黑根霉胞外多糖联合奥沙利铂对二甲肼诱导的大鼠结肠癌的抑制作用及对Survivin/caspase-3/caspase-7的影响

目的研究黑根霉胞外多糖(exopolysaccharide from Rhizopus nigricans,EPS)联合奥沙利铂对大鼠结肠癌的抑制作用及其作用机制。方法采用皮下注射1,2-二甲肼(DMH)建立大鼠结肠癌模型。将实验大鼠随机分为空白对照组、模型组、EPS组(150 mg·kg^(-1))、奥沙利铂组(10 mg·kg^(-1))和EPS+奥沙利铂组。HE染色观察大鼠结肠组织的病理学变化; Western blot和免疫组化法检测大鼠结肠组织中Survivin、caspase-3和caspase-7的蛋白表达变化。结果HE染色结果可见,治疗组可以明显改善结肠组织的损伤程度。与模型组相比,治疗组中Survivin蛋白的表达下降,caspase-3、caspase-7蛋白的表达上升,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 EPS和奥沙利铂都具有抑制大鼠结肠癌的作用,且协同效果更明显。其作用机制可能是通过抑制Survivin蛋白的表达,升高caspase-3和caspase-7蛋白的表达,从而促进肿瘤细胞的凋亡,抑制了肿瘤的发生和发展。

牛蒡低聚果糖的提取条件及其稳定性研究

目的:研究牛蒡低聚果糖的最佳提取条件及其稳定性。方法:通过单因素实验及正交实验对牛蒡低聚果糖的提取条件进行优化,采用蒽酮法测定其在不同条件下的稳定性。结果:牛蒡低聚果糖最佳提取条件为固液比1∶25、提取温度80℃、提取时间90 min,在此条件下,牛蒡低聚果糖得率为67.54%。牛蒡低聚果糖热稳定性及光照条件下稳定性较好,易被氧化,在pH>8或pH<4及含有Cu^(2+)、Fe^(3+)溶液中的稳定性较差。结论:牛蒡低聚果糖在存储过程中应避免与空气及铁铜制品直接接触,提取时温度应低于90℃,且溶液无强酸碱性。

不同分子量菊芋多糖的生物活性研究

研究不同醇沉组份的菊芋多糖分子量和其抑制α-葡萄糖苷酶活性与抗氧化活性差异。菊芋水提物分级醇沉获得粗多糖,过Sephadex G-50凝胶柱进行纯化,得到重均分子量为1959、2180、2746、2011 Da的多糖组分:JAP-1、JAP-2、JAP-3和JAP-4。测定这些组分体外抑制α-葡萄糖苷酶活性和对DPPH与羟基自由基清除能力。结果表明,JAP-4具有较明显的抑制α-葡萄糖苷酶活性,在5 mg/mL时抑制率为20.32%。JAP-1、JAP-2、JAP-3和JAP-4均有显著的抗氧化活性,其中JAP-2对DPPH自由基和羟基自由基的清除活性优于其他组分。JAP-2在2 mg/mL时对DPPH自由基和羟基自由基清除率分别达到84.50%和89.74%,接近于Vc的抗氧化活性。不同分子量菊芋多糖的活性存在差异,可能是由于分子量的不同所导致。

毛霉菌菌丝体多糖的提取工艺优化和抗氧化活性

优化毛霉菌菌丝体多糖(MPS)的提取条件,研究其抗氧化活性。利用单因素试验和正交试验考察料液比、提取时间、提取温度和提取次数对菌丝体多糖提取率的影响,检测MPS对DPPH、ABTS和羟自由基的清除活性评价其抗氧化活性,研究MPS对人肝癌HepG2细胞增殖的影响。毛霉菌菌丝体多糖的最佳提取条件为料液比1∶50 (g/mL),提取时间2 h,提取温度为80℃,重复提取2次;在此条件下, MPS的提取率为18.24%, MPS能够清除DPPH、ABTS和羟自由基,在5 mg/mL时对三种自由基的清除率分别是42.76%, 40.59%和42.76%。同时, MPS对人肝癌Hep G2细胞的增殖无显著影响。文章确定了毛霉菌菌丝体多糖的最佳提取工艺,并发现该多糖具有一定的抗氧化活性。

黑根霉胞外多糖摇瓶发酵条件优化及体外抗氧化活性

目的:优化黑根霉胞外多糖摇瓶发酵条件及其体外抗氧化活性的研究。方法:在单因素试验的基础上采用正交试验,考察不同的发酵时间、装液量和转速对黑根霉胞外多糖摇瓶发酵产糖量和真菌生长的影响。通过测定对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、羟基自由基(·OH)的清除能力评价其抗氧化活性。结果:经试验确定黑根霉胞外多糖摇瓶发酵的最佳条件为发酵时间6d、装液量150mL、摇瓶转速160 r/min。在EPS浓度为5 mg/mL时,对DPPH自由基和·OH自由基的清除率分别达到71.65%和76.60%。结论:通过对黑根霉胞外多糖摇瓶发酵条件的优化提高了发酵的生物产量和效率;同时明确了黑根霉胞外多糖有较强的抗氧化能力,试验结果为黑根霉胞外多糖的研究与开发提供了理论依据。

菊芋在腌制前后化学成分及菊芋多糖分子质量变化

为了解菊芋在腌制前后还原糖、多糖、蛋白质、脂肪的含量变化,以及菊芋多糖分子质量的变化。采用硫酸蒽酮法和3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定总糖含量和还原糖含量,2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠(BCA)法测定蛋白质含量,索氏提取法提取粗脂肪并测定脂肪含量,利用高效凝胶色谱法和凝胶渗透色谱(GPC)软件测定重均分子量。实验结果表明,在腌制过程中,菊芋多糖含量由36.77%减少到6.62%,还原糖含量由18.33%减少到1.52%,蛋白质含量由15.61%减少到5.85%,脂肪含量由4.46%减少到4.13%,重均分子量由2604 u增加至4664 u。在腌制过程中,由于微生物作用,糖类和蛋白质含量变化较明显,脂肪含量变化较小。由于菊芋多糖分子量在腌制过程中明显增加,与预期结果相反,为进一步研究在腌制过程中多糖化学结构和药理活性是否发生变化提供了理论基础。