外周血淋巴细胞亚群在系统性红斑狼疮患者中表达及与狼疮性肾炎的关系

目的 观察系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)及狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)患者外周血淋巴细胞亚群变化,探讨其与SLE患者发生LN的关系。方法 134例SLE患者(SLE组)根据是否发生LN分为LN组52例和非LN组82例;90例体检健康者为对照组。采用流式细胞术检测SLE组和对照组外周血淋巴细胞亚群,包括T淋巴细胞、抑制性T(suppressor T,Ts)细胞、辅助性T(helper T,Th)细胞、B淋巴细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞计数;检测红细胞沉降率、C反应蛋白、IgG、补体C3、补体C4、抗双链DNA抗体、尿蛋白定量,评估SLE疾病活动性指数-2000(systemic lupus erythematosus disease activity index-2000,SLEDAI-2000)。采用Spearman相关法分析SLE患者尿蛋白定量与淋巴细胞亚群的相关性;采用多因素logistic回归分析SLE患者发生LN的影响因素。结果 SLE组T淋巴细胞计数、Th细胞计数、B淋巴细胞计数、NK细胞计数均低于对照组(P<0.05),Ts细胞计数与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。LN组T淋巴细胞计数[831.47(554.60,1 291.12)×10^(6)/L]、Ts细胞计数[402.48(262.20,712.92)×10^(6)/L]、Th细胞计数[350.95(213.41,524.58)×10^(6)/L]、B淋巴细胞计数[80.42(42.53,155.89)×10^(6)/L]、NK细胞计数[93.00(53.37,131.24)×10^(6)/L]、补体C3水平[(0.82±0.36)g/L]均低于非LN组[1 194.42(926.71,1 757.97)×10^(6)/L、595.58(388.38,913.66)×10^(6)/L、536.77(360.95,695.66)×10^(6)/L、130.37(63.87,240.19)×10^(6)/L、162.48(89.15,240.79)×10^(6)/L、(0.94±0.28)g/L](P<0.05),红细胞沉降率[31.00(20.00,51.50)mm/h]、C反应蛋白[6.15(2.51,20.00)mg/L]、尿蛋白定量[2.65(1.69,5.83)g/d]、SLEDAI-2000[7(6,9)]均高于非LN组[22.00(12.00,37.25)mm/h、3.05(1.00,8.12)mg/L、0.11(0.10,0.15)g/d、2(0,4)](P<0.05),IgG、补体C4、抗双链DNA抗体水平与非LN组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。SLE患者尿蛋白定量与T淋巴细胞计数、Th细胞计数、NK细胞计数均呈负相关(r=-0.175,P=0.043;r=-0.255,P=0.003;r=-0.231,P=0.007)。NK细胞计数(OR=0.993,95%CI:0.988~0.998,P=0.004)、SLEDAI-2000(OR=1.491,95%CI:1.251~1.778,P<0.001)是SLE患者发生LN的影响因素。结论 SLE患者T淋巴细胞、Th细胞、B淋巴细胞、NK细胞计数降低,发生LN时更低;NK细胞计数减少、SLEDAI-2000增高的SLE患者易发生LN。

MRI扩散加权成像技术辨别乏脂肪肾血管平滑肌脂肪瘤与肾癌的作用评估

目的分析和评估MRI扩散加权成像技术辨别乏脂肪肾血管平滑肌脂肪瘤(RAML)与肾癌的作用。方法选取2020年1月—2021年12月河南省人民医院所收治的168例乏脂肪RAML作为研究对象,其中33例患者于院档案库中有完整的病历资料;另外,选取2021年1月—12月所收治的33例有完整病历资料的肾癌患者作为研究对象,分析患者的MRI扩散加权影像特征与信号特点,并研究测量各病灶的表变扩散系数(ADC)。结果脂肪肾血管平滑肌脂肪瘤患者的ADC值为(1.611±0.20)×10^(-3)mm^(2)/s,肾癌患者的ADC值为(1.459±0.274)×10^(-3)mm^(2)/s,肾癌患者的ADC值明显高于乏脂肪肾血管平滑肌脂肪瘤患者,数据差异具有明显的统计学意义(P<0.05)。结论MRI扩散加权成像技术对于鉴别乏脂肪肾血管平滑肌脂肪瘤与肾癌的作用显著,可为临床治疗乏脂肪肾血管平滑肌脂肪瘤与肾癌提供具有较高准确性的影像特征,对于提升治疗效果与患者的生命质量具有重要意义,应与临床进行广泛运用与推广。

尿白蛋白/肌酐比值与原发性高血压患者临床特征的相关性分析

目的探讨尿白蛋白/肌酐比值(albumin/creatinineratio,ACR)与原发性高血压患者临床特征的关系。方法317例原发性高血压患者根据尿ACR分为观察组(尿ACR>30mg/g)67例和对照组(尿ACR≤30mg/g)250例,比较2组临床资料,分析尿ACR水平与原发性高血压临床指标的关系,采用Spearman和Pearson相关分析尿ACR水平与原发性高血压临床指标的相关性。结果与对照组比较,观察组患者年龄较大,尿蛋白阳性率、体质量指数、并发症发生率较高,病程较长,血清白蛋白水平较低,尿ACR、血清三酰甘油、血肌酐、血尿素氮、血尿酸、血糖及血清胱抑素C水平较高(P<0.05);高血压分级越高、病程越长患者尿ACR水平越高(P<0.05),有并发症者尿ACR水平[12.4(6.2,47.8)mg/g]高于无并发症者[7.4(4.5,14.4)mg/g](P<0.05);原发性高血压患者尿ACR水平与高血压分级(r=0.198,P<0.001)、体质量指数(r=0.141,P<0.037)、病程(r=0.215,P<0.001)、血尿素氮(r=0.210,P=0.003)、血尿酸(r=0.214,P=0.002)及血清胱抑素C水平(r=0.225,P=0.002)呈正相关,与血清白蛋白水平呈负相关(r=-0.191,P=0.007)。结论尿ACR是监测原发性高血压患者疾病进展的关键因素,定期检测尿ACR对原发性高血压早期肾损伤有重要的诊断价值。

NOL1/NOP2/Sun RNA甲基转移酶家族成员2在肾脏缺血再灌注损伤中的作用

目的构建肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)小鼠及细胞模型,观察NOL1/NOP2/Sun RNA甲基转移酶家族成员2(NOL1/NOP2/Sun domain family member 2,Nsun2)表达变化,探讨Nsun2在肾脏IRI中的作用。方法雄性C57BL/6N小鼠12只,随机分为IRI-3组、IRI-6组、IRI-24组和假手术组各3只。使用无损伤显微血管夹夹闭小鼠肾蒂使肾脏缺血30 min,随后移除血管夹恢复肾脏血流,IRI-3组、IRI-6组、IRI-24组分别再灌注3、6、24 h;假手术组仅做手术切口和缝合,不做其他处理。IRI-3组、IRI-6组和IRI-24组小鼠分别于再灌注3、6、24 h时,假手术组小鼠于再灌注24 h时检测血肌酐水平。取血后处死小鼠取左肾组织,行HE染色检测4组肾脏组织病理变化,行免疫荧光染色检测IRI-24组和假手术组肾脏组织Nsun2表达,采用Western blot法检测4组肾脏组织Nsun2、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)相对表达量。取人近端肾小管上皮HK-2细胞,分别应用0、100、200μmol/L CoCl_(2)处理24 h后更换正常培养基继续培养2 h,采用Western blot法检测Nsun2、Bax、Bcl-2蛋白相对表达量,确定构建IRI细胞模型的CoCl_(2)处理最适宜浓度为200μmol/L。取HK-2细胞分为siRNA-NC组、siRNA-Nsun2组,分别转染2.5μL 20μmol/L的siRNA-NC和2.5μL 20μmol/L的siRNA-Nsun2,转染6 h后培养24 h,采用Western blot法检测2组细胞Nsun2蛋白相对表达量。取siRNA-NC组、siRNA-Nsun2组细胞,应用200μmol/L CoCl_(2)处理24 h后培养2 h,分别为siRNA-NC+IRI组和siRNA-Nsun2+IRI组,采用Western blot法检测siRNA-NC组、siRNA-NC+IRI组、siRNA-Nsun2+IRI组细胞Bcl-2、Bax蛋白相对表达量,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果IRI-3、IRI-6、IRI-24组血肌酐水平[(44.44±2.96)、(49.91±5.65)、(56.41±5.13)μmol/L]均高于假手术组[(27.35±2.96)μmol/L](P<0.05),IRI-24组高于IRI-3组(P<0.05)。假手术组肾小球及间质细胞正常,肾小管上皮细胞结构完整,IRI-3组、IRI-6组、IRI-24组肾小球及间质细胞正常,肾小管上皮细胞出现空泡和颗粒化变性、崩解以及管腔堵塞,且24 h内再灌注时间越长,病理改变越重。免疫荧光染色结果显示,Nsun2定位于细胞核,呈点状分布;IRI-24组近端肾小管上皮细胞Nsun2表达明显多于假手术组。IRI-24组肾脏组织Nsun2蛋白相对表达量(0.33±0.03)高于假手术组、IRI-3组、IRI-6组(0.17±0.01、0.22±0.05、0.25±0.01)(P<0.05),IRI-6组高于假手术组(P<0.05);IRI-3组、IRI-6组、IRI-24组肾脏组织Bax蛋白相对表达量(0.52±0.04、0.54±0.06、0.44±0.04)均高于假手术组(0.14±0.01)(P<0.05),IRI-3组、IRI-6组均高于IRI-24组(P<0.05);IRI-6组、IRI-24组肾脏组织Bcl-2蛋白相对表达量(0.17±0.08、0.03±0.02)均低于假手术组、IRI-3组(0.39±0.13、0.34±0.07)(P<0.05)。200μmol/L CoCl_(2)组细胞Nsun2、Bax蛋白相对表达量(0.53±0.04、0.66±0.04)均高于0μmol/L CoCl_(2)组(0.31±0.02、0.28±0.01)和100μmol/L CoCl_(2)组(0.34±0.02、0.52±0.04)(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量(0.24±0.01)均低于0μmol/L CoCl_(2)组和100μmol/L CoCl_(2)组(0.56±0.02、0.37±0.01)(P<0.05);100μmol/L CoCl_(2)组细胞Bax蛋白相对表达量高于0μmol/L CoCl_(2)组(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量低于0μmol/L CoCl_(2)组(P<0.05)。siRNA-Nsun2组细胞Nsun2蛋白相对表达量(0.33±0.02)低于siRNA-NC组(0.64±0.07)(P<0.05)。siRNA-NC+IRI组细胞Bax蛋白相对表达量(0.61±0.03)及细胞凋亡率[(8.63±1.00)%]均高于siRNA-NC组[0.48±0.02、(1.93±0.55)%](P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量(0.44±0.05)低于siRNA-NC组(0.79±0.02)(P<0.05);siRNA-Nsun2+IRI组细胞Bax蛋白相对表达量(0.32±0.02)及细胞凋亡率[(5.33±1.12)%]均低于siRNA-NC+IRI组(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量(0.63±0.03)高于siRNA-NC+IRI组(P<0.05)。结论IRI小鼠肾脏组织及IRI肾小管上皮细胞HK-2中Nsun2表达上调,下调Nsun2表达可抑制IRI肾小管上皮细胞凋亡。