角膜内皮功能紊乱的易患因素

角膜内皮细胞密度是临床医师评估角膜内皮功能最常用的项目，但角膜内皮功能紊乱却没有得到相应的重视。近年来对各种眼部原发疾病、角膜移植术后等所致角膜内皮功能紊乱的临床数据有了更翔实的更新。眼部原发病中，各种类型的青光眼对角膜内皮的影响不尽相同，其中急性闭角型青光眼对角膜的损伤程度较慢性闭角型青光眼及开角型青光眼严重，青光眼不同的治疗方案对内皮的影响也各有特点。葡萄膜炎患者角膜内皮损伤的严重程度与炎症复发频数、炎症反应程度及病程密切相关。剥脱综合征患者前房含氧量低、细胞外纤维物质在眼前段的堆积、细胞发生纤维化改变等因素均可降低角膜内皮的功能，导致剥脱综合征患者角膜内皮细胞对损伤的耐受性差。对于角膜移植术后的患者，角膜移植排斥反应、手术方式、原发病、继发性晚期角膜内皮衰竭是角膜移植术后患者角膜内皮功能紊乱的重要因素。糖尿病是引起角膜内皮细胞储备能力下降的常见的全身性疾病，糖尿病患者细胞膜Na＋/K＋-ATP酶泵的功能降低、大量的晚期糖基化终产物的生成、代谢应激作用增强等因素均可降低角膜内皮创伤修复及愈合能力。本文就角膜内皮功能紊乱的易患因素进行综述，以帮助临床医师理解及重视该因素在内眼手术前的评估。

心血管疾病危险因素对眼压影响的研究进展

青光眼是全球第二大致盲因素,而高眼压是青光眼发病及病程进展的高危因素,降低眼压是治疗青光眼最有效的方法。近年来,眼压与心血管疾病危险因素关系的临床研究日益增多,本文就此研究进展进行综述,以使得临床眼科医生在进行青光眼诊治时更重视内科疾病对眼压的影响。

角膜穿通伤早期兔眼角膜上皮基底膜的修复和再生过程

目的观察角膜穿通伤早期兔眼角膜上皮基底膜(EBM)的修复和再生过程。方法采用随机数字表法将42只新西兰白兔分为建模后1、3、5、7、14、21和30 d组,每组6只,均取右眼建模作为实验眼。另取6只未经任何处理的新西兰白兔作为正常对照组。应用2.0 mm环钻建立兔角膜环钻穿通伤模型。建模后各组于相应时间点在裂隙灯显微镜下观察角膜,Image J软件测定角膜荧光素着色面积评估上皮愈合情况,Fantes分级量表评估角膜混浊程度,苏木精-伊红染色观察角膜上皮和基质修复情况,透射电子显微镜下观察EBM再生情况。结果兔角膜穿通伤后各组角膜荧光素染色面积总体比较,差异有统计学意义(F=3398.88,P<0.01),其中建模后1、3、5、7和14 d组角膜上皮荧光素着色面积分别为(4.00±0.10)、(3.11±0.10)、(2.00±0.06)、(0.90±0.04)和(0.67±0.03)mm2,角膜上皮荧光素着色面积逐渐缩小,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05);建模后21 d和30 d组均未见角膜上皮荧光素着色。建模后1、3、5、7、14、21和30 d组角膜混浊程度评分分别为3.44±0.53、0.67±0.25、1.33±0.50、2.11±0.60、2.44±0.53、3.22±0.44和3.78±0.44,建模后1~5 d角膜混浊评分下降,建模后5~30 d角膜混浊评分逐渐升高,各组角膜混浊评分总体比较,差异有统计学意义(F=51.182,P<0.01)。苏木精-伊红染色结果显示角膜伤口区开始由纤维斑块填充,建模后3 d组单层上皮覆盖,建模后5 d组大量成纤维细胞及其分泌的细胞外基质填充,建模后21 d及30 d组前部基质中胶原纤维排列紧密。透射电子显微镜下观察结果显示,伤口区由肌成纤维细胞及不规则胶原纤维填充,建模后21 d角膜基质开始重塑,EBM于建模后21 d和30 d开始不完全再生。结论兔角膜穿通伤后角膜纤维化启动并逐渐加重,EBM不完全再生。

转化生长因子-β(TGF-β)空间动态分布的角膜基质创伤修复体外三维培养体系的构建

目的研究构建模拟角膜基质创伤修复过程中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)空间动态分布的体外三维培养系统。方法从新鲜牛眼中分离角膜基质细胞,用含体积分数10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM/F12培养基进行培养,而后构建Pellet体外三维培养模型进行培养。将Pellet分为有透析袋组和无透析袋组,置入Transwell小室系统上下室中培养48 h后换液,上室为0.50μg·L^(-1)TGF-β1+0.25μg·L^(-1)TGF-β2+体积分数10%FBS,下室为体积分数10%FBS,分别于培养后72 h观察Pellet培养模型的形态变化并采用Real-time PCR法分别检测2组上下室Pellet中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)和ColⅢmRNA相对表达量。结果培养后72 h Pellet均呈团状生长。有透析袋组Transwell小室系统上、下室α-SMA mRNA表达量分别为1.595±0.025、1.148±0.009,FN mRNA表达量分别为1.090±0.011、0.844±0.015,ColⅠmRNA表达量分别为1.445±0.035、1.165±0.008,ColⅢmRNA表达量分别为1.726±0.031、1.314±0.020,ColⅢ/ColⅠ比值分别为1.126±0.019、0.957±0.013,上下室各项指标比较差异均有统计学意义(均为P=0.000)。无透析袋组Transwell小室系统上、下室α-SMA mRNA表达量分别为1.363±0.018、1.360±0.002,FN mRNA表达量分别为0.946±0.017、0.952±0.012,ColⅠmRNA表达量分别为1.261±0.011、1.258±0.029,ColⅢmRNA表达量分别为1.459±0.027、1.462±0.033,ColⅢ/ColⅠ比值分别为1.157±0.029、1.163±0.090,上下室各项指标比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。无透析袋组上室细胞中α-SMA、FN、ColⅠ和ColⅢmRNA的相对表达量与有透析袋组上室、有透析袋组下室比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。无透析袋组下室细胞中α-SMA、FN、ColⅠ和ColⅢmRNA的相对表达量与有透析袋组上室、有透析袋组下室比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 Transwell小室系统与透析袋相结合可构建模拟TGF-β空间动态分布的体外三维培养系统。