N-取代苄基氟哌啶醇氯化物的合成及扩血管活性

目的:合成N-取代苄基氟哌啶醇氯化物及其还原物并研究它们的扩血管活性。方法:氟哌啶醇、氢化氟哌啶醇在回流的情况下分别与取代氯苄反应依次得到N-苄基氟哌啶醇氯化物和N-苄基氢化氟哌啶醇氯化物;并测定其对KCl诱导的大鼠胸主动脉条收缩抑制作用。结果:合成了11个新化合物(IF_8～F_(13),ⅡFB_8～FB_(11),FB_(13))。离体扩血管活性实验表明,多数目标化合物表现为不同程度地阻滞KCl所致鼠胸主动脉条收缩血管的活性。结论:初步构效关系表明,N-取代苄基氟哌啶醇氯化物中苄基苯环上取代基的电性效应和取代位置可能为影响此类化合物扩血管活性的重要因素。氟哌啶醇母体上羰基被还原为羟基一般对其扩血管活性影响不大。

益母草碱衍生物Ia通过激活蛋白激酶ε保护缺氧复氧心肌细胞

目的:观察益母草碱衍生物Ia对心肌细胞缺氧复氧(H/R)所致损伤的作用。方法:原代培养SD新生乳鼠心肌细胞,并制作H/R模型。Western blot检测蛋白激酶(PK)C转位;双抗体夹心光化学法和ELISA分别测定肌钙蛋白(c Tn)I浓度和肿瘤坏死因子(TNF)-α;观察心肌细胞损伤状况及内皮细胞H/R后与血小板间的相互作用。结果:心肌细胞H/R时,PKCε激活并转位;益母草碱衍生物Ia可促使PKCε激活和转位,并减少肌酸激酶、c Tn I漏出和TNF-α分泌。结论:益母草衍生物Ia对培养心肌细胞H/R损伤有保护作用,可能与其激活PKCε转位相关。

氟哌啶醇季铵盐衍生物的生物活性研究

目的：探讨氟哌啶醇季铵盐衍生物F8～F13的离体扩冠活性及对麻醉大鼠整体血流动力学的影响，并分析构效关系。方法：采用生物检定法，观察20μmol／L目的化合物对KCl诱导的猪冠脉螺旋条收缩曲线的影响；麻醉正常血压SD大鼠，经右颈总动脉插管至左心室，右股动脉插管后，分别5mg／kg静脉注射6个目的化合物，BL-420型生物机能实验系统记录观察血流动力学效应。结果：F11和F13均具强的降压作用：其中F13兼具良好的扩冠活性，同时在其降低血压的同时可能对SD大鼠具心功能抑制作用，而F11对大鼠心功能无影响。结论：苄基苯环上以对位或邻位甲基取代者更适合作为进一步研究与开发心血管药物的理想先导物。

蛋白激酶C_ε在缺氧复氧心肌细胞中的调控作用

目的:研究蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)在缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)所致心肌细胞损伤中的调控作用。方法:取原代培养心肌细胞制作H/R模型,采用Western blot法检测PKCε蛋白转位;双抗体夹心化学发光法和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测培养心肌细胞上清液中肌钙蛋白(cTnI)浓度和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌以观察心肌细胞损伤的状况。结果:与正常对照组比较,缺氧2 h复氧30 min时,PKCε总蛋白表达无明显变化,但PKCε由可溶性成分转位至颗粒性成分(P<0.05),延长缺氧时间至4 h,PKCε总蛋白表达明显下降(P<0.05);与H/R组比较,PKCε亚型特异性抑制剂εV1-2可增加cTnI漏出(P<0.05),但对TNF-α的分泌无明显影响。结论:PKCε转位可减轻心肌细胞H/R所致的损伤。

碘化N-正丁基氟哌啶醇通过蛋白激酶C途径保护缺氧复氧心肌细胞

目的研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对缺氧复氧(H/R)所致心肌细胞损伤的作用及蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法用1～3d的Sprague-Dawley(SD)新生乳鼠进行心肌细胞原代培养,取生长4～5d的心肌细胞制作H/R模型。采用非放射性同位素法测定PKC活性、蛋白免疫印迹法检测PKC蛋白转位;双抗体夹心光化学测定法和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测培养心肌细胞上清液中肌钙蛋白(cTnI)浓度和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌观察心肌细胞损伤状况。结果心肌细胞缺氧复氧时,PKC总活性明显升高,PKCα和βⅡ均发生转位。F2和cPKC特异性抑制剂G6976可减少cTnI泄漏和TNF-α的分泌,减轻心肌细胞H/R所致的损伤;PKC激动剂thymeleatoxin(TXA)拮抗F2的心肌保护作用。结论 F2对培养心肌细胞H/R损伤具有保护作用,可能与其抑制钙依赖PKCα转位有关。

N-取代苄基氟哌啶醇氯化物的合成与生物活性

目的 :合成N 取代苄基氟哌啶醇氯化物并研究其心血管活性。方法 :在回流情况下使氟哌啶醇与取代氯苄化合物反应 ,得到N 取代苄基氟哌啶醇氯化物。采用生物检定法 ,以兔胸主动脉螺旋条为标本 ,研究其对KCl诱导的血管收缩的作用。结果 :合成了 6个N 取代苄基氟哌啶醇氯化物 (F8～ 13 )。多数化合物表现为不同程度的拮抗KCl所致兔胸主动脉螺旋条收缩血管活性 ,其中F11的血管收缩抑制活性最强。结论 :F11扩张血管活性强于先导化合物 ,初步构效关系表明 ,N

N-取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物的合成及其初步构效关系的研究

目的：合成一系列N-取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物并做初步构效关系分析。方法：以hal为原料,将其氢化再分别与取代氯苄化合物回流下反应得到N-取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物（FB8-11、FB13）。采用生物检定法研究目的化合物对KCl致猪冠状动脉收缩曲线的影响。结果：合成了5个新化合物（FB8-11、FB13）,药理活性结果显示：多数目的化合物不同程度地表现为舒张血管活性。结论：N-取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物分子中羰基还原并不影响化合物的扩冠活性。

益母草碱中间体N,N-二叔丁氧基羰基-胍基丁醇的合成

目的:优化益母草碱中间体N,N-二叔丁氧基羰基-胍基丁醇的合成方法。方法:用S-烷基化异硫脲法和Mukaiyama法分别进行中间体的合成,并进行比较。结果:N,N-二叔丁氧基羰基-S-甲基异硫脲在Mukaiyama试剂和三乙胺条件下,与4-氨基-1-丁醇反应可得到双保护的中间体;且反应条件温和,总收率68.5%,产品纯度好,其结构经熔点、质谱和核磁共振谱确定。结论:Mukaiyama试剂法合成中间体,收率高,纯度好。

碘化N-正丁基氟哌啶醇对培养大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤及蛋白激酶C活性的影响

目的：前期研究表明，碘化N-正丁基氟哌啶醇（F2）心肌保护作用的机制可能与其拮抗钙超载及抑制早期生长反应基因-1（Egr—1）mRNA及蛋白表达相关，作为Egr-1的上游信号分子蛋白激酶C（PKC），

八厘麻毒素的提取分离、改造及药理作用

目的:提取分离并改造八厘麻毒素(RTX)的化学结构及其药理作用研究。方法:经过加热回流、硅胶层析及重结晶获得RTX,再经酸催化、纯化获得八厘麻毒素结构改造物(Rh2),以动脉血压及电生理参数、离体胸主动脉螺旋条生物测定研究其药理作用。结果:获得RTX及Rh2精制品,后者的初步药理作用显示具有收缩血管平滑肌,提高动脉血压的作用,同时不影响心脏的电生理。结论:RTX结构中的2,3-环氧基团被改变后,其降压作用消失而表现为升压作用。

氟哌啶醇季铵盐衍生物的合成及其扩血管活性

目的合成氟哌啶醇季铵盐衍生物及其还原物并研究它们的扩血管活性。方法以氟哌啶醇、氟哌啶醇经四氢硼钠还原后得到的氢化氟哌啶醇为反应物,分别与取代氯苄回流下反应得到相应的氟哌啶醇季铵盐衍生物和氢化氟哌啶醇季铵盐衍生物;所有目的化合物结构均经IR,1H-NMR,MS和元素分析确证,并测定其对KCI诱导鼠、兔胸主动脉条收缩的抑制作用。结果合成了2个系列11个新化合物(ⅠF8-13,ⅡFB8-11和FB13)。初步生物活性实验表明,多数化合物具有不同程度的扩张血管作用,其中化合物F11的血管收缩抑制活性最强。结论F11扩张血管活性明显强于先导化合物,初步构效关系表明,N-取代苄基氟哌啶醇季铵盐衍生物中苄基苯环上取代基的电性效应和取代位置可能为影响扩血管活性的重要因素。氟哌啶醇母体上羰基被还原为羟基一般对其扩血管活性影响不大。

负载EB病毒潜伏膜蛋白基因的树突状细胞疫苗的体内抗肿瘤免疫作用

目的观察负载EB病毒潜伏膜蛋白(EBV-LMP2)基因的树突状细胞(DC)疫苗体内激活的细胞毒T细胞(CTLs),在严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠体内对人鼻咽癌(NPC)细胞株CNE-2的免疫保护作用。方法人外周血来源的单核细胞(PBMC)经细胞因子扩增培养为成熟DC,rAd-EBV-LMP2重组腺病毒转染DC制备疫苗,对疫苗进行致瘤性检测;采用人外周血T细胞悬液腹腔注射建立人外周血淋巴细胞-严重联合免疫缺陷小鼠(hu-PBL-SCID)模型,随机分为4组:对照组、T细胞组、未转染DC组、LMP2-DC组。末次免疫7d后,接种CNE-2细胞,观察小鼠成瘤率、成瘤潜伏期、肿瘤体积及重量;定期检测小鼠血清中人IgG水平;测定小鼠脾淋巴细胞的特异性细胞毒淋巴细胞(CTL)活性。结果 rAd-EBV-LMP2-DC疫苗接种于小鼠体内未见肿瘤形成,脾、肺、肝和肾等器官未出现肿瘤病变;小鼠血清均检测出人IgG,hu-PBL-SCID嵌合模型重建成功;LMP2-DC组肿瘤的潜伏期明显延长,肿瘤生长速度、体积及重量显著减小(P<0.01),且LMP2-DC组小鼠脾淋巴细胞显示出对肿瘤细胞强大的杀伤活性(P<0.01)。结论 EBV-LMP2-DC疫苗能在hu-PBL-SCID小鼠体内诱导产生强大的CTL反应,保护小鼠免受肿瘤细胞的攻击,对肿瘤细胞具有有效的免疫保护作用。

海滩牵牛有效部位对巴豆油所致小鼠耳肿胀抑制作用的研究

目的:研究中草药海滩牵牛有效部位(EFIS)对巴豆油引起小鼠耳肿胀抑制作用。方法:制作巴豆油所致小鼠耳肿胀模型,观察EFIS对巴豆油引起小鼠耳肿胀的抑制作用;同时研究EFIS对耳肿胀组织炎症细胞渗出和NO浓度、髓过氧化物酶(MPO)活性的影响。结果:与模型组比,EFIS(150、300、600 mg/kg)能明显减轻巴豆油引起小鼠耳肿胀(P<0.05);能不同程度减少耳肿胀组织炎症细胞渗出;能明显降低耳肿胀组织NO浓度与MPO活性(P<0.05)。结论:EFIS具有较强的抗炎活性,其作用与抑制炎症过程中的渗出和水肿、血管通透性的改变、炎症介质的产生有关。

TLCS法测定兔体液及脏器中盐酸氟桂利嗪浓度

将生物样品置硼酸缓冲液酸化环境,以正戊烷-异丙醇(98:2)提取氟桂利嗪,继而加酸使其成盐溶于水,再碱化用二氯甲烷提取.样品点于硅胶GF254薄层板上,展开剂为环己烷-丙酮-氯仿(9:3:5),紫外灯(254nm)下呈紫色斑点,Rf=0.54;锯齿形双波长法扫描,λs215nm,λR310nm;线性范围0.2～8.0μg,平均回收率89.24%.

N-取代苄基氟哌啶醇氯化物的合成及其扩张冠状动脉活性的研究

目的：合成N-取代苄基氟哌啶醇氯化物并研究其对猪冠状动脉的作用。方法：以氟哌啶醇为原料，分别与取代氯苄化合物回流下反应得到N-取代苄基氟哌啶醇氯化物。采用生物检定法研究目的化合物对KCl致猪冠状动脉收缩曲线的影响。结果：合成了7个新化合物（F1-F7）。生物活性实验表明：所有目的化合物均可使KCl致猪冠脉收缩曲线压低。其中F7表现出强的扩张冠脉的活性。结论：N-取代苄基氟哌啶醇季铵盐衍生物的扩血管活性与化学结构有着密切的关系，分子中哌啶环苄基苯环上取代基的不同和取代位置直接影响化合物的扩血管活性。

N-取代苄基氟哌啶醇氯化物及其还原物的合成与扩张血管活性

目的合成N 取代苄基氟哌啶醇氯化物及其还原物并研究它们的扩张血管活性。方法以氟哌啶醇为原料 ,通过与取代氯苄化合物在回流下反应得到N 取代苄基氟哌啶醇氯化物 ;用氢化硼钠将氟哌啶醇还原为氢化氟哌啶醇 ,再与取代氯苄化合物在回流下反应得到N 取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物 ;以兔胸主动脉螺旋条生物测定法研究其抑制血管收缩的活性。结果合成了 6个N 取代苄基氟哌啶醇氯化物F8-13 和 5个N 取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物FB8-11,FB13 ;初步生物活性实验结果表明 ,F8-13 表现出不同程度的拮抗KCl所致兔胸主动脉螺旋条收缩血管活性 ,其中化合物F11的血管收缩抑制活性最强 ;但FB8-11,FB13 的活性均较低。结论化合物F11扩张血管活性强于先导化合物 ,初步构效关系表明 ,N

N-取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物对大鼠血流动力学的影响

目的研究N-取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物（FB8～FB11、FB13）对麻醉大鼠血流动力学的影响，并分析构效关系。方法麻醉正常血压SD大鼠，经右颈总动脉插管至左心室，右股动脉插管后，分别静脉注射不同目的化合物，BL420型生物机能实验系统记录观察血流动力学效应。结果与给药前相比，FB9和FB11组平均动脉压明显下降（P〈0．01）；FB13组降低（P〈0.05）的同时，心率、左心室收缩压和左心室压变化速率最大值显著降低。结论FB9和FB11具有较强的降压作用，对大鼠心功能无影响；FB13可使大鼠血压降低，并可能具有心脏抑制效应。

碘化N-正丁基氟哌啶醇对缺氧复氧内皮细胞早期生长反应基因-1表达的影响

目的:观察碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对缺氧复氧(H/R)条件下大鼠心脏微血管内皮细胞(RCMECs)早期生长反应基因-1(Egr-1)表达的影响。方法:体外培养RCMECs,建立其H/R模型。细胞随机分为对照组,H/R组,溶剂(PEG)组和F2组。在细胞缺氧3 h复氧2h后收集细胞及上清液,免疫细胞化学法检测细胞中Egr-1蛋白的表达水平,显微镜下观察细胞形态学改变并计算存活率。结果:H/R及PEG组内皮细胞在H/R刺激下Egr-1蛋白表达明显升高,细胞形态发生改变,存活率降低。F2组的内皮细胞在H/R刺激下Egr-1的异常表达受抑制,细胞形态结构无明显改变,细胞存活率提高。结论:F2对体外培养的RCMECsH/R损伤具有保护作用,这可能与其抑制Egr-1蛋白过表达有关。

阿魏酸-7-羟基香豆素酯的合成

目的:合成阿魏酸(FA)-7-羟基香豆素酯。方法:以对甲苯磺酸为催化剂、N,N-二环己基碳化二亚胺为缩合剂,使FA和7-羟基香豆素直接缩合。结果:合成标题化合物,结构经质谱、红外、核磁共振确证。结论:FA和7-羟基香豆素可一步合成,摒弃了保护FA的酚羟基、酰氯化、酯化、脱保护的繁冗步骤。

薄层扫描法测定血浆中盐酸氟桂利嗪浓度及药物动力学

血浆中盐酸氟桂利嗪经硼酸缓冲液酸化后，正戊烷—异丙醇（98：2）提取其原型，加酸使成盐溶于无机相中，再加碱后用二氯甲烷提取，样品点于硅胶GF_(254)薄层板上，以环己烷—丙酮—氯仿（9：3：5）为展开剂．氟桂利嗪在254nm紫外灯下呈紫色斑点，Rf＝0．54．于CS－930薄层扫描仪上测定，λs＝215nm、λR＝310nm，线性范围0．3～8μg，平均回收率90．02％．用此法测定了氟桂利嗪血药浓度，并进行药物动力学研究．