基于Akt/PPARγ通路探讨培本固疏方通过促成骨干预绝经后骨质疏松症的机制

目的:结合前期研究结果,完善培本固疏方(PBGSF)通过促成骨干预绝经后骨质疏松症(Postmenopausal osteoporosis,PMOP)的具体机制。方法:将36只大鼠随机分为假手术组、模型组、PBGSF低剂量组(低剂量组)、PBGSF中剂量组(中剂量组)、PBGSF高剂量组(高剂量组)和西药组。末次给药后,测定胫骨骨密度(BMD),骨组织弹性位移、极限位移、脆性,骨细胞的矿化水平,Akt/PPARγ的蛋白表达以及血清ALP、ROS的变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BMD、骨组织弹性及极限位移降低,脆性升高(P<0.05),骨组织未出现钙化结节;Akt的表达水平降低,PPARγ蛋白的表达水平、血清中ALP和ROS含量均显著升高(P<0.01)。与模型组相比,各治疗组BMD均增高(P<0.05,P<0.01),极限位移增高,脆性显著降低(P<0.05,P<0.01);高剂量组、西药组弹性位移、极限位移显著增高(P<0.01),脆性降低(P<0.05)。各治疗组均可见大量钙化结节,低、中、高剂量组骨组织钙沉积现象与给药浓度正相关。低、中剂量组Akt蛋白表达水平均上升(P<0.05),高剂量组、西药组Akt蛋白表达水平显著增高(P<0.01)。低、中、高剂量组和西药组PPARγ蛋白的表达水平降低显著(P<0.01)。各治疗组ROS均明显降低(P<0.01),低、中、高剂量组效应更优,且具有浓度依赖性。结论:培本固疏方能有效改善绝经后骨质疏松,其作用效果在一定范围内具有剂量依赖性。该方通过促进成骨细胞增殖成熟发挥其促成骨作用,并可通过Akt/PPARγ通路以及抗氧化应激作用改善骨质疏松。

培本固疏方对去卵巢大鼠炎性因子、骨生物力学及JNK/p38信号通路的影响

目的:观察培本固疏方对绝经后骨质疏松的治疗作用,探讨其作用机制。方法:36只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、培本固疏方低剂量组(Low)、培本固疏方中剂量组(Medium)、培本固疏方高剂量组(High)与阿仑膦酸钠组(Alen),每组6只。假手术组仅将卵巢旁脂肪组织切除,其余组通过去卵巢法(OVX)建立大鼠绝经后骨质疏松模型。造模4周后采用灌胃方式开始给药,假手术组与模型组均每日给予生理盐水1 mL/200 g;培本固疏方低、中、高剂量组每日分别给予低、中、高剂量的培本固疏方制剂1 mL/200 g(生药浓度分别为1.0605、2.121、4.242 g/mL);阿仑膦酸钠组给予阿仑膦酸钠溶液1 mL/200 g(浓度为0.21 mg/mL)。干预8周后进行指标检测。骨密度仪检测大鼠腰椎L5的骨密度,三点弯曲试验仪检测左侧股骨屈服载荷、断裂载荷、刚度,HE切片染色观察右侧股骨微结构,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β含量,Western Blot法检测股骨JNK、与股骨p38表达量。结果:和假手术组相比,模型组大鼠L5腰椎骨密度显著减少(P<0.01),左侧股骨的屈服载荷、断裂载荷、刚度均下降(P<0.01),骨微结构破坏,血清TNF-α、IL-1β,骨组织JNK、p38蛋白含量均升高(P<0.01);与模型组比较,中、高剂量及阿仑膦酸钠组骨密度、屈服载荷均显著上升(P<0.01);高剂量组、阿仑膦酸钠组断裂载荷显著上升(P<0.01,P<0.001);中剂量组、阿仑膦酸钠组刚度显著上升(P<0.05)。各干预组骨微结构逐渐好转,血清TNF-α、IL-1β含量均降低(P<0.01),骨组织JNK、p38蛋白含量均降低(P<0.05)。结论:培本固疏方可提高大鼠骨密度,提升骨组织载荷能力、骨刚度,改善骨质疏松病理状态,其机制为通过抑制炎性因子TNF-α、IL-1β分泌,下调JNK/p38信号通路而起到治疗骨质疏松的作用。