实时监控新孢子虫环介导等温扩增方法的建立及初步应用

为建立一种快速检测新孢子虫的环介导等温扩增方法(LAMP),本研究根据GenBank中登录的新孢子虫Nc-5基因序列(X84238.1)设计2对特异性引物,通过PCR扩增将新孢子虫Nc-5基因片段并克隆至pMD18-T载体中,构建重组质粒pMD18-T-Nc-5,并经PCR和测序鉴定正确后作为质粒标准品。通过优化该方法的引物浓度、反应温度,并利用LAMP浊度仪测定扩增目的基因时出现白色焦磷酸镁的浊度值实时监控反应进程,初步建立了检测新孢子虫的LAMP方法,反应结束后通过加入SYBR Green I观察荧光对结果可视化判定。反应条件优化结果显示,引物F3/B3和FIP/BIP的终浓度分别为10 pmol/μL、20 pmol/μL,63℃扩增40 min效率最佳。利用该方法检测新孢子虫、弓形虫、瑟氏泰勒虫、环形泰勒虫、双芽巴贝斯虫、伊氏锥虫核酸,并在反应结束后加入SYBR Green I观察荧光以评估该方法的特异性。结果显示仅新孢子虫核酸扩增为阳性,其余病原核酸均为阴性结果。荧光观察结果显示,新孢子虫反应管呈翠绿色荧光(阳性),其他反应管呈橙黄色荧光(阴性);对重组质粒标准品10倍倍比稀释后作为模板(即4.0×10^(7)拷贝/μL~4.0×100拷贝/μL)进行LAMP的敏感性试验,结果显示该方法对质粒标准品的检测限为4.0×10^(1)拷贝/μL,且在反应结束后加入SYBR Green I,4.0×10^(7)拷贝/μL~4.0×10^(1)拷贝/μL质粒标准品的反应管均呈翠绿色荧光(阳性),4.0×100拷贝/μL反应管呈橙黄色荧光(阴性),敏感性与《新孢子虫病检疫技术规范》(SN/T 3499)中荧光定量PCR方法的敏感性一致;分别以同一时间和不同时间提取的3个不同稀释度的质粒标准品进行批内和批间重复性试验,结果显示批内和批间重复性试验的变异系数均小于5%。综上表明该方法特异性强、敏感性高、重复性好。对895份临床疑似感染新孢子虫的动物肝脏、脑组织样品同时采用建立的LAMP方法及《新孢子虫病检疫技术规范》(SN/T 3499)中的荧光定量PCR方法检测,结果显示LAMP的阳性检测率为41.45%(371/895),阴性率为58.55%(524/895),与SN/T 3499中的荧光定量PCR检测结果一致。本研究建立的新孢子虫LAMP方法快速、敏感、特异性强,且能够实时监测反应过程并能可视化判定结果,为新孢子虫现场快速检测提供了新的技术手段。

企业文化在高职教育兽药生产与营销专业人才培养中的作用研究与实践

阐述了企业文化在高职教育人才培养中的作用,并在兽药生产与营销专业人才培养全过程中融入和渗透了企业文化,从课程设置和开发、教学活动、学生日常管理和活动三方面进行了实践探索。

犬瘟热高免卵黄抗体的制备及防治试验

用鸡胚成纤维细胞培养犬瘟热病毒制备油乳剂灭活苗,多次免疫蛋鸡制备卵黄抗体。经临床治疗试验证实卵黄抗体可有效治疗犬瘟热早期感染,治愈率达85.7%。为生产异源动物抗体提供参考。

鸡传染性喉气管炎抗原抗体复合物疫苗的研究

用传染性喉气管炎病毒K317株作为复合物疫苗抗原,与传染性喉气管炎抗体配制不同比例的5种抗原抗体复合物疫苗,用1周龄SPF雏鸡进行免疫效果试验。结果表明,传染性喉气管炎病毒K317株与特异性抗体制备的复合物疫苗,可以明显降低疫苗免疫接种引起的毒副作用,复合物疫苗安全性高,免疫效果总体上较ITLK317株常规活苗更好。

酵母多糖对商品肉鸡生产性能和免疫功能的影响

试验选用1日龄商品肉鸡,随机分为2组,对照组喂以基础日粮,试验组在对照组的基础上添加0.1%的酵母多糖,试验期7周,2组均在相同的饲养管理条件下进行。结果表明,试验组肉鸡生产性能和免疫功能均有显著影响,与对照组相比,肉鸡平均日增重提高了6.74 g(P<0.05),料重比降低了0.12(P<0.05),死淘率降低了3.33%。试验组胸腺、脾脏和法氏囊质量分别比对照组提高25.31%、21.74%、9.26%,差异显著。新城疫、禽流感抗体效价水平均有显著提高。

同胚接种IBV和ILTV制备二联疫苗

用鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)和鸡传染性喉气管炎病毒 (ILTV)以不同的稀释度按一定比例混合 ,接种同一鸡胚 ,同时收获胚液和有病斑的绒毛尿囊膜制成IB ILT二联冻干疫苗 ,按《中华人民共和国兽用生物制品规程》方法进行检验。结果 ,其安全性和效力检验均达到 2种单苗的质量标准 ,证明

中药复方制剂禽康素对鸡免疫功能的影响试验

将2周龄健康雏鸡,滴鼻免疫新城疫活疫苗,同时肌肉注射新城疫灭活疫苗,随机分为2组,试验组饲料中添加中药复方制剂禽康素,对照组饲料中不添加任何药物,连续给药14d。免疫后7、14、21d,采用β-微量血凝抑制试验检测雏鸡抗体水平,测定鸡的ERFC形成率和EAC花环形成率,计算脾脏、胸腺、法氏囊三种免疫器官指数。试验结果显示,试验组鸡和对照组相比,雏鸡抗体水平、ERFC形成率和EAC花环形成率、三种免疫器官指数均有显著提高。

基于产教融合的动物生物制品课程改革与实践

产教融合的根本任务是通过创新教育形式、整合教育资源、提高教育质量,达到提高学生岗位技能和实践能力、满足岗位需求的目的。从产教融合的教学模式入手,探索高职“动物生物制品”课程教学内容的改革与实践,取得了良好的教学效果,获得学生、行业企业及社会高度认可。

兽药生产与营销专业学生职业能力培养的探索与实践

阐述了兽药生产与营销专业学生职业能力培养的内容与实践,包括合理制定教学标准、加强教学改革、管理与质量监控以及建立职业能力培养的保障机制。

兽药生产与营销专业实践教学企业先导式教学模式研究

实践教学是高职教育极其重要的教学环节,是培养高素质技能型人才的必要途径。从建立紧密型校企合作关系、专兼职实践教师队伍建设、实践教学设计、实践教学组织实施与考核等方面,对兽药生产与营销专业实践教学企业先导式教学模式进行了介绍。该教学模式的实施有利于学生职业能力的培养和提升。

高职兽药类专业实践教学内容体系构建研究

高等职业教育具有高等教育和职业教育双重属性,以培养生产、建设、服务、管理第一线的高级技术技能型专门人才为主要任务,实践教学是实现其目标的关键。本文主要从高职兽药专业实践教学内容体系内涵、构建原则、实践教学内容体系的构建等方面进行了探索。

商品化鸡传染性法氏囊病三价活疫苗对新城疫疫苗免疫效果影响的试验

试验用商品化鸡传染性法氏囊病三价活疫苗3倍、4倍和5倍剂量分别免疫10日龄法氏囊非免疫雏鸡,免疫后3d、7d、21d剖杀,观察法氏囊的变化;免疫后7 d接种ND疫苗,接种ND疫苗后14 d和21 d分别采血进行ND HI抗体的测定。结果显示,IBD三价活疫苗5倍免疫剂量可引起法氏囊不可逆损伤,并对ND的HI抗体产生干扰作用。

投入产出分析在水库管理中的应用

从投入产出分析的应用入手,利用投入产出分析方法,对水库的部门进行划分,建立水库的投入产出简表及投入产出模型,计算其各部门的直接消耗系数和完全消耗系数,研究其投资分配情况,剖析其内部经营现状及存在的问题,从而为水库的科学管理提供新的方法,同时也为投入产出分析的应用开辟了新的空间。

鸡痘鹌鹑化弱毒在犊牛睾丸细胞上的适应性试验

鸡痘鹌鹑化弱毒在犊牛睾丸细胞上培养传至7代,各代次均产生程度不同的致细胞病变作用,经测定至第6代病毒收获液在犊牛睾丸细胞(BTC)上的致病变作用(CPE)最明显,细胞产毒效价最高可达105.5EID50/0.2mL。另外,对7个代次的病毒液进行的安全试验结果表明,该病毒收获液安全有效,符合制苗标准。此试验为用BTC生产鸡痘活疫苗提供了重要依据。

电子商务环境下第三方物流企业运作模式选择探析

随着信息化的快速发展,电子商务彻底颠覆了人们传统的消费观念,打破了时空的限制,使得物流、资金流、信息流在全球范围内迅速周转,大大提高了资源配置的效率,给物流企业带来了商机和巨大的压力。因此,电子商务环境下第三方物流企业的运作模式选择值得思考。文章以目前学术界提出的物流运作模式为基础,结合我国物流企业存在的问题,探讨在电子商务环境下第三方物流企业应该如何选择适合自己发展的物流运作模式,以满足经济高速发展的需求。

河南省物流企业重组整合问题研究

现代物流业是我国新兴的一门产业,在经济快速发展的今天,物流业也随之以飞快的速度发展。河南省地处中原,具有交通、经济和人口等优势,对于发展物流有众多有利的条件,但是目前河南省物流业整体水平比较落后,因此要想改变此种状况需要抓住机遇,借着发展中原经济的同时,大力发展物流业,其中积极引入大的物流企业并对现有物流企业进行兼并重组是快速发展的一个有效途径。重组不是问题,重点是重组后的整合,整合直接影响到企业重组的成功与否。文章主要针对河南省的物流企业兼并重组以及整合过程中存在的问题,从政府和企业的角度来分析河南省物流业的发展问题。

儿童躯体咳嗽综合征诊疗进展

躯体咳嗽综合征是儿童慢性咳嗽的常见病因之一,其典型表现为异常响亮刺耳的犬吠样、雁鸣样频繁干咳,一般入睡后咳嗽消失,且存在与咳嗽相关的感觉、想法或行为,严重影响患儿的生活、社会交往等。儿童躯体咳嗽综合征存在多种生物-心理-社会高危因素,需要与抽动性咳嗽及其他引起慢性咳嗽的疾病相鉴别。一般药物治疗(如止咳药、抗生素、抗组胺药、激素、支气管扩张剂)对于儿童躯体咳嗽综合征患者无效,目前主要采用催眠、暗示、放松、安慰等心理治疗。因此,全面了解儿童躯体咳嗽综合征的诊疗进展,可以为疾病的治疗提供新思路。