鱼类培养细胞干扰素的诱导

对紫外线灭活的草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ）Ｆ９株，在几种鲤科鱼类培养细胞中诱导产生干扰素的能力及影响干扰素产量的各因素进行了研究。纯化的ＧＣＨＶ在紫外线照射５分钟丧失感染性，但获得了在ＣＡＢ等５种鲤科鱼类培养细胞中高效诱导产生干扰素的能力。干扰素的诱导需要病毒高复数感染细胞。干扰素主要在诱导后１４小时内产生。培养上清中的新生牛血清对干扰素的产量有抑制作用，而在ｐＨ６．２～７．８范围内对干扰素产量无明显影响。诱导温度和细胞年龄对诱导产量有明显的影响。用紫外线灭活的ＧＣＨＶ在鱼类培养细胞中诱导干扰素时，放线菌素Ｄ具有超诱导作用，同种干扰素具有启动效应。本研究为鱼类干扰素的进一步研究及其基因克隆奠定了基础。

稀有鮈鲫对草鱼出血病病毒敏感性的初步研究

本文报道稀有鲫对草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ）的敏感性。ＧＣＨＶ是草鱼出血病的病原，用ＧＣＨＶ人工感好１－６月龄的稀有鲫，在水温２２－３２℃时能导致稀有鲫出现出血病症状。在水温２８℃时，病鱼在ｌｄ内死亡，潜伏期为５ｄ，发病高峰期在感染后第６－８ｄ。ＧＣＨＶ能在稀有鲫体内传代，并诱导８０％以上的稀行鲫患病死亡。将人工感染ＧＣＨＶ的稀有鲫病鱼组织超薄切片，电镜观察，发现在肠道、脾脏、肾脏等组织中存在大小与形态和ＧＣＨＶ相似的病毒颗粒。从稀有鲫出血病病鱼组织中纯化病毒，免疫电镜观察，发现病毒颗粒能被ＧＣＨＶ的特异性抗体聚集成团。由上可知，稀有鲫出血病是由ＧＣＨＶ感染所致，稀有鲫对ＧＣＨＶ是敏感的，可以作为草鱼抗出血病育种的模型。

草鱼出血病病毒人工感染稀有(鱼句)鲫出血病鱼主要器官组织的超薄切片观察

用电子显微镜观察了稀有(鱼句)鲫出血病(Hemorrhage of Gobiocypris rarus)鱼的病理切片及对照鱼的超薄切片。在对照鱼的鳃、肠道、肾脏、脾脏、肌肉和肝脏中没有见到任何病毒颗粒。在病鱼鳃血管内皮细胞质中观察到聚集的直径70nm左右的GCHV颗粒,说明鳃是GCHV侵袭的主要器官之一,并讨论了鳃对GCHV敏感在GCHV传播中的意义。还在病鱼肠道,肾脏中观察到成片的病毒颗粒,它们也是GCHV侵袭的主要组织。在病鱼脾脏的电子密度低的细胞质中观察到散在的病毒颗粒。很少见到病毒聚集体,脾脏中的病毒可能是脾脏的吞噬细胞吞噬而来。作者认为在病鱼组织中观察到的大小不同的病毒颗粒是处于不同成熟阶段的GCHV。

用逆转录聚合酶链式反应检测草鱼出血病病毒的研究

于1994年5月-1995年7月，根据已克隆的草鱼出血病病毒GCHV-861株cDNA的部分序列，设计合成了两对PCR引物，采用RT-PCR技术对GCHV-861及GCHV-873两病毒株的dsRNA进行扩增。结果表明，两对引物仅能特异地检测出GCHV-861病毒株核酸的存在，而不能对GCHV-873病毒株的核酸进行特异扩增，该方法最小可检测出0.1Pg纯化的GCHV-861病毒dsRNA;采用该方法对GCHV-861人工感染的草鱼和稀有鲫组织进行RT-PCR检测，不仅能检测到发病期显症病鱼中GCHV-861病毒的存在，还能检测发病前期及愈后无出血病症状的病毒携带者中病毒的存在;利用该方法还从本所关桥实验场出血病流行季节收集的发病草鱼体内检测出GCHV的存在，说明所设计的引物具有一定的实际意义;利用该法还能检测出感染病毒的组织培养细胞系GCK和CIK上清液中GCHV的存在。还建立了简易的模板制备方法，采用该方法整个检测过程只需3-4h，可大大缩短检测时间。由此可见，RT-PCR技术是检测GCHV的快速、灵敏而特异的方法，发展和完善该技术对草鱼出血病的早期诊断和防治、抗病育种具有重要意义。

55例干眼症患者的中西医护理体会

目的:探讨干眼症患者的中西医护理方法。方法:对笔者所在医院收治的55例干眼症患者进行有效的、系统的中西医护理。结果:55例患者眼部不适等感觉和症状均得到明显的改善,生活质量得以提高。结论:积极有效的中西医护理对于干眼症患者病情的恢复具有重要的作用。

草鱼出血病病毒的研究进展

根据80－90年代中国关于草鱼出血病病毒研究的进展，就草鱼出血病病毒的发现、形态结构特征、理化特性、基因组结构及其所编码的多肽、基因组的转录和翻译过程，病毒的繁殖动态、体外细胞培养特性，病毒对鱼体的致病机理和宿主范围，草鱼出血病的诊断和防治等问题进行综合评述，总结概括了草鱼出血病病毒的研究现状以及研究中需要亟待解决的问题，并提出该领域以后的重点研究方向。

干扰素防治草鱼出血病的效果初探

对人工诱导的鲫鱼干扰素防治草鱼出血病的效果进行了初步探讨。结果表明 ,人工诱导的鲫鱼干扰素确能有效防治草鱼出血病 ,腹腔注射和药浴浸泡两种途径均有一定效果。在病毒感染前使用干扰素处理的效果好于在病毒感染后使用干扰素处理。

总DNA介导鱼类基因转移的初步研究

自七十年代我国开始将外源总DNA转移技术应用于棉花和水稻品种改良的研究中,但至今尚未见有关鱼类总DNA转移成功的报道。本实验采用显微注射和精于载体的方法将鲫鱼肝总DNA转移到红鲤受精卵,利用鯽鱼和红鲤在孵化前后色素表达的差异来筛选转移基因个体。此方法无需克隆目的基因及DNA重组操作,而且筛选简便,目的在于探讨总DNA转移方法应用于鱼类品种改良的可能性。

应用逆转录聚合酶链反应直接检测草鱼出血病病鱼组织的研究

人工感染GCHV－861后，对处于潜伏期、发病期和恢复期等不同时期的草鱼内脏组织匀浆上清液进行逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）扩增，除恢复期的1条草鱼外，其余样品均得到特异扩增带，而对照组都没有，预示着RT－RCR技术对于草鱼出血病的早期诊断、防治及抗病有种具有重要意义。另外，对于显症出血病草鱼的肝、肾、脾、鳃、肌肉和肠道等组织器官进行检测，结果都为阳性，首次证实了GCHV存在于肝脏中，并对此作了进一步的讨论。

两种草鱼出血病病毒株的比较

草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ）是我国分离成功的第１种鱼类病毒，隶属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属（Ａｑｕａｒｅｏｖｉｒｕｓ）［７，１４］。ＧＣＨＶ是草鱼出血病的病原体，可导致当年龄草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｈｕｓ）鱼种大批死亡［５，８...

鲫鱼囊胚细胞干扰素的诱导及部分特性

用紫外线灭活的草鱼呼肠孤病毒 (GCRV)诱导鲫鱼囊胚细胞 (CAB)能产生一种高滴度的抗病毒物质。这种物质在 5 6℃及 pH 2～ 11稳定 ;对胰蛋白酶敏感 ;抗病毒活性受被保护细胞的密度、培养温度及保护时间的影响 ;不能被GCRV的特异性抗体中和 ;无直接杀病毒作用 ;抗病毒机制依赖于细胞内RNA和蛋白质的合成 ;在多种鱼类培养细胞中具有抑制病毒作用。这些特性与哺乳类α/ β干扰素一致 。

肠易激综合征的治疗体会

目的比较匹维溴胺与补脾益肠丸治疗肠易激综合征的疗效。方法将104例患者随机分为观察组52例,对照组52例。观察组用匹维溴胺50mg3次/d口服,对照组用补脾益肠丸2g3次/d口服。两组均以4周为疗程。结果观察组总有效率为77%,对照组总有效率为50%,两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论匹维溴胺治疗肠易激综合征较补脾益肠丸疗效肯定,患者易于接受,值得临床推广。

浅谈联合抗抑郁药治疗功能性消化不良临床体会

目的比较多潘立酮联合氟西汀与单存多潘立酮治疗功能性消化不良的疗效。方法将160例患者随机分为治疗组82例,对照组78例,治疗组用多潘立酮10mg,3次/d餐前30min口服,氟西汀10mg1次/d晨服。对照组用多潘立酮10mg,3次/d口服。两组均以4周为1疗程。结果治疗组总有效率92.68%,对照组总有效率71.79%,两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论多潘立酮联合氟西汀治疗功能性消化不良较单用多潘立酮治疗疗效高,值得临床使用。

几种鱼类培养细胞对不同干扰素敏感性的研究

本文研究了四种鱼类培养细胞ＣＩＫ、 ＣＡＢ、 ＧＣＢ、 ＧＲＥ对ＨｕＩＦＮ－ａ， ＣＩＫ、ＣＡＢ、ＧＣＢ、ＧＲＥ、ＦＨＭ等五种鱼类培养细胞干扰素作用的敏感性。这四种鱼类培养细胞对ＨｕＩＦＮ－ａ不敏感，对五种鱼类培养细胞干扰素表现出相对一致的敏感，性差异。其中ＧＲＥ细胞对鱼类干扰素最敏感，其次为ＣＡＢ、ＧＣＢ。ＣＩＫ细胞能产生高滴度的干扰素但对鱼类干扰素不敏感。不同病毒对干扰素作用的敏感性也不同。

逆转录聚合酶链式反应中dsRNA模板的快速制备

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测草鱼出血病病毒。建立了一种快速、简易而可靠的ｄｓＲＮＡ模板的制备方法。应用该方法制备模板进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增，可以有效地检测出病鱼组织及病毒感染的培养细胞裂解液中的草鱼出血病病毒，且全过程只需３～４ｈ。