海马内注射脑啡肽对细胞免疫功能及脑内IL－1α基因表达的影响

本文研究了海马内微量注射脑啡肽对大鼠细胞免疫功能及海马内白细胞介素－１α（ＩＬ－１α）基因表达的影响。结果发现：（１）双侧海马内微量注射甲硫－脑啡肽或亮－脑啡肽各１μｌ（１８ｍｍｏｌ／Ｌ）能明显增强ＣｏｎＡ刺激的脾淋巴细胞增殖活性，而双侧海马内微注射脂多糖各１μｌ（５０ｎｇ／μｌ）则起抑制作用。切除双侧肾上腺后，海马内注射脑啡肽仍可增强脾淋巴细胞增殖反应。低浓度亮－及甲硫－脑啡肽（１０￣（－１０），１０￣（－１１）ｍｏｌ／Ｌ）直接作用于体外培养的大鼠脾淋巴细胞，也明显增强ＣｏｎＡ刺激的细胞增殖活性。（２）双侧海马内微量注射脂多糖各１μｌ（５０ｎｇ／μｌ），于９０ｍｉｎ后用逆转录－聚合酶链反应技术检测到海马结构内ＩＬ－１α基因表达，而海马内甲硫或亮脑啡肽注射３０ｍｉｎ后再给予脂多糖，则未检测到ＩＬ－１αｃＤＮＡ的扩增条带。上述结果表明，海马结构对机体免疫功能的调节中脑啡肽起着重要作用，其机制可能与抑制海马结构ＩＬ－１α基因表达有关。

海马内移植颈上神经节组织改善穹窿－海马伞横切大鼠的记忆功能

３８只Ｗｉｓｔａｒ大鼠双侧穹窿－海马伞损伤后．以被动回避反应为指标观察到记忆明显受损，与损伤前相比，有记忆动物自６５．３％降至１３．６％，两者差别非常显著。于穹窿－海马伞损伤后记忆丧失动物（ｎ＝１５）自体一侧分离出颈上神经节（ＳＣＧ），切为２－３块并在室温下孵育于２０—５０μｇ／ｍｌ２．５ｓＮＧＦ中１—２ｈ，而后移植于自体双侧海马背侧，移植４周后观察到动物记忆明显恢复，恢复记忆的动物数占７３．３％。在行为实验基础上应用荧光组化方法检查了移植细胞成活情况并测量了海马内去甲肾上腺素（ＮＡ）的含量。移植后２周海马内ＮＡ含量比损伤组有明显上升。移植后一个月，可见部分移植细胞成活并有神经纤维生长。实验表明．穹窿－海马伞损伤大鼠海马内自体移植ＳＣＧ，通过神经递质的局部补充对动物丧失的记忆能力具有一定改善作用。

化学致剂马桑内酯导致大鼠海马神经细胞内Ca^(2+)升高

于培养的新生大鼠海马神经细胞，应用ｆｕｒａ２ 荧光检测技术，观察了致疒间剂马桑内酯对单个海马神经细胞内钙离子浓度（［Ｃａ２＋ ］ｉ）的影响。培养液内马桑内酯浓度达１０－ ８ｍ ｏｌ／Ｌ时可引起［Ｃａ２＋ ］ｉ增加，［Ｃａ２＋ ］ｉ随给药浓度的提高而升高。马桑内酯浓度达５×１０－ ８ｍ ｏｌ／Ｌ时，［Ｃａ２＋ ］ｉ维持于稳定的高水平上。当胞外无Ｃａ２＋时，马桑内酯仍可引起［Ｃａ２＋ ］ｉ的升高；Ｌ型钙通道阻断剂ｖｅｒａｐａｍ ｉｌ不能阻断马桑内酯的上述作用。结果提示，海马神经细胞在致疒间剂作用下，发生Ｃａ２＋ 内流及胞内钙池释放现象。

去甲肾上腺素引起蟾蜍背根神经节神经细胞膜电位变化的离子机制

本文应用细胞内记录方法,对去甲肾上腺素(NA)引起蟾蜍背根神经节(DRG)神经细胞膜电位去极化或超极化反应时的膜电导及翻转电位值进行了测量,并观察了钾和钙离子通道阻断剂灌流DRG对NA引起膜电位反应的影响。当NA引起去极化反应时,15个细胞的膜电导减小32.6％。少数细胞膜电导开始增加,继而减小(n=4)。NA超极化反应时膜电导增加13.2％(n=8)。NA去极化反应的翻转电位值为-88.5±0.9mV((?)±SE,n=4),NA超极化反应在膜电位处于-89至-92mV时消失。 钾通道阻断剂四乙铵可使NA去极化幅值增加73.7±11.9％((?)±SE,n=7),并使NA超极化幅值减小40.5％(n=4)。细胞内注入氯化铯使苯肾上腺素去极化幅值增加34.5％(n=4)。钙通道阻断剂氯化锰使NA去极化及超极化反应分别减小50.5±9.9％((?)±SE,n=10)和89.5±4.9％((?)±SE,n=7)。结果提示,NA引起DRG神经细胞膜电位的去极化或超极化反应,可能与膜的钾及钙通道活动的改变有关。

海马及第三脑室内移植颈上神经节组织对老年大鼠学习记忆的改善作用

以回避反应为指标，检测了１９只２４月龄老年Ｗｉｓｔａｒ大鼠的学习记忆能力。于老年大鼠双侧海马或第三脑室移植新生大鼠颈上神经节后２周，观察到学习记忆能力显著改善，海马内移植后以避暗反应检查，进洞潜伏期自１７．５±１５．５ｓ延至３７６．７±２７０．８ｓ（ｐ＜０．０１）。同期非移植或假移植术大鼠的学习记忆能力仍处于较低水平。第三脑室内移植后以跳台法检测，大鼠为回避电击在平台停留５ｍｉｎ所需电击时间为１１．７±６．３ｓ，与移植前对照值６４．７±３２．３ｓ比较ｐ＜０．０１。行为实验后对移植区进行了荧光组织化学及电镜检查，结果表明，应用脑内移植技术改善老年大鼠的记忆损害可能与补充单胺类递质有关。

中脑导水管周围灰质移植交感神经节组织改变大鼠的痛感受性

中脑导水管周围灰质移植交感神经节组织改变大鼠的痛感受性王阿敬，胡谋先，谢虹，樊友珍，孙材陇（同济医科大学实验医学研究中心武汉４３００３０）中枢内去甲肾上腺素、脑啡肽等对痛感受的调节起着重要作用，而中脑导水管周围灰质（ＰＡＧ）又与伤害性感受调节密切有关...

细胞因子与神经－免疫调节

细胞因子与神经－免疫调节王阿敬（同济医科大学实验医学研究中心武汉４３００３０）由于各个相关学科的发展，尤其是神经生物学、免疫学、分子生物学学科的交叉渗透，＂神经免疫调节学＂已成为一个新的研究领域且备受关注。它不仅改变了我们对传统生理学的认识和研究手段...

大鼠颈上神经节组织移植至自体中脑水管周灰质对皮肤痛阈的影响

为观察自中脑水管周灰质（PAG）释放的儿茶酚胺类物质能否引起痛敏感性的变化，选择新生大鼠颈上神经节（SCG）作为PAG内的移植物。移植后应用烟碱皮下注射（0.lmg／kg）引起移植物儿茶酚胺释放，可见被移植大鼠痛敏感性降低，与移植前对照组痛阈比较P＜0.01，而注射等渗盐水对痛阈无影响。烟碱引起的镇痛效应可被肾上腺素受体拮抗剂酚妥拉明部分阻断。实验后对移植物进行了儿茶酚胺组织化学检查。上述结果表明，PAG及移植物儿茶酚胺的局部释放可以调节伤害性感受，减低痛敏感性。

脑啡肽对培养新生大鼠海马胶质细胞IL-1α基因表达的影响

本室初步研究表明海马内微量注射脑啡肽能增强大鼠细胞免疫功能，其机制可能与脑啡肽抑制大鼠海马内白细胞介素1α(IL-1α)基因表达有关。为对此进一步证实，我们观察了脑啡肽及阿片受体阻断剂纳络酮对脂多糖(LPS)诱导的培养新生大鼠海马胶质细胞IL-1α基因表达的影响。

阿片受体介导大鼠海马内脑啡肽对细胞免疫功能的调节

以刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）刺激的脾淋巴细胞增殖活性及自然杀伤细胞（ＮＫｃｅｌ）活性为细胞免疫功能检测指标，观察了阿片受体阻断剂纳洛酮（Ｎａｌｏｘｏｎｅ，ＮＬＸ）对大鼠海马内微量注射甲硫脑啡肽所致的免疫功能增强作用的影响。结果发现：（１）海马内微量注射白细胞介素１（ＩＬ１）诱导剂（细菌内毒素）脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ，５０ｎｇ／１μｌ）可降低机体免疫功能。（２）双侧海马内预先注射甲硫脑啡肽（ＭＥＮＫ，浓度：１０μｇ／μｌ）各１μｌ，可阻止脑内ＬＰＳ降低免疫功能的作用。（３）脑啡肽的这种作用可被阿片受体阻断剂纳洛酮（１０μｇ／１μｌ）阻断。（４）海马内单纯注射纳洛酮对机体免疫功能也起抑制作用。上述结果提示，海马内脑啡肽对免疫功能的增强作用是通过阿片受体介导的。

马桑内酯致痫大鼠大脑皮层及海马神经元钙离子活度的变化

大脑皮层或海马内注射马桑内酯可以引起大鼠癫痫样发作及脑电图痫样放电。应用钙离子选择性微电极测量了癫痫模型大鼠海马和皮层的钙离子活度的改变。皮层或海马内注射５μ马桑内酯（５ｍｇ／ｍｌ），３ｍｉｎ后观察到细胞外钙离子活度的明显改变，大脑皮层及海马内Ｃａ（２＋）分别下降了０．６１ｍｍｏｌ／Ｌ及０．７４ｍｍｏｌ／Ｌ，与马桑内酯注射前相比较，注射后皮层或海马内的Ｃａ（２＋）活度具有极显著差异（Ｐ＜０．０１）。马桑内酯注射后２０ｍｉｎＣａ（２＋）活度恢复至正常水平。上述结果表明马桑内酯注射后神经细胞群发生爆发性电活动时出现钙内流现象，海马脑片的实验结果与在体实验相似。

散斑跨零点法在实时监测淋巴流速中的应用

目的实现利用激光技术获得在体大鼠肠系膜上淋巴细胞的实时流速动力学特征。方法采用散斑干涉跨零点法对模型实验中匀速流动和模仿淋巴细胞运动的intralipid(英脱利匹特 )、正常状态下的淋巴流和血流以及药物作用下的淋巴流 ,监测其流速动力学特征 ,同时与散斑干涉功率谱进行比较。结果利用散斑跨零点法获得了淋巴细胞的实时流速特征 ,且有效地监测到药物作用下淋巴流速的改变。但在其对应的散斑功率谱上没有获得相应地显著性变化。结论散斑跨零点法能有效地监测淋巴细胞的实时流速 。

马桑内酯致痫大鼠皮层及海马神经元的放电模式

在腹腔注射马桑内酯所致的急性癫痫和慢性点燃癫痫大鼠模型上，观察了大脑皮层和海马神经元膜电位的变化及放电模式。结果显示：皮层脑电图出现明显的阵发性痫样放电，胞内微电极记录皮层及海马神经元放电的模式为：①单纯去极化；②去极化并伴有阵发性或持续性放电；③去极化与超极化交替出现等。表明马桑内酯可以引起大脑皮层及海马神经元生物电活动的改变，其改变形式不一，但主要引起去极化。

脑啡肽对大鼠海马神经细胞IL-6基因表达的影响

本文研究了大鼠海马内微量注射甲硫－脑啡肽（Ｍ－ＥＮＫ）对海马细胞的白细胞介素－６（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）基因表达的影响。大鼠双侧海马内微量注射细菌内毒素脂多糖各１μｌ（ＬＰＳ，浓度：５０ｎｇ／ｍｌ），于９０ｍｉｎ后用原位杂交技术检测到海马结构ＩＬ－６的基因表达，以齿状回颗粒细胞层显著。当海马内预先注射Ｍ－ＥＮＫ（每侧１μｌ，浓度：１０μｇ／μｌ），３０ｍｉｎ后再给予脂多糖则未见ＩＬ－６基因表达。结果表明Ｍ－ＥＮＫ及ＬＰＳ可影响脑内ＩＬ－６的基因表达，在中枢调节机体免疫功能中，ＩＬ－６可能具有重要作用。

脑缺血及再灌流对皮层体感诱发电位及神经细胞外钙离子活度的影响

实验在２２只Ｗｉｓｔａｒ大鼠上进行，夹闭双侧颈总动脉造成脑缺血，夹闭３ｍｉｎ时，皮层体感区诱发电位Ｐ波幅值、皮层细胞外钙离子活度及皮层内氧分压分别由正常对照值９６．５μＶ、０．５５ｍｍｏｌ／Ｌ和１．６６±０．４５ｋＰａ降低了５２．７％（ｎ＝７）、４５．８％（ｎ＝１０）和２０．５％（ｎ＝５），其中钙离子活度与对照值比较具有非常显著的差异（Ｐ＜０．０１）。放夹后再灌流的早期（１～３ｍｉｎ）上述三项指标较夹闭时有更进一步下降，此后逐步恢复，至再灌流１０～１５ｍｉｎ才达到正常水平。本文实验结果表明再灌流早期脑组织损伤继续存在，甚至更为严重。

马桑内酯致痫大鼠海马神经细胞外Na^+、K^+活度的变化

目的和方法 :应用Na+、K+选择性微电极检测马桑内酯致痫大鼠海马及海马脑片神经细胞外Na+、K+活度的改变。结果 :海马内注射马桑内酯 (5 μL ,5× 10 -4 mol/L)致痫大鼠 30s、1min和 2min后 ,海马神经细胞外Na+活度分别低于对照组 2 7 7mmol/L、5 0 3mmol/L和 5 7 8mmol/L ,而K+活度则分别高于对照组 2 3mmol/L、2 4mmol/L和 2 9mmol/L(P <0 0 1)。 3min后 ,K+活度基本恢复至对照水平 ,而Na+活度仍持续低于对照水平 (P <0 0 1)。海马脑片的实验结果与在体实验相似。结论 :海马神经细胞处于癫痫状态时 ,存在Na+内流、K+外流现象。

肾上腺素能受体及其亚型在海马调节机体细胞免疫功能中的作用

用 MTT法测定 Con A刺激脾淋巴细胞的增殖活性 ,研究了在大鼠海马中微量注射去甲肾上腺素 (NE)对细胞免疫功能的影响 ,探讨了α及β受体在此影响中的作用。发现 :1海马内微量注射 NE对 Con A刺激的脾淋巴细胞增殖反应产生抑制效应 ,此效应能被 α及 β受体阻断剂酚妥拉明、心得安所阻断。 2 β、β1 及 β2 受体激动剂异丙基肾上腺素 (ISO)、Dobutam ine、Metaproterenol均能抑制 Con A刺激的脾淋巴细胞增殖反应。心得安可阻断 β2 受体激动剂的免疫抑制效应。提示 :海马内的 NE对大鼠细胞免疫功能有抑制效应 ,此效应由肾上腺素能 α及 β受体共同介导。

大鼠隔-海马通路横切对记忆功能及海马内去甲肾上腺素含量的影响

应用35只Wistar种系大鼠，双侧切断大鼠海马和部分穹窿使海马部分去神经。切断后7～14d，记忆明显受损，与横切前相比，有记忆的动物数从80.0％降至2.9％，二者差异非常显著。海马内去甲肾上腺素的含量比切断前降低了48.1％。表明，横切后海马内去甲肾上腺素的含量减少，伴有记忆功能降低。在海马内去甲肾上腺素作为一种神经递质可能参与记忆行为的调节。

海马内微量注射硫酸镁对马桑内酯诱发大鼠痫样放电的影响

目的和方法 采用皮层应用或海马内注射马桑内酯的方法致痫大鼠，用钙离子选择性微电极检测了致痫动物皮层，海马细胞Ｃａ＾２＋浓度的变化，观察了海马ＣＡ２区注射硫酸镁致痫大鼠电图和皮层，海马诱发电位的影响。结果 马桑内酯致痫时，皮层，海马细胞外Ｃａ＾２＋浓度分别降低了０．６１ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１和０．７４ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１，海马内注射硫酸镁能明显抑制致痫动物皮层，海马诱导发电位和脑电图痫样放电，结论

海马内注射肾上腺素能受体激动剂对细胞免疫功能的影响

目的 :研究肾上腺素能受体激动剂对机体细胞免疫功能的作用及下丘脑 垂体 肾上腺轴 (HPA轴 )在此作用中的地位。方法 :以刀豆蛋白A(ConA)刺激脾淋巴细胞的增殖活性为细胞免疫功能指标 ,检测在正常及去肾上腺大鼠海马内注射去甲肾上腺素 (noradrenaline,NA)对机体细胞免疫功能的影响。结果 :①在正常大鼠 ,NA(4μl,6 .0× 10 -3 mol/L)、β1受体激动剂杜丁胺 (dobutamine,Dob ,4 μl,6 .0× 10 -3 mol/L)和 β2 受体激动剂异丙喘宁(metaproterenol,Met,4 μl,8.0× 10 -3 mol/L)均可抑制ConA刺激的脾淋巴细胞增殖反应、降低NK细胞的活性 ,其中NA的作用最强 ,Met次之 ,Dob的作用最弱。α及 β受体阻断剂酚妥拉明 (Phen ,2 μl,1.6× 10 -2 mol/L)和心得安 (Prop ,2 μl,1.6× 10 -2 mol/L)均可部分阻断NA的免疫抑制作用 ,且Prop的作用较强。②在去肾上腺组 ,NA的免疫抑制作用不明显。结论 :海马内NA对机体的细胞免疫功能具有明显的抑制作用 ,此作用由α及 β受体共同介导 ,其中 β受体的作用大于α受体 ,且 β2 受体的作用大于 β1受体。此外 ,保持肾上腺结构和功能完整在NA调节机体细胞免疫功能作用中具有重要意义。