2022年宁波市南美白对虾主要病原流行病学调查

为了解虾肝肠胞虫(EHP)、十足目虹彩病毒1(DIV1)、白斑综合征病毒(WSSV)和致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(Vp AHPND)在宁波地区养殖南美白对虾中的致病途径和流行规律,采用PCR方法检测了该地区不同养殖模式下南美白对虾及其周边环境和生物中这4种病原的感染情况。结果显示:南美白对虾样本中,WSSV在整个养殖过程中未检出,Vp AHPND阳性率最高,为14.6%,其次是EHP和DIV1,阳性率分别为10.2%和2.9%;土塘养殖模式下对虾病原检出率最高,为61.3%,其次为小棚模式和帆布池模式,病原检出率分别为26.3%和22.2%,大棚养殖的南美白对虾中未检出病原;水样中检出WSSV、EHP、Vp AHPND、DIV1阳性批次数分别为1、14、8、6;底泥样品中未检出病原;周边环境生物中,仅1个批次的脊尾白虾检出EHP阳性。结果表明:4种病原在夏季有较强的流行趋势,需要针对性地加强防控;大棚养殖模式的抗风险能力要高于其他养殖模式,在该模式下水质相对稳定,受外界因素影响较小;病原在底泥和周边环境生物中检出率较低,而在养殖水体中检出率较高,养殖水体可能在南美白对虾感染病原的过程中起着重要的传播媒介作用。因此,在养殖过程中加强水体调控十分重要。

乳腺X线摄影、MRI及病理联合诊断乳腺癌分子分型

目的观察乳腺X线摄影(MG)、MRI及病理联合诊断乳腺癌分子分型的价值。方法收集600例乳腺癌女性患者,包括Luminal A型147例,Luminal B型277例,人表皮生长因子受体2(HER-2)过表达型65例及三阴型111例;比较不同分子分型乳腺癌的MG、MRI及病理特征,行logistic回归分析,观察不同分子分型的独立影响因素;构建病理模型(模型1)、MG+病理模型(模型2)、MRI+病理模型(模型3)及MG+MRI+病理模型(模型4),评估其诊断价值,并以SHAP分析评估最佳诊断模型中各参数的贡献价值。结果组织学低分级浸润性导管癌、无腋窝淋巴结转移、MG假阴性、无恶性钙化及“流入型”时间-信号强度曲线(TIC)为Luminal A型乳腺癌的独立影响因素(P均<0.05),腋窝淋巴结转移、恶性钙化及毛刺征为Luminal B型的独立影响因素(P均<0.05),组织学高分级浸润性导管癌、恶性钙化、毛刺征、非肿块样强化(NME)及较高表观弥散系数为HER-2过表达型的独立影响因素(P均<0.05),组织学高分级浸润性导管癌、无恶性钙化及无毛刺征为三阴型的独立影响因素(P均<0.05)。模型2是诊断Luminal A型及HER-2过表达型乳腺癌的最佳模型[曲线下面积(AUC)=0.663、0.621],模型4是诊断Luminal B型及三阴型乳腺癌的最佳模型(AUC=0.649、0.642)。恶性钙化、腋窝淋巴结转移及毛刺征对诊断乳腺癌分子分型的贡献价值较大。结论MG、MRI及病理联合模型对诊断乳腺癌分子分型具有一定价值;恶性钙化、腋窝淋巴结转移及毛刺征的价值较大。

基于临床、病理及影像特征的列线图预测乳腺癌新辅助治疗后残余小病灶病理完全缓解

目的:探讨基于临床、病理及MRI特征构建的列线图在预测乳腺癌新辅助治疗(NAT)后残余小病灶病理完全缓解(pCR)中的价值.方法:回顾性收集我院2018年1月至2022年5月接受NAT并手术的首诊女性乳腺癌患者,其中2018年1月至2021年5月就诊的患者为建模组,2021年6月至2022年5月为外部验证组.收集患者的临床病理及NAT前、后MRI影像资料,通过logistic回归分析确定残余小病灶pCR的独立预后因素并构建列线图.通过受试者工作特征(ROC)曲线及校准图评估列线图的诊断效能.结果:HER2阳性,Ki-67高表达和较低的早期信号强化率是乳腺癌NAT后残余小病灶pCR的独立预后因素,所构建的列线图在验证组中表现出较高的诊断效能(ROC曲线下面积=0.95,95%CI0.85~0.99)和校准能力(C指数=0.93,95%CI0.88~0.98).结论:基于临床、病理及MRI特征构建的列线图在预测乳腺癌NAT后残余小病灶pCR上显示出较好的预测能力,为临床诊疗提供依据.

磁珠快速核酸提取法在南美白对虾病原检测中的应用及其性能评价

为实现南美白对虾相关病原核酸快速、便捷提取,并实现原材料国产化,降低成本,建立了一种基于国产磁珠的核酸快速提取方法(以下简称磁珠法).以携带虾肝肠胞虫的南美白对虾为实验样本,通过微流控芯片对3种磁珠提取的核酸进行测试,并对裂解液中盐酸胍浓度及洗涤液2中乙醇浓度进行了优化.通过优选实验确定:奥润磁珠提取效果优于其他两种磁珠;裂解液中盐酸胍的最佳浓度为4 mol·L^(-1);洗涤液2中乙醇的最佳质量分数为75%.在此基础上,分析评价了优化后的磁珠法核酸提取线性范围、灵敏度、精密度、特异性及抗干扰能力等技术性能.结果显示:稀释10^(4)倍后的低浓度病原核酸仍保持较好的扩增效果,变异系数为2.03%,表明建立的磁珠法具有较宽的检测范围,灵敏度高,特异性和抗干扰能力强.本文建立的磁珠法可实现快捷、通用、高纯度、低成本的南美白对虾主要病原的核酸提取.

2020—2022年宁波市大黄鱼病原菌耐药状况分析

为掌握近几年宁波市大黄鱼主要病原菌的种类及其耐药趋势,本研究于2020—2022年在宁波市大黄鱼主要养殖基地采集患病鱼体进行病原菌的分离鉴定,并对分离的病原菌进行恩诺沙星、硫酸新霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、盐酸多西环素、氟甲喹、磺胺间甲氧嘧啶钠、磺胺甲噁唑+甲氧苄啶8种抗菌渔药最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)的测定,比较各病原菌对药物的感受性。结果表明,近3年从大黄鱼体内共分离到7种、58株病原菌,主要病原菌为杀香鱼假单胞菌、哈维氏弧菌和鰤鱼诺卡氏菌,占总菌株数的74.1%,其中哈维氏弧菌和鰤鱼诺卡氏菌每年都有被分离到。100%分离的菌株对盐酸多西环素敏感,所有菌株对该药物的感受性均分布在MIC≤4.00 mg/L,耐药率为0%;相较而言,病原菌对氟苯尼考及磺胺类药物的耐受浓度较高,尤其磺胺类药物MIC普遍为64.00~1024.00 mg/L。另外,从病原菌耐药性年度变化可知,鰤鱼诺卡氏菌每年对药物的耐受性呈逐年递增的趋势。因此,虽然病原菌普遍对盐酸多西环素、硫酸新霉素、恩诺沙星敏感,其可作为防治大黄鱼多数病原菌的优选药物,但必须严格按照药敏试验结果及结合药代学、药效学确定剂量和药程,才能尽可能避免耐药菌株的产生。

2021年浙江省宁波市南美白对虾养殖期EHP和DIV1病原监测

为了解浙江省宁波市南美白对虾主养区虾肝肠胞虫(EHP)、十足目虹彩病毒1(DIV1)的流行规律,2021年3—9月,在宁波市鄞州、象山、宁海、奉化等地区的15个养殖场共采集119批次南美白对虾养成期样本,采用PCR方法检测EHP和DIV1。结果显示:EHP批次阳性率为26.9%(32/119),DIV1批次阳性率为10.9%(13/119),EHP+DIV1混合感染批次阳性率为2.5%(3/119);EHP批次阳性率在各个养殖区域之间差异不显著(P>0.05),象山的DIV1批次阳性率最高,为30.4%(7/23),显著高于奉化(P<0.05),但与其他两地差异不显著(P>0.05);EHP批次阳性率在体长3 cm以上的虾样中显著高于小于3 cm的虾样(P<0.05),而DIV1批次阳性率在不同体长对虾中均无显著差异(P>0.05);EHP批次阳性率4—5月显著低于6—9月(P<0.05),DIV1批次阳性率7—8月显著高于其他月份(P<0.05);EHP在体表发红症状的批次中未检出,在其余症状的批次中均有检出,DIV1在有体表发红症状的批次中阳性率较高,为91.0%(10/11)。结果表明:EHP在宁波市流行严重,主要流行于体长大于3 cm的养殖中后期对虾,前期感染症状不明显;DIV1流行得到一定的控制,现主要流行于体长3~6 cm的对虾,体表发红是DIV1感染的重要病症;两种病原在夏季都有较强的流行趋势,需针对性加强防控。本监测初步掌握了宁波市南美白对虾中EHP和DIV1的流行规律,为宁波市南美白对虾病害防控提供了参考。

宁波市南美白对虾养成期病原分析

南美白对虾是浙江省四大水产养殖主导品种之一,具有味道鲜美、加工出肉率高、生长速度快、易养殖等特点。宁波市1997年开展南美白对虾养殖,随着人工养殖的蓬勃发展,南美白对虾成为宁波地区重要的水产养殖经济品种。

浙江省宁波市大黄鱼病原菌分离鉴定及其耐药性分析

为掌握浙江省宁波市大黄鱼细菌性病原的流行种类及其耐药性,2021年在宁波市大黄鱼主要养殖区域,现场采集临床发病或濒临死亡的个体进行病原菌分离鉴定。同时,对分离到的病原菌进行最低抑菌浓度(MIC)测定,比较各药物对菌株的MIC中位值(MIC50)。结果显示:从采集的93尾大黄鱼中,共分离到25株细菌。其中,1—5月分离到8株杀香鱼假单胞菌,5—8月分离到10株弧菌(溶藻弧菌和哈维氏弧菌各4株,副溶血弧菌2株),8—10月分离到5株鰤鱼诺卡氏菌,此外5月还分离到2株美人鱼发光杆菌。分离到的病原菌普遍对盐酸多西环素和氟甲喹敏感,尤其是盐酸多西环素,5种菌株的MIC50均小于0.06 mg/L;两种磺胺类药物对病原菌的MIC50较往年有明显下降趋势(杀香鱼假单胞菌除外),而两种酰胺醇类药物的抑菌效果一般;不同时间、不同地区分离到的同种细菌,其耐药性并不完全一致。结果表明,不同菌株对药物的感受性存在差异化,因此在药物选择及剂量上应参考药敏试验结果,不可盲目用药。该结论将为养殖过程中某阶段特定细菌性病害防控提供参考,同时也为规范、精准使用渔用抗菌药提供技术支撑。

2020年宁波市主养海水鱼流行病学调查与药敏试验

为了解宁波地区水产养殖品种病害发生情况,本研究于2020年通过定期抽检与应急检测相结合方式,开展了地区性的主要海水鱼流行病学调查工作.从大黄鱼、小黄鱼、七星鲈鱼、银鲳等海水鱼上共分离到细菌19株,主要菌株为哈维氏弧菌和美人鱼发光杆菌;检测出病毒阳性26批次,主要为传染性脾肾坏死病毒和真鲷虹彩病毒;镜检观察到寄生虫2例,分别为东方鱼虱和梅氏新本尼登虫.药敏试验结果显示:从鱼体分离得到的致病菌对盐酸多西环素、氟甲喹敏感2种药物的最小抑菌浓度(MIC)普遍<0.1 mg·L^(-1),因此其可作为优选药物进行细菌病的治疗.另外发现在不同时间段,大黄鱼上分离到的同种细菌对药物的敏感性并不一致.药敏试验结果将有助于养殖户做到科学、精准用药,同时也能为本地水产养殖动物病原菌的耐药性普查工作提供理论基础.

2021年宁波市南美白对虾苗种病原携带情况调查

为了解宁波市南美白对虾苗种病原携带情况,于2021年在宁波市象山、宁海、奉化、余姚、慈溪、鄞州等区县主要南美白对虾养殖产区采集522批次虾苗样品,以PCR方法检测样品携带虾肝肠胞虫(EHP)、急性肝胰腺坏死病(AHPND)、十足目虹彩病毒1(DIV1)和白斑综合征病毒(WSSV)病原情况,结果表明近年来宁波市南美白对虾苗种病原携带状况日渐改善,并为下一步宁波市开展南美白对虾疾病防控工作提供参考。

2020年浙江省宁波市南美白对虾虾苗主要病原携带情况调查

为了解浙江省宁波市对虾主养区苗种虾肝肠胞虫(EHP)、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)、对虾白斑综合征病毒(WSSV)以及导致急性肝胰腺坏死病的副溶血弧菌(VP)4种病原的携带情况及特点,2020年2—8月采用PCR检测方法,对象山、宁海、奉化、余姚、慈溪、鄞州等地虾苗进行4种病原检测。结果显示:共检测45个养殖场点的南美白对虾虾苗样品268批次,在41批次虾苗样品中检出至少1种病原,整体阳性率为15.30%;EHP阳性率最高(8.96%),其次是VP(2.98%)和SHIV(2.24%),WSSV最低(1.12%);产自浙江本省的虾苗阳性率最高(30.77%),产自广东(21.51%)、海南(11.54%)、福建(6.35%)的次之,产自山东的最低(0),经列联表分析方法计算χ^(2)=13.757,表明虾苗病原携带率(阳性率)与苗种产地之间相关性极为显著;不同病原的携带率呈现不同的时间分布特征,但整体来看,6月病原阳性率相对较高,7—8月最低,均未检出。结果表明,宁波市南美白对虾虾苗存在一定程度的病原污染,其中EHP污染最为严重,产自浙江本省以及6月份的虾苗病原污染率最高,需要针对性加强防控。本研究为宁波市对虾养殖业的病害防控提供了参考。