖尿病患者致死的主要原因之一。但是目前还没有特定的治疗方案。最近几年,胰高血糖素样肽-1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonist, GLP-1RA)在治疗糖尿病方面受到了广泛的关注,其中长效的GLP-1RA司美格鲁肽可以有效保护心血管系统。本文将对司美格鲁肽在糖尿病心肌病发病机制的作用及临床应用进行综述。

司美格鲁肽对高糖诱导的心肌成纤维细胞增殖的作用研究

目的探讨司美格鲁肽对高糖诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖中的作用,及其可能的机制。方法取原代小鼠CFs,通过CFs的特异性抗体波形蛋白Vimentin鉴定后进行下一步实验。以25 mmol·L^(-1)葡萄糖刺激细胞增殖,5~20 nmol·L^(-1)司美格鲁肽进行干预,并筛选浓度。分别设置正常组:含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖DMEM;高糖组:25 mmol·L^(-1)葡萄糖;司美格鲁肽组:25 mmol·L^(-1)葡萄糖+10 nmol·L^(-1)司美格鲁肽。应用Cell Cycle Staining Kit检测细胞周期;RT-qPCR方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1、Smad3的mRNA表达变化;用ELISA检测Ⅰ型胶原(CoLⅠ)和Ⅲ型胶原(CoLⅢ)。结果与对照组相比,高糖诱导的CFs增殖明显增强(P<0.05),细胞周期中S期细胞比例增加;与高糖组相比,司美格鲁肽抑制了CFs的增殖(P<0.05),减少CFs细胞周期中S期细胞比例。与对照组相比,高糖组α-SMA、CoLⅠ、CoLⅢ显著增加(P<0.01);与高糖组相比,司美格鲁肽组α-SMA、CoLⅠ、CoLⅢ显著减少(P<0.01)。与对照组相比,高糖组TGF-β1、Smad3显著增加(P<0.01);与高糖组相比,司美格鲁肽组TGF-β1、Smad3显著减少(P<0.01)。结论司美格鲁肽可以抑制高糖诱导的CFs增殖和胶原蛋白的合成,进而发挥抗心肌纤维化的作用,其机制可能与下调TGFβ/Smad3信号通路有关。

2型糖尿病相关射血分数保留的心力衰竭的发病机制及治疗研究进展

射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)是一种特殊类型的心力衰竭,近年来受到广泛关注。2型糖尿病(T2DM)是HFpEF的独立危险因素之一,可能通过介导炎症反应、氧化应激、纤维化、内皮功能障碍等机制影响HFpEF的发生发展。近年来,T2DM以及T2DM合并HFpEF的患病率逐年升高,但目前缺乏有效的HFpEF循证治疗,患者预后较差。新型降糖药物钠-葡萄糖共转运体2抑制剂和胰高血糖素样肽-1受体激动剂可使T2DM相关HFpEF患者获得显著的心血管益处,有望成为未来治疗HFpEF的主要药物。因此,深入研究T2DM与HFpEF之间的关系及病理机制,将为其临床治疗提供理论依据。

内吗啡肽及μ阿片受体mRNA在“泻剂结肠”大鼠结肠神经丛中的表达及意义

目的观察内吗啡肽(EM)及μ阿片受体mRNA在"泻剂结肠"大鼠结肠神经丛表达和分布,以进一步明确慢传输性便秘(slow tran-sit constipation,STC)的发病机制和病理生理变化。方法建立"泻剂结肠"大鼠动物模型,应用免疫组化法和图像分析系统观察结肠神经丛内EM免疫反应阳性细胞分布和数量变化,用原位杂交法测定结肠中μ阿片受体mRNA的表达水平。结果与对照组相比,泻剂组结肠肌间神经丛EM阳性细胞数量明显增多(10.319±1.612vs7.683±1.359,P<0.05),μ阿片受体mRNA的表达增强(0.3034±0.0651vs0.1823±0.0150,P<0.01),远端结肠尤甚。结论EM及其受体参与结肠动力的调控,肠神经递质及受体的异常可能是STC发病的一种重要因素,提示长期应用刺激性泻剂可损伤肠神经系统,导致肠动力异常,加速STC的病理生理变化。

内吗啡肽1对泻剂结肠大鼠肠道传输功能的影响

目的研究内吗啡肽(EM)对泻剂结肠大鼠结肠传输功能的影响,探讨慢传输性便秘(STC)的发病机制。方法建立大鼠“泻剂结肠”模型,采用活性炭悬液推进法测定肠道传输功能。结果与对照组相比,泻剂结肠组的传输功能明显减慢,内吗啡肽1(EM1)对泻剂结肠传输功能产生浓度相关的抑制作用,纳洛酮能减弱EM1的抑制作用。结论EM1参与了泻剂结肠动力的调控,是STC的重要致病因素之一。

内吗啡肽在糖尿病大鼠胃神经丛中的分布及其意义

目的观察糖尿病(DM)大鼠胃排空功能和内吗啡肽(endomorphin,EM)在胃神经丛表达和分布,以进一步明确DM胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)的发病机制和病理生理变化。方法建立DM大鼠动物模型,应用放射性核素标记的胃排空法,免疫组化法观察胃排空功能和胃神经丛内EM免疫反应阳性细胞分布和含量变化。结果与对照组和DM胃功能正常组(DM组)相比,DGP组胃排空明显减慢(P<0.05),胃半排空时间(GET1/2)(min)和胃排空率(%)分别为(124.0±20.2)min、(25.18±8.74)%,胃肌间神经丛和黏膜下神经丛EM阳性细胞数量明显增多(P<0.05),而对照组和DM组无差异。结论EM参与胃肠动力的调控,肠神经系统及其递质的异常可能是DGP发病的一种重要因素。

通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾功能及肾组织MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的:观察通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾功能及肾组织降解酶系MMP-9、TIMP-1及细胞外基质成分FN、ColⅣ表达的影响,探讨通心络防治DN的作用机制。方法:采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病模型、随机分为模型组、通心络组、西药组各16只,设立C57BL/6J小鼠16只为空白组,予通心络及缬沙坦干预12周后,测定空腹血糖(FPG)、24h尿微量白蛋白排泄率(UAER),糖化血红蛋白(HbA1c)、血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)含量,采用WesternBlot及Realtime-PCR方法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白及基因表达水平,采用免疫荧光方法检测纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ胶原(Col-Ⅳ)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠24hUAER、BUN、SCr、FPG、HbA1c均明显升高(P<0.05),肾组织TIMP-1、FN、ColⅣ表达明显升高、MMP-9表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,经通心络及缬沙坦干预后FPG及HbA1c无明显变化(P>0.05),24hUAER、BUN、SCr显著降低,肾组织TIMP-1、FN、ColⅣ表达降低、MMP-9表达升高(P<0.05)。结论:通心络可降低自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠尿白蛋白、保护肾功能,调控降解酶系MMP-9/TIMP-1表达抑制细胞外基质沉积是其作用机制之一。

糖肾宁对糖尿病肾病大鼠肾组织nephrin、desmin表达的影响

目的探讨糖肾宁对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾小球足细胞损伤的影响。方法8周龄SPF级雄性SD大鼠46只,随机选择10只为对照组,其余大鼠予大剂量STZ腹腔注射建立糖尿病模型。其中34只大鼠血糖≥16.7 mmol/L视为糖尿病模型建立成功,随机分为模型组、缬沙坦组、糖肾宁组,予糖肾宁及缬沙坦干预12周,测定空腹血糖、血清尿素氮、血清肌酐、24小时尿蛋白,足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin、骨架蛋白desmin的蛋白或基因表达。结果与对照组比较,模型组大鼠空腹血糖、血清尿素氮、血清肌酐、24小时尿蛋白均明显升高(P<0.05),desmin蛋白、基因表达上调(P<0.05)、nephrin mRNA表达下调(P<0.05);与模型组比较,糖肾宁、缬沙坦干预后,desmin蛋白、基因表达下调(P<0.05)、nephrin mRNA表达上调(P<0.05),血清尿素氮、血清肌酐、24小时尿蛋白显著降低(P<0.05),但血糖无明显变化。结论糖肾宁干预链脲佐菌素诱导的糖尿病肾病大鼠可减少肾小球足细胞损伤,降低蛋白尿、保护肾功能。

胃排空延迟与胃中间横带关系及作用机制研究

目的研究功能性消化不良(FD)胃排空延迟与胃中间横带(MTB)关系及作用机制。方法以MTB为界,将胃分为近端与远端胃,应用SPECT技术检测了60例FD患者,50例正常健康者(HS)及15例正常大剂量摄入志愿者的胃排空、面积、食物在胃内的分布。结果FD组排空延迟,残留率增加;正常大剂量组半排时间延长,MTB面积增大;FD组远端胃及MTB面积自始至终大于HS组,其胃内分布以远端明显。结论胃排空延迟与MTB面积增大有关;食物在远端胃的分布与潴留可引起消化道症状;MTB直接控制食物在胃内的转运、分布及排空,其作用类似心脏的房室瓣。

老年慢性心力衰竭并亚临床甲减应用小剂量左旋甲状腺素替代治疗的临床观察

目的探讨小剂量左旋甲状腺素对老年慢性心力衰竭并亚临床甲减心功能的影响。方法18例老年慢性心力衰竭并亚临床甲减患者,从12.5μg/d开始予口服左旋甲状腺素,缓慢增加剂量,使血清促甲状腺素介于4～6mIU/L,观察1年。结果服药12月时与服药前比较,超声心动图检查左室舒张末内径、左室收缩末内径明显缩小,射血分数明显增加,差异有显著性;服药6、12月与治疗前比较,室速、室性早搏均明显减少,差异有统计学意义;血压、心率无明显变化。结论小剂量左旋甲状腺素能明显改善老年心衰并亚临床甲减患者的心功能,增加射血分数,减少室速、室性早搏的发生。

芪卫颗粒调节KK-Ay小鼠肾组织USF2表达对肾纤维化的干预研究

目的探讨芪卫颗粒对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾组织USF2表达的影响及对DN肾纤维化的干预机制。方法将SPF级12周龄雄性KK-Ay小鼠60只造模后随机分为模型组、芪卫颗粒组、缬沙坦组,20只C57BL/6J小鼠为正常对照组。24周龄时,检测各组血糖、糖化血红蛋白、肾功能(BUN、SCr)、尿蛋白;用光镜和电镜观察肾组织的结构变化,Masson染色观察肾脏纤维化程度;RT-PCR检测肾组织中USF2、TGF-β_1的mRNA表达,Westernblot检测USF2蛋白表达,免疫组化染色观察TGF-β_1、Col-Ⅳ、FN在肾脏中的表达及分布情况。并用图像定量分析系统进行统计分析。结果 (1)与正常对照组比较,模型组肾组织中USF2和TGF-β_1的mRNA表达明显升高,免疫组化显示模型组TGF-β_1、ColⅣ、FN在肾小球和肾小管表达均明显增加,纤维化程度明显加重,肾功能减退(P<0.05)。(2)与模型组比较,芪卫颗粒组和缬沙坦组肾功能和尿蛋白得到改善,肾脏纤维化减轻,USF2和TGF-β_1基因及纤维化蛋白水平表达均显著降低(P<0.05)。(3)相关分析表明,USF2与TGF-β_1呈正相关(r=0.82,P<0.05)。结论 (1)USF2正向调节TGF-β_1表达,刺激TGF-β_1所调节的下游纤维化蛋白ColⅣ、FN表达增加,导致细胞外基质积聚。(2)芪卫颗粒下调KK-Ay小鼠肾组织USF2基因和蛋白表达,负向调节TGF-β_2表达,可能是其治疗DN肾纤维化的机制之一。

微小RNA-21在感染性早产胎盘组织中的表达及意义

目的通过观察微小RNA-21(mi R-21)在孕鼠胎盘组织的表达,探讨感染性早产的发病机制。方法建立脂多糖诱导的感染性早产模型。孕鼠随机分为对照组、模型组和干预组。对照组腹腔注射生理盐水0.1 m L,模型组腹腔注射脂多糖0.1 m L,干预组腹腔注射脂多糖0.1 m L+20 mg/kg mi R-21模拟物(化学合成的mi R-21)。应用实时荧光定量PCR检测各组胎盘组织中mi R-21的表达,用生物信息学分析方法预测mi R-21的靶点,用免疫组织化学法检测胎盘组织中核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达。结果与对照组比较,mi R-21表达在模型组胎盘组织中显著降低,而NF-κB蛋白表达明显升高(P<0.05)。NF-κB是mi R-21的预测靶点,mi R-21模拟物能够下调胎盘绒毛膜组织中NF-κB蛋白表达。结论 mi R-21表达缺失可能参与了感染性早产的发病机制,对以后设计以mi R-21为靶点的特异性药物可能有重要的意义。

中西医结合治疗对尿微量白蛋白排泄的影响

目的观察以血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)加益气养阴、活血化瘀中药对非肾脏疾病早期肾损害患者尿微量白蛋白排泄的影响。方法入选糖尿病伴早期糖尿病肾病、高血压病及冠心病伴早期肾损害三组患者195例,再将各组随机分为二个亚治疗组,分别给予ACEI及ACEI加中药治疗。结果糖尿病组、高血压病组及冠心病组患者24h尿微量白蛋白排泄量(UAE)高于正常老年对照组(P<0.01),亚组1经ACEI治疗后,尿微量白蛋白排泄率(UAER)均有不同程度下降(P<0.01或P<0.05)。亚组2经ACEI加中药治疗后,UAER比亚组1降低(P<0.05)。结论ACEI加益气养阴、活血化瘀中药能有效减少糖尿病肾病、高血压病及冠心病早期肾损害患者尿蛋白排出,延缓肾损害进展,中西医结合治疗效果优于单纯ACEI治疗。

盐酸小檗碱对大鼠非酒精性脂肪性肝病的干预

目的探讨盐酸小檗碱对大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的干预效果和可能作用机制。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组(n=10)和造模组(n=30),正常对照组给予普通饲料,造模组给予高脂肪饲料(77.5%基础饲料、10%蛋黄粉、10%猪油、2%胆固醇、0.5%胆酸钠)。喂饲12周,成功复制NAFLD大鼠模型。将造模组大鼠随机分为模型对照组(n=9)、多烯磷脂酰胆碱组(n=9)和盐酸小檗碱组(n=9)。药物干预4周后,称量大鼠肝脏湿重和附睾脂肪、肾周脂肪及内脏脂肪的重量;测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、空腹血糖(FPG)、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等各项生化指标;采用放射免疫法测定空腹血清胰岛素(FINS)含量;光学显微镜下观察肝细胞脂肪变性程度。结果与模型对照组比较,盐酸小檗碱组大鼠的附睾脂肪及肾周脂肪重量显著降低,AST、ALT、FPG、LDL-C下降,FINS、稳态模式评估法胰岛素抵抗指数下降,肝脏脂肪变性程度减轻。结论盐酸小檗碱通过改善高脂肪饲料诱导NAFLD大鼠的胰岛素抵抗而发挥治疗NAFLD的作用。

先天性肾性尿崩症家系研究

目的探讨AVPR2基因突变所致先天性肾性尿崩症一家系的临床特征,提高对先天性肾性尿崩症的认识。方法收集先证者及其家系成员病史和外周血标本,通过生化检查、禁水—加压素试验、磁共振成像和基因检测,确诊为X-连锁隐性先天性肾性尿崩症。结果基因检测发现该家系AVPR2基因第2外显子存在1处突变,为c.1009C>T(p.R337X)无义突变,该位点突变致先证者、其弟和母亲都有尿崩症的临床表现。结论多尿、多饮及低比重尿是先天性肾性尿崩症的临床特征,基因检测可以精准诊断,并可指导优生优育。

老年不稳定心绞痛患者硝酸酯类制剂偏心性给药有效性及安全性临床探讨

目的观察老年不稳定心绞痛患者硝酸酯类制剂偏心性给药的有效性及安全性方法。方法观察年龄60～80岁不稳定心绞痛男性患者50人,按就诊顺序以1：1的方式将其随机编入莫诺确特组：硝酸甘油持续静脉泵入48小时后停药改口服莫诺确特50 mg于晨6点一次给药;苯磺酸氨氯地平组：硝酸甘油持续静脉泵入48小时后改为白天持续泵入8小时,睡前服用苯磺酸氨氯地平2.5～5 mg。观察2组患者停用硝酸甘油后24～72小时心绞痛发作、心电图及偏心性给药后第24、48、72小时0～3点血压、心率等情况并记录。结果在硝酸酯制剂偏心性治疗24～72小时后心绞痛的发作次数、时间,2组间无显著性差异（P〉0.05）;72小时六分钟步行试验心电图改善有效率比较,无显著性差异（P〉0.05）;偏心性给药后24、48、72小时0～3点收缩压、舒张压、心率之间比较,无显著性差异（P〉0.05）。结论在对老年男性不稳定心绞痛患者进行的硝酸酯类制剂偏心性治疗,无论是莫诺确特50 mg/d给药,还是白天持续静脉滴注硝酸甘油8小时、睡前口服苯磺酸氨氯地平2.5～5mg,均安全、有效。

糖络宁对糖尿病大鼠坐骨神经能量代谢和神经传导速度的影响

目的:观察糖络宁(TLN)对糖尿病大鼠坐骨神经能量代谢和神经传导速度(NCV)的影响。方法:链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型并随机分为模型组和TLN组,另设正常对照组。TLN干预8周,检测坐骨神经MNCV和ATP、Pcr、Cr含量。结果:模型组与正常对照组比较,MNCV显著减慢,Pcr含量以及Pcr:Cr明显减低(P<0.05)。TLN组与模型组比较,MNCV和Pcr含量以及Pcr:Cr显著升高(P<0.05)。结论:TLN能够改善坐骨神经能量代谢,加快NCV,从而发挥其神经保护作用。

芪卫颗粒对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾组织转化生长因子β_1蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨芪卫颗粒对KK-Ay小鼠肾组织TGF-β1蛋白及mRNA表达的影响。方法采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠模型。将KK-Ay小鼠随机分为模型组、中药组、西药组,以C57BL/6J小鼠作为正常组,每组15只,连续治疗12周,用HE、PAS及Masson染色法观察肾脏病理改变。采用免疫组织化学法及实时荧光定量PCR法,检测肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白及mRNA表达。结果模型组小鼠肾脏病理改变呈现肾小球肥大,系膜基质区增宽,系膜细胞增多,肾小管上皮细胞空泡样变性,肾小管扩张,灶状萎缩,偶见坏死,可见较多蛋白管型,间质内炎性细胞浸润,间质纤维化表现。肾脏细胞内的TGF-β1的蛋白及mRNA表达较正常组明显增多。经芪卫颗粒、缬沙坦处理后,小鼠肾脏病理改变较模型组明显减轻,TGF-β1的蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论芪卫颗粒可通过抑制TGF-β1的蛋白及mRNA表达起到防治糖尿病肾病的作用。

老年男性高血压并2型糖尿病患者服用安搏诺的临床观察

目的观察老年男性高血压并2型糖尿病患者服用安搏诺的有效性及安全性。方法观察56例老年男性高血压并2型糖尿病患者用药前、用药后1个月、用药后6个月的收缩压、舒张压、尿微量白蛋白、空腹血糖、糖化血红蛋白、血尿酸、尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血钾、血钠等生化指标并记录。为避免首次服药后血压迅速下降引起脏器低灌注,前3天口服安搏诺75 mg,1次/日,以血压达130～140/70～85 mmHg为标准,以后逐渐增加剂量,在血压递增过程中若血压低于100/60 mmHg,则返回至上次剂量,并以该剂量为此患者的以后剂量,连续服药半年。结果与服药前比较,患者服用安搏诺6个月时,收缩压、舒张压、尿微量白蛋白均较服药前明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);空腹血糖、糖化血红蛋白、尿素氮、血肌酐虽然较服药前下降,但差异无统计学意义(P>0.05),总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血钾、血钠基本同服药前,差异无统计学意义(P>0.05)。56例患者中服药期间发生轻度头痛6例(10.7%),乏力8例(14.3%),但都不需减量或停药。结论老年男性高血压并2型糖尿病患者服用安搏诺(75～150 mg,1次/日),副作用少且多能耐受,是安全可行的。

小剂量盐酸苯那普利对非高血压老年男性2型糖尿病合并慢性心衰患者血压的影响

目的小剂量盐酸苯那普利对非高血压老年男性2型糖尿病合并慢性心衰患者血压的影响。方法选取30例2型糖尿病合并慢性心力衰竭患者,平均年龄（79.0±6.9）岁,予盐酸苯那普利2.5 mg 1次/日,每1小时记录一次血压、心率,连续3天。结果 6小时、24小时与基础血压比较,收缩压、舒张压均有所下降（P〈0.001）;24小时与6小时血压比较,收缩压、舒张压有所升高（P〈0.01）。与服药前相比,24小时内血压均有所下降,以收缩压下降明显;服药后心率有所减慢,但差异无统计学意义。结论对非高血压老年男性2型糖尿病合并慢性心衰患者给予盐酸苯那普利治疗时,应以小剂量开始。