Ca^(2+)运动对α_1-肾上腺素受体引起内源性ClC-3氯通道表达的作用

目的 研究Ca2 +运动对α1 肾上腺素受体引起ClC 3氯通道表达的作用。方法 在A10细胞上 ,用RT PCR和Westernblot检测ClC 3mRNA和蛋白质表达情况。结果 苯肾上腺素 ( 10 μmol·L-1)和thapsigargin( 0 1μmol·L-1)可促进ClC 3mRNA和蛋白质的表达 ;SK&F963 65 ( 10 μmol·L-1)和genistein( 10 μmol·L-1)可抑制苯肾上腺素引起的ClC 3的表达 ,nifedipine( 10 μmol·L-1)无此作用。结论 在A10细胞上 ,通过钙池操纵性Ca2 +通道 (SOCC)的Ca2 +内流参与了α1 肾上腺素受体引起的内源性ClC 3氯通道的表达 ,而通过电压依赖性Ca2 +通道 (VDCC)的Ca2 +内流可能与此无关。蛋白酪氨酸激酶参与了ClC

人参皂苷RdC_(12)差向异构体的合成及其对大鼠主动脉环收缩反应的影响

目的 探讨人参皂苷RdC12 手性碳构型改变与其药理活性的关系。方法 制备RdC12 位差向异构体 (12 epi Rd) ;观察比较 12 epi Rd与Rd对苯肾上腺素 (phenyle phrine ,Phe)收缩大鼠离体主动脉环作用的影响。结果 首次成功制备了 12 epi Rd ;Rd(40、80 μmol·L-1)与 12 epi Rd(40、80 μmol·L-1)均可浓度依赖性抑制Phe收缩血管环的最大效应 ,其拮抗指数 pD2 ′分别为 :4 0 8± 0 15和 4 0 7±0 16 ,二者差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 人参皂苷RdC12

蛋白质酪氨酸磷酸化和氯通道参与瞬时受体电位蛋白介导钙池耗竭引起的钙内流

目的 探讨蛋白质酪氨酸磷酸化与Cl-通道对瞬时受体电位 (TRP)蛋白参与的Ca2 + 池耗竭引起的Ca2 + 内流(SOC)的调控作用。方法 采用脂质体转染和Fura 2 /AM荧光光度法 ,测定胞浆游离Ca2 +浓度 ( [Ca2 + ]i) ,比较转染人源性TRP1 (hTRP1 )和人源性TRP3 (hTRP3 )cDNA对毒胡罗卜素 (TG)引起的Ca2 + 内流的作用 ,并观察酪氨酸激酶抑制剂染料木黄酮、Cl-通道阻断剂呋塞米和 4,4 二异硫氰基芪 2 ,2 二磺酸 (DIDS)对其的影响。结果 HEK2 93细胞转染hTRP1cDNA后 ,TG引起的Ca2 + 内流显著增加 ;转染hTRP3cDNA则无明显影响。 5～ 3 0 μmol·L-1染料木黄酮、1～ 8μmol·L-1呋塞米、0 .5～ 1μmol·L-1DIDS对转染hTRP1cDNA细胞的TG诱发的Ca2 + 内流均有抑制作用。结论 hTRP1蛋白可能是HEK2 93细胞SOC的物质基础 ;酪氨酸激酶和Cl-通道均参与HEK2 93细胞SOC的调控 。

人参皂苷R_d及其C_(12)手性异构体对缺氧/再复氧后蛋白酪氨酸磷酸化的抑制作用

目的 探讨人参皂苷Rd C12 手性碳构型改变与其药理活性的关系。方法 建立牛主动脉内皮细胞 (BAEC)缺氧 /再复氧 (H/R)损伤模型 ;MTT法研究Rd 及Rd C12 手性异构体 (12 epi Rd)对H/R损伤BAEC的保护作用 ;Western印迹法检测蛋白酪氨酸磷酸化 (TPP)水平 ,研究二者对H/R损伤BAEC的TPP水平的影响。结果 0 .5～ 6 4μmol·L- 1的Rd 及12 epi Rd 能浓度依赖性的保护H/R损伤的BAEC ,二者所能达到的最大存活率分别为 (72 .7± 1.5 ) %和 (70 .0± 1.5 ) % ,EC50 分别为 (1.0 6± 0 .19)和 (1.88±0 .5 5 ) μmol·L- 1(P <0 .0 5 )。Rd 及 12 epi Rd 均可抑制H/R引起的TPP水平的提高 ,浓度为 1,4 ,16μmol·L- 1时 ,Rd 的抑制率分别可达 (2 4 .3± 6 .8) % ,(5 2 .6± 8.7) %及 (73.4± 11.4 ) % ;而 12 epi Rd 的抑制率分别可达 (12 .8± 4 .4 ) % ,(2 4 .1± 10 .3) %及(4 2 .5± 13.0 ) % ,二者在三个浓度点的抑制率均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 人参皂苷Rd C12 手性碳构型的改变对其保护H/R损伤BAEC的作用及抑制H/R诱导的TPP水平增强的作用有一定的影响。RdC12 手性碳构型改变明显降低其抑制TPP增强的作用可能是其保护作用下降的重要原因之一。

胰岛素受体底物1低表达促进头颈部鳞状细胞癌的侵袭转移

目的:研究胰岛素受体底物1(insulin re-ceptor substrate 1,IRS-1)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)侵袭转移中的作用及其可能的机制。方法:应用定量RT-PCR法检测HNSCC患者淋巴结转移灶和原发灶癌组织中IRS-1mRNA的表达,以及不同转移能力头颈部肿瘤细胞株上IRS-1mRNA的表达。用Taqman探针法检测miR-9及U6的相对表达量。利用小干扰RNA技术阻抑IRS-1表达,肿瘤细胞侵袭实验检测IRS-1干扰前后对细胞侵袭能力的影响。用定量RT-PCR和Western blot检测上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的标志物E-cad-herin及vimentin mRNA和蛋白的表达;用SRB法检测细胞存活率。结果:(1)HNSCC患者淋巴结转移灶中IRS-1mRNA的表达低于原发灶(P<0.05);高转移性HNSCC细胞株中IRS-1mRNA的表达低于低转移性细胞株(P<0.05)。(2)下调IRS-1表达,肿瘤细胞的侵袭能力增强,上皮-间叶转化标志物E-cadherin表达下降,同时伴有miR-9表达的升高。结论:IRS-1低表达可能通过上皮-间叶转化和上调miR-9而增强细胞的侵袭能力,促进HNSCC的转移。

信息化建设与经济增长关系的实证研究

为科学衡量信息技术对经济的带动作用,指导区域信息化建设和经济建设,以顺义区为例,在对顺义区信息指数进行测算的基础上,利用改良的函数模型定量分析了信息化建设对区域经济增长的贡献和影响,研究表明信息化建设对地区经济增长具有显著的推动作用,能有效促进经济的增长。

谈农业院校在化学教学中加强创新人才的培养

农业院校在教学实践中,更新教育教学观念,改进教育教学方法和手段,培养学生创新的学习方法,重视发散思维训练,把培养学生对本学科的兴趣和创新能力作为教学的关键,是推进素质教育、提高教学质量的重要方面。如何在农业院校化学教学中对学生进行实践能力和创新能力的培养,如何造就出新世纪所需的高素质创新人才,是化学教育所面临的重要课题之一。

eIF4E在非小细胞肺癌耐药性中的作用

探讨eIF4E对厄洛替尼耐药细胞株细胞增殖的影响及作用机制.在配对的厄洛替尼敏感和耐药细胞株(HCC827-EP、HCC827-ER)上,采用实时定量PCR检测mRNA水平的变化,Western Blot检测蛋白水平的变化;通过SRB检测细胞的生长和药物的抑制率的变化.以及用脂质体转染eIF4E的小干扰RNA,用上述方法检测多种信号分子mRNA、蛋白水平的变化,及对细胞生长和对药物抑制率的影响.结果显示,与HCC827-EP相比,eIF4E在HCC827-ER上高表达;HCC827-ER转染eIF4E siRNA的细胞生长速度明显减慢,从第3 d起差异具有统计学意义(P<0.05),在相同浓度的厄洛替尼作用下,转染eIF4E siRNA的细胞具有更高的抑制率,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:下调eIF4E的表达能够增强厄洛替尼对NSCLC的抑制作用,eIF4E的高表达参与了厄洛替尼获得性耐药的产生.

eIF4E在CXCL12诱导的胃癌转移中的作用和机制

探讨e IF4E在CXCL12诱导胃癌细胞形态学改变和迁移中的作用和机制.在胃癌细胞株(SGC7901,MGC803)上给予CXCL12处理,显微镜下观察细胞形态的改变;通过transwell实验检测CXCL12对胃癌细胞迁移能力的影响;在SGC7901上给予CXCL12处理,用Western blot检测e IF4E磷酸化和总蛋白水平的变化;用脂质体转染e IF4E的小干扰RNA,检测e IF4E对胃癌细胞形态学和迁移的影响;以及用qRT-PCR检测与肿瘤侵袭转移密切相关的因子MMP9的mRNA水平的表达.结果显示,给予CXCL12处理,胃癌细胞形态由上皮表型向长梭形的间叶样表型转变,细胞的迁移能力提高.在相同浓度的CXCL12处理情况下,转染e IF4E siRNA抑制e IF4E的表达,可抑制CXCL12诱导的细胞的形态学改变和迁移能力.另外,CXCL12引起与肿瘤转移密切相关因子MMP9的mRNA水平的表达升高,而用siRNA抑制e IF4E的表达,可下调MMP9的mRNA表达水平.结论:CXCL12激活了e IF4E,阻抑e IF4E的表达抑制CXCL12诱导的形态学改变和细胞迁移,其作用机制可能与上调MMP9的表达有关.

如何上好对外汉语听力课

“听、说、读、写”这四项技能是汉语学习中的基本。而在四个单项技能课型的排列顺序中居于首位的是听力课，没有“听”何来“说”，这足以显示听力课的重要性。我们对外汉语教学的目的就是培养学习者运用汉语进行交际的能力，而听力技能的好坏直接关系到汉语的交际能力和语言能力，所以。如何让上好对外汉语听力课显得尤为重要。

金雀异黄素通过调控miR-27a及其靶基因对卵巢癌细胞SKOV3生长的影响

目的:研究金雀异黄素对卵巢癌细胞株SKOV3生长的抑制作用及其可能的机制。方法:收集卵巢癌组织及良性组织,应用RT-PCR法检测miR-27a的表达。用不同浓度的金雀异黄素处理细胞,通过SRB法检测金雀异黄素单用或加入miR-27amimics后对细胞株生长的抑制作用;经RT-PCR和Western blot检测miR-27a及靶基因Sprouty2表达的变化。结果:miR-27a在卵巢癌组织中的表达高于良性组织(P<0.05)。金雀异黄素可呈浓度和时间依赖的方式抑制卵巢癌细胞SKOV3生长;金雀异黄素浓度依赖性地下调miR-27a,上调Sprouty2的表达,且miR-27amimics能够部分拮抗金雀异黄素抑制细胞生长的作用。结论:金雀异黄素可能通过下调致癌miR-27a的表达,发挥抑制卵巢癌细胞生长的作用。

哌立福辛通过激活GSK3β抑制雷帕霉素耐药细胞的生长

目的:研究哌立福辛对雷帕霉素耐药的非小细胞肺癌细胞株生长的抑制作用和机制。方法:用SRB法检测哌立福辛单用以及联用LiCl对细胞株生长的抑制作用。用Western blotting法检测哌立福辛对细胞内Akt,GSK3β信号的调控作用。结果:哌立福辛对雷帕霉素敏感和耐药细胞株的生长有相似的抑制作用。在耐药细胞上,哌立福辛未明显抑制Akt的磷酸化,却可以显著抑制GSK3β的磷酸化,从而激活GSK3β。用LiCl抑制GSK3β的活性可以阻断哌立福辛对耐药细胞生长的抑制作用。结论:哌立福辛可以通过激活GSK3β抑制雷帕霉素耐药的非小细胞肺癌细胞的生长。

FASN对Erlotinib耐药细胞株生长的影响及其机制

目的:探讨脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)在非小细胞肺癌(non-small-cell carcinoma,NSCLC)中,对厄洛替尼(Erlotinib)耐药细胞株生长的影响和其可能的机制。方法:应用实时定量PCR技术以及Western blot技术分别检测HCC827-EP细胞株与HCC827-ER细胞株中的FASN mRNA和蛋白水平变化。利用小干扰RNA技术阻抑FASN表达后,以SRB法检测干扰前后对HCC827-EP/ER细胞株生长作用的影响。以及阻抑FASN表达后,用实时定量PCR技术和Western blot检测叉头蛋白O1(forkhead box protein O1,FoxO1)水平的变化。用活性形式的FoxO1腺病毒感染细胞后,以SRB法检测细胞的存活率。结果:Erlotinib耐药细胞株的FASN表达水平高于亲代细胞株;阻抑FASN的表达,抑制了耐药细胞株的生长;下调FASN的表达,FoxO1mRNA及蛋白水平均有所升高。上调FoxO1的表达,抑制了耐药细胞株的生长。结论:FASN的高表达发生于Erlotinib耐药细胞株中,下调FASN表达可以抑制耐药细胞株的生长,其可能机制是抑制FASN表达上调了FoxO1,从而抑制了细胞的生长。

柚皮苷通过下调p70S6K抑制非小细胞肺癌细胞生长的作用机制研究

目的:研究柚皮苷对非小细胞肺癌细胞生长的作用及机制。方法:应用SRB法检测柚皮苷对非小细胞肺癌细胞株生长的抑制作用。用Western blot法检测柚皮苷对p70S6K的调控作用。利用质粒过表达p70S6K,用SRB法检测过表达p70S6K后对柚皮苷抑制细胞生长作用的影响。利用小干扰RNA阻抑p70S6K的表达,用SRB法检测阻抑p70S6K的表达对柚皮苷抑制细胞生长作用的影响。结果:柚皮苷呈浓度依赖性抑制非小细胞肺癌细胞的生长,并且可以下调p70S6K的表达。过表达p70S6K可以削弱柚皮苷抑制细胞生长的作用,敲降p70S6K可以增强柚皮苷抑制细胞生长的作用。结论:柚皮苷通过下调p70S6K抑制非小细胞肺癌细胞的生长。

利多卡因抑制基质金属蛋白酶活性改善脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的机制研究

考察利多卡因对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠模型血浆中基质金属蛋白酶MMP-9和MMP-2活性的影响,并探讨其改善LPS诱导的急性肺损伤的作用机制。小鼠尾静脉注射不同浓度的利多卡因(2,4,8 mg/kg,iv)预处理30 min,再腹腔注射LPS 10 mg/kg刺激12 h建立小鼠ALI模型,测定小鼠7 d存活率及肺组织湿/干重比;Western blot法检测肺组织中p38 MAPK的磷酸化水平;明胶酶谱法测定血浆中MMP-9和MMP-2活性。实验结果发现,利多卡因预处理可剂量依赖性提高ALI小鼠存活率,降低肺组织湿/干重比,抑制血浆中MMP-9和MMP-2活性,并下调肺组织中p38的磷酸化水平。研究结果表明,利多卡因改善LPS诱导的小鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制基质金属蛋白酶的活化有关。