膀胱癌组织和细胞中DKK2表达变化及意义

目的探讨膀胱癌组织和细胞中Dickkopf相关蛋白2(DKK2)的表达变化及临床意义。方法选择40例膀胱癌组织及癌旁正常组织(距癌组织边缘> 5 cm),常规培养永生化膀胱上皮细胞SV-HUC-1及膀胱癌上皮细胞系EJ、HTB-9(5637)、T24、253-JBV。分析癌症与肿瘤基因图谱数据库、高通量基因表达数据库筛选膀胱癌组织差异表达基因;用免疫组化法检测组织中DKK2蛋白表达,并分析其表达与患者临床病理参数的关系;用qRT-PCR技术检测细胞中DKK2基因表达。结果分析靶基因参与的生物学过程发现,DKK2是待验证候选基因之一。膀胱癌组织中DKK2蛋白高表达,DKK2蛋白表达与患者性别、年龄、吸烟、肿瘤数量无关(P均> 0. 05),与肿瘤直径、病理分级、T分期有关(P均<0. 05)。与SV-HUC-1细胞比较,EJ、HTB-9、T24、253-JBV细胞中DKK2基因相对表达量高(P均<0. 05); T24、253-JBV细胞中DKK2基因相对表达量高于EJ、5637细胞,253-JBV细胞中DKK2基因相对表达量最高(P均<0. 05)。结论 DKK2在膀胱癌组织和细胞中均呈高表达,其可能参与肿瘤的恶性进展。

PITX2启动子甲基化及其与膀胱癌临床病理的关系

目的:由于近些年表观遗传学的发展,基因启动子甲基化检测在预测癌症诊断预后方面拥有巨大的潜力。PITX2启动子的高CpG岛增加其甲基化程度,其能够成为新的膀胱癌预测因子。方法:QRT-PCR检测永生化膀胱上皮细胞系(SV-HUC)和3种膀胱癌细胞系(EJ、5637、T24)以及癌组织和癌旁组织的差异性表达。通过DNA甲基化测定实验对33例全膀胱切除术切除癌组织进行甲基化程度测定,分为大于50%甲基化,小于50%甲基化建立甲基化程度与肿瘤分期分级的联系。结果:使用实时定量RT-PCR(Q-PCR)证明PITX2在膀胱癌细胞中高表达。癌组织中甲基化程度明显高于癌旁组织。PITX2启动子甲基化与肿瘤大小(P=0.0267)、高级别(P=0.0277)和TNM分期(0.0160)显着相关。在预测肿瘤侵袭(T2-T4肿瘤)中,PITX2启动子甲基化的ROC曲线下面积(AUC)为0.867。Kaplan-Meier生存分析表明,与低PITX2甲基化表达的肿瘤相比,高PITX2启动子甲基化表达的肿瘤与较短的总体存活相关。结论:PITX2在膀胱癌组织中异常高表达,并且PITX2启动子区域在癌组织中存在高甲基化是患者不良预后的独立危险因素,因此,PITX2启动子甲基化可能成为膀胱癌肿瘤发生进展有效的预测因子。

上尿路尿路上皮癌根治术后发生慢性肾脏疾病的危险因素分析

目的 探讨上尿路尿路上皮癌患者根治性手术后发生慢性肾脏疾病（chronic kidneydisease,CKD）的危险因素.方法 回顾性分析2010年1月至2015年2月我院收治的239例上尿路尿路上皮癌患者的临床资料.男129例,女110例.年龄41 ～94岁,平均66岁.所有患者均行上尿路尿路上皮癌根治性手术,病理分期Ta～T4,病理分级G1～G3.利用CKD流行病学协作组（CKD-EPI）的计算公式计算肾小球滤过率（GFR）.新发CKD定义为行根治术后1个月CKD-EPI GFR＜60 ml/（min·1.73 m2）,根据是否出现CKD将患者分为CKD＋组和CKD-组.比较两组的性别、年龄、吸烟情况、体重指数、高血压病、糖尿病、肿瘤部位、肿瘤大小、是否多发、肿瘤分期、肿瘤分级、术前患侧肾积水及术前CKD-EPI GFR等指标的差异.采用Kaplan-Meier法分析有无CKD对总生存期和肿瘤特异性生存期的影响.采用Cox回归模型单因素和多因素分析预测根治术后发生CKD的危险因素.结果 本研究239例患者随访3 ～ 82个月,中位随访时间41.3个月.患者术前CKD-EPI GFR为65.2 ～ 108.7 ml/（min·1.73 m2）71.4 ml/（min·1.73 m2）.患者术后CKD-EPI GFR为37.6～93.8 ml/（min·1.73 m2）54.7ml/（min·1.73 m2）.术后1个月105例患者确诊为新发CKD.根治术后是否出现CKD对患者总生存期（P=0.137）和特异性生存期（P =0.190）无影响.年龄（HR=1.825,95％CI 1.203 ～2.768,P=0.017）、术前患侧肾积水（HR=0.243,95％ CI0.106 ～0.613,P=0.034）、术前CKD-EPI GFR（HR=0.237,95％CI 0.109 ～0.524,P=0.021）与根治术后新发CKD具有显著相关性.结论 年龄、术前患侧肾积水、术前CKD-EPI GFR是上尿路尿路上皮癌患者行根治性手术后发生CKD的独立危险因素.