冠突散囊菌发酵液对高脂饮食大鼠肥胖和肠道菌群的影响

本研究旨在探究突散囊菌发酵液对肥胖大鼠脂质代谢和肠道菌群紊乱的影响,为其开发利用提供科学依据。SD大鼠被随机分为正常组、模型组和冠突散囊菌发酵液干预的低、中、高剂量组,以及血脂康阳性对照组。通过高脂喂养建立食源性肥胖大鼠模型,正常组和模型组给予无菌水灌胃,各剂量组灌胃不同剂量冠突散囊菌发酵液。实验为期8周,末次给药后收集粪便和血清,用于肠道菌群分析和相关生化指标测定,并摘取肝脏进行病理学观察。结果显示,模型组大鼠体质量和Lee′s指数显著增加,血脂发生异常,肠道菌群多样性显著降低。冠突散囊菌发酵液显著降低了肥胖大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量,提高了高密度脂蛋白胆固醇的含量。测序结果亦显示,冠突散囊菌发酵液显著提高大鼠肠道菌群的多样性,上调瘤胃球菌NK4A214_group、UCG-005、Christensenellaceae_R-7_group等菌群的丰度,下调拟杆菌属Bacteroides和Turicibacter的丰度。LefSe分析还显示,冠突散囊菌发酵液可显著增加大鼠肠道中乳酸菌Lactobacillus丰度,提高肠道的防御功能。综上所述,冠突散囊菌发酵液能够有效改善高脂饮食肥胖大鼠的脂代谢及肠道菌群紊乱。

基于性激素-肿瘤免疫微环境研究两种温阳法抑瘤作用机制区别与联系的理论探讨

肿瘤患者存在寒积内生和肾阳亏虚的病机特点,温阳法中的温阳散寒和温补肾阳是治疗肿瘤的2种重要方法;肿瘤的发生、发展与神经内分泌系统和免疫系统的双向调节作用紊乱密切相关,性激素-肿瘤免疫微环境是其中的重要内容。已有研究表明,温补肾阳能调节性激素水平,温阳散寒能提高抗肿瘤免疫功能,因此温阳散寒法可能通过影响肿瘤免疫微环境发挥抑瘤效应并调节性激素水平,温补肾阳法可能通过调节性激素水平继而影响肿瘤免疫微环境产生抑瘤作用。

开设有关医学微生物学选修课的探索

为了激发学生的学习兴趣,拓宽了学生的视野,增强学生的科学素质,开设了医学微生物学选修课《瘟疫与电影》,在其过程中对课程的设置进行探索,总结出教学过程中积累的经验和存在的问题,并对今后的教学工作进行了展望。

杞仙冲剂抗衰老实验研究

目的初步探讨杞仙冲剂的抗衰老作用。方法观察杞仙冲剂对D-半乳糖所造成的大鼠衰老模型和对氢化可的松造成的小鼠免疫低下的影响。结果杞仙冲剂对D-半乳糖造成的大鼠血清SOD值的降低有显著性的提高;对氢化可的松造成的小鼠溶血素抗体的降低有显著性提高作用。结论杞仙冲剂具有提高衰老大鼠血清SOD值和增加体液免疫能力。

网上教学资源建立与相关手机APP应用初探

利用互联网,建立网上的教学资源与手机APP应用,是将病原微生物与免疫学的有关的教学资料,包括视频图片文字等,分门别类的放在互联网上,学生可以课下通过智能手机来访问这些资料,扩大了学生的视野。并且通过课前课后的客观选择题提供了教师与学生的互动的平台,了解学生对关键知识点的掌握。建立的网上学习资源比较丰富,结合本校学生特点,可以将学习资源分别设置难度为低、中、高三部分,不同学习水平及兴趣程度的学生可以结合自己的特点来进行不同部分的学习。在这个过程中有意识培养学生自主学习及良好的学习习惯,并且可以引导学生对问题的思考与探索。

中医学专业微生物及免疫学教学体会

近几年由于中医专业中的文科生的比例在上升,使中医专业学生对偏理科的微生物及免疫学课程感觉难理解、难学。针对这一现象,通过课堂教学中加入人文性的(包括哲学,科学,背景知识、人文素质等)知识,来提高他们学习这门课程兴趣和主动性。

调衡方抗荷瘤小鼠Lewis肺癌转移的实验研究

探讨了调衡方对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移的作用及其机制.将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL小鼠右腋皮下建立Lewis肺癌模型,灌胃给药12d后观察肺表面转移率;常规石蜡切片HE染色,观察肺内转移灶的数量和大小;并采用免疫组化等方法检测肺组织中CD4^+、CD8^+T细胞量及血清中恶性肿瘤特异性生长因子(tumor specific growth factor,TSGF)的水平.结果显示调衡方在25、50g/kg剂量下,可增加荷瘤小鼠肺组织中CD4^+、CD8^+ T细胞量,对外周血中TSGF的水平及瘤块的增长有显著地抑制作用.研究结果显示调衡方通过抑制小鼠外周血TSGF的水平及增加CD4^+、CD8^+ T细胞量,从而抑制肿瘤细胞的侵袭转移.

姜黄素对耐药细胞株K562/ADM的耐药逆转作用研究

目的:研究姜黄素对慢性粒细胞白血病多药耐药细胞株K562/ADM中多药耐药基因mdrl表达的下调作用。方法:采用RT-PCR和Western blot方法检测各处理组K562/ADM细胞株中mdr1基因表达;利用MTT试验检测姜黄素处理后K562/ADM细胞株对阿霉素敏感性的改变。结果:姜黄素抑制了K562/ADM细胞株中多药耐药基因mdr1的表达,姜黄素明显增加K562/ADM细胞株对阿霉素的敏感性。结论:姜黄素通过抑制P-gp的药物外排作用有效逆转K562/ADM细胞株的多药耐药性。

调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能调节的实验研究

目的:研究调衡方对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移的作用并探讨其作用机制.方法:将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL小鼠右腋皮下建立Lewis肺癌模型;灌胃给药12 d后观察瘤组织中淋巴细胞与瘤细胞形态学的变化;常规石蜡切片HE染色.观察瘤组织癌细胞形态的变化;免疫组化法检测瘤组织中CD4+,CD8+的表达水平及其血清IL-2的活性.结果:调衡中、大剂量组可见瘤组织Lewis肺癌细胞大量坏死和凋亡,荷瘤对照组对肿瘤细胞形态无明显影响;调衡中剂量组和调衡大剂量组瘤组织中CD4+与CD8+表达均增多,而阳性组、调衡小剂组、热休克组则主要是CD8+表达升高.调衡方在25 g/kg剂量下,对Lewis肺癌荷瘤小鼠外周血IL-2活性水平有显著地增强作用.结论:调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用机制可能与增强小鼠外周血IL-2的活性有关及增强CD4+,CD8+的表达水平,从而阻止了肿瘤细胞的侵袭转移.

调衡方多糖增强体外培养巨噬细胞的吞噬能力

目的研究调衡方多糖对巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨其多糖对巨噬细胞吞噬作用的免疫调节机制。方法依照中药多糖的制备方法从调衡方中提取粗多糖;从小鼠腹腔分离提取并培养巨噬细胞;(500、200、10)μg/m L调衡方多糖处理巨噬细胞48 h,光学显微镜下观察活细胞的形态,墨汁吞噬实验以及金黄色葡萄球菌吞噬实验观察巨噬细胞的吞噬能力,酶细胞化学染色观察巨噬细胞胞内酸性磷酸酶的变化。结果与对照组比较,(500、200、10)μg/m L调衡方多糖处理巨噬细胞后,巨噬细胞体积显著增大,对墨汁和金黄色葡萄球菌的吞噬能力均显著提高,酸性磷酸酶的活性也明显增强,并与多糖浓度呈正相关。结论调衡方多糖能增强巨噬细胞的吞噬功能,并提高细胞内酸性磷酸酶的活性。

抑制Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)通路加重鲍曼不动杆菌感染大鼠的炎症

目的利用Toll样受体4(TLR4)抑制剂TAK-242处理大鼠,检测鲍曼不动杆菌(A.baumannii)感染过程中TLR4的作用。方法将健康雄性SD大鼠分为正常对照组、TAK-242处理组、A.baumannii接种组以及TAK-242和A.baumannii联合处理组。TAK-242处理组大鼠通过尾静脉注射TAK-242(1 mg/kg),感染大鼠通过气道接种方法接种A.baumannii。于接种后72 h,取肺组织匀浆后接种至LB培养基,进行肺组织细菌计数;HE染色观察肺组织炎症变化。收集支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平。分离外周血单个核细胞(PBMC),Western blot法检测PBMC中磷酸化核因子κBp65(p-NF-κBp65)的蛋白水平。结果免疫功能正常的大鼠感染A.baumannii 72 h后,肺内细菌基本被清除,而TAK-242处理的大鼠接种A.baumannii后,肺中细菌计数显著增加;正常大鼠感染后,肺部有轻微炎症,TAK-242处理的大鼠接种A.baumannii后肺部炎症较为明显;TAK-242处理的大鼠接种A.baumannii后,TNF-α和IL-6增加幅度小于正常感染组大鼠;正常大鼠感染A.baumannii 72 h后,PBMC中p-NF-κBp65蛋白水平升高,而经过TAK-242处理的大鼠感染后,PBMC中p-NF-κBp65的水平升高不明显。结论抑制TLR4/NF-κB通路引起大鼠A.baumannii感染加重。

鲍曼不动杆菌通过活化血小板激活因子受体引起感染人支气管上皮细胞的氧化应激和细胞凋亡

目的探讨血小板激活因子受体(PAFR)在鲍曼不动杆菌(A.baumannii)感染人支气管上皮(HBE)细胞过程中的作用。方法 HBE细胞分为对照组、银杏内酯B(GB)处理组、A.baumannii感染组、A.baumannii感染联合GB处理组。使用临床分离的A.baumannii感染HBE细胞,GB处理组分别用1×10~3CFU/m L、1×10~5CFU/m L和1×10~7CFU/m L的A.baumannii感染HBE细胞,A.baumannii感染联合GB处理组则先用10μmol/L GB阻断PAFR活性而后进行1×10~3CFU/m L A.baumannii感染。采用Western blot法检测HBE细胞PAFR、磷酸化的Janus激酶1(p-JAK1)、磷酸化的信号转导子与转录激活子1(p-STAT1)的蛋白水平,使用CCK-8法检测细胞增殖能力,使用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒检测各组细胞氧化应激水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)染色结合流式细胞术检测细胞凋亡。结果与对照组相比,A.baumannii感染的HBE细胞中PAFR蛋白水平显著升高,细胞活力显著下降,细胞内MDA水平和细胞凋亡明显增加,p-JAK1和p-STAT1蛋白水平增加。结论 A.baumannii感染的HBE细胞PAFR活化,激活JAK1/STAT1信号通路促进HBE细胞的氧化应激和细胞凋亡。

小鼠鲍曼不动杆菌肺感染模型的制备

目的构建小鼠鲍曼不动杆菌(A.baumannii)诱导的肺炎模型,研究A.baumannii致病的分子机制。方法实验分为正常对照组、环磷酰胺预处理组、正常小鼠接种组和免疫缺陷小鼠接种组。利用免疫抑制剂环磷酰胺预处理实验雄性C57BL/6小鼠制备免疫缺陷小鼠模型,使用临床重症监护病房(ICU)分离的A.baumannii制备新鲜菌液(1×108集落形成单位/m L),通过气道接种方法接种至小鼠,分别于接种后6、24、72 h,进行小鼠肺及肺泡灌洗液白细胞和中性粒细胞计数,HE染色观察肺组织炎症变化,ELISA检测试剂盒检测血清粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果免疫功能正常的小鼠感染A.baumannii72 h后,肺内细菌基本被清除,而免疫抑制剂处理的小鼠接种A.baumannii后,肺及血液中细菌计数持续增加;正常小鼠感染6 h后,体内白细胞计数和中性粒细胞升高,至72 h下降,而经过免疫抑制剂处理的小鼠感染后,肺及血液中白细胞计数和中性粒细胞持续升高;感染72 h后,免疫功能正常小鼠肺部有轻微炎症,免疫缺陷小鼠肺部炎症较为明显;正常小鼠感染6 h后,血清中上述细胞因子含量均增加,至72 h下降,而经过免疫抑制剂处理的小鼠感染后,肺及血液中上述细胞因子水平均持续升高。结论成功制备了A.baumannii诱导的小鼠肺部感染模型。

基于温阳法治疗肿瘤研究火神派与温补派学术观点区别与联系的理论探讨

以注重阳气为特色的火神派和温补派是中医学术理论体系中的两大医学流派,但他们的学术观点在具体的用药中具有温阳散寒和温补肾阳的不同;温阳法是治疗肿瘤的一种重要方法,但在具体的应用存在温阳散寒和温补肾阳各自单用和相互配伍的情况。因此,以肿瘤这种疾病为研究对象,观察火神派和温补派各自代表性方药分别及相互配伍对肿瘤相关发病机理影响的区别与联系,有助于两大流派学术观点的相互补充和完善。

Jak激酶抑制剂AG490对Lewis肺癌细胞增殖及Jak-Stat信号通路的影响

目的探讨Jak激酶抑制剂AG490对Lewis肺癌细胞增殖与凋亡的作用及其机制。方法 AG490作用于体外培养的Lewis肺癌细胞。MTT法检测细胞增殖,吖啶橙荧光染色观察细胞凋亡形态、流式细胞术检测细胞周期与凋亡,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Stat3、Stat5和Bcl-2、Bax mRNA表达。结果 100μmol.L-1AG490作用24和48h后,对Lewis肺癌细胞细胞增殖抑制率分别为37.95%和52.99%。流式细胞术显示,经50和100μmol.L-1AG490作用24h后,细胞凋亡率由处理前的0.76%分别提高到12.56%和16.76%(P<0.01)。荧光显微镜下可见到典型的细胞凋亡形态学改变。细胞Stat3、Stat5活化程度降低,促进Bcl-2基因表达下调,提升细胞中Bax mRNA表达。结论阻断Jak-Stat3信号通路可抑制Lewis肺癌细胞增殖,并可能通过下调凋亡抑制基因Bcl-2表达诱导细胞凋亡。

调衡方对S180荷瘤小鼠腹水癌细胞的作用及免疫功能的影响

目的探讨调衡方对S180荷瘤小鼠腹水癌细胞的作用及免疫功能的影响。方法将60只昆明种雄性小鼠随机分为模型组,调衡方大、中、小剂量组(按生药50、25、12.5g/kg),贞芪扶正胶囊组(0.83g/kg),热休克组,将传代培养的S180癌细胞接种于昆明种小鼠腹腔,灌胃给药12d后处死小鼠,分别抽取腹水制片,光镜下观察细胞形态,并采用免疫组织化学法检测腹水CD4、CD8表达及血清白细胞介素-10(IL-10)的活性。结果调衡方中剂量组可见腹水S180癌细胞大量坏死和凋亡,模型组对肿瘤细胞形态无明显影响;调衡方中、大剂量组腹水中CD4、CD8表达均增多(P<0.01),而热休克组则主要是CD8表达升高(P<0.05)。调衡方在25、50g/kg剂量下,对S180荷瘤小鼠外周血IL-10活性水平有抑制作用(P<0.05)。结论调衡方对小鼠腹水S180癌细胞荷瘤小鼠的抑瘤作用机制可能与抑制小鼠外周血IL-10的活性及增强CD4、CD8的表达水平有关,调衡方亦可致S180癌腹水癌细胞坏死和凋亡,机制可能与其提高细胞免疫功能,从而增强机体对肿瘤细胞的免疫杀伤能力有关,从而阻止了肿瘤细胞的侵袭转移。

基于网络课程普及下病原生物与免疫学教学初探

从我国2001年的精品课程到2011年的共享课和公开课建设，再到2012年的慕课（MOOC）建设，这些在线课堂中课程的共同点是：一流教师队伍、一流教学内容、一流教学方法、一流教材、一流教学管理等特点。大规模在线开放课程对我们普通高校老师来说是巨大挑战。在这样的形式下，作为普通高校老师应该抓住机会，改变教学理念，进行教学的反思，应该开始对教学模式进行的探索、研究。

新鱼腥草素钠对小鼠鲍曼不动杆菌肺感染模型的保护作用

目的构建小鼠鲍曼不动杆菌诱导的肺炎模型,观察新鱼腥草素钠对鲍曼不动杆菌肺部感染的保护作用。方法将小鼠分为对照组、肺炎模型组、低剂量新鱼腥草素钠组和高剂量新鱼腥草素钠组。术前4d和1d利用环磷酰胺预处理各组C57BL/6小鼠,从术前3d开始,低剂量新鱼腥草素钠组和高剂量新鱼腥草素钠组每天给予新鱼腥草素钠治疗,使用重症监护病房分离的鲍曼不动杆菌菌株制备新鲜菌液,通过气道接种方法接种至小鼠制备鲍曼不动杆菌肺感染模型,分别于接种后24、72h进行小鼠肺及血液细菌计数,苏木精-伊红染色观察肺组织炎症变化,检测支气管肺泡冲洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)白细胞、中性粒细胞数量以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平。结果小鼠接种鲍曼不动杆菌后肺及血液中细菌数量增多(P<0.05);小鼠肺部有严重的炎性反应和组织损伤,BALF中白细胞计数升高(P<0.05),TNF-α、IL-1β含量增加。而经过新鱼腥草素钠治疗后,小鼠肺及血液中细菌数量显著低于肺炎模型组,肺组织损伤较轻,BALF中白细胞、中性粒细胞以及TNF-α、IL-1β水平均显著升高(P<0.05)。结论新鱼腥草素钠能够显著提高鲍曼不动杆菌感染小鼠的白细胞数量和活性,从而增强抗感染能力。

案例式教学法在医学微生物学各论教学中的应用体会

根据当代医学教育的发展和医学微生物学教学中存在的问题,提出了案例式教学法在医学微生物学各论教学中应用的具体方法和优点以及不足之处,并探讨了解决矛盾的初步设想。

调衡方对Lewis肺癌细胞凋亡标志物bax及bcl-2表达的影响

目的探讨调衡方含药血清诱导Lewis肺癌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法采用细胞培养技术,用不同浓度的含药血清(无特定病原体雌性SD大鼠32只随机分为4组,每组8只,灌服给药,制备调衡方大、中、小剂量含药血清,正常血清。又将细胞分为5组,调衡方大、中、小剂量含药血清组,中剂量含药血清+AG490干预组,正常血清组)处理Lewis肺癌细胞,用溴化四唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响;以流式细胞仪测定碘化丙啶染色细胞周期的变化;采用实时聚合酶链式反应(PCR)法检测bax和bcl-2的mRNA表达。结果调衡方含药血清处理Lewis肺癌细胞后,随着药物浓度增加,作用时间延长,细胞增殖速度减慢。流式细胞仪检测结果显示,调衡方含药血清使Lewis肺癌细胞阻滞于S期,随着药物浓度的增加,细胞凋亡逐渐增加,中、大剂与中剂量+AG490组尤为明显(P<0.01)。调衡方含药血清还能够促进细胞中bax mRNA表达,减少bcl-2 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),并呈浓度依赖性。结论调衡方含药血清能降低Lewis肺癌细胞内bcl-2含量及提高bax的表达,使bax/bcl-2比值升高,这可能是调衡方抗肿瘤诱导Lewis肺癌细胞凋亡的机制。