铁皮石斛DobHLH96基因克隆及表达分析

为了探究DobHLH96基因的生物学特性及其在响应逆境胁迫中的功能,利用同源克隆技术从广东丹霞铁皮石斛中克隆得到DobHLH96基因的cDNA全长序列。结果显示,DobHLH96开放阅读框全长为960 bp,编码319个氨基酸残基,理论相对分子量为31.2 ku,等电点为6.51,具有HLH结构域,符合bHLH结构特征。系统进化树结果显示,DobHLH96蛋白序列与鼓槌石斛中的氨基酸序列同源性最高。DobHLH96在铁皮石斛花器官中的相对表达量最高,具体的花组织排序为花蕾>花柱>萼片。分析结果显示,DobHLH96启动子元件具有与非生物胁迫、干旱、脱水、低温胁迫及脱落酸(ABA)响应等相关的顺式作用元件,而低温、干旱和ABA处理均能显著诱导DobHLH96基因的表达,并且在3种处理下该基因的表达模式基本一致,推测铁皮石斛的DobHLH96基因可能在转录水平上参与ABA介导的低温、干旱胁迫响应,可作为候选基因进一步研究其在抵御逆境胁迫中的调控功能。研究结果为深入研究DobHLH96基因的生物学功能提供了理论依据。

铁皮石斛DcbHLH14基因克隆及表达分析

【目的】克隆铁皮石斛转录因子DcbHLH14基因并分析其在非生物胁迫响应中的表达情况,为研究DcbHLH14基因的功能提供理论参考。【方法】通过同源克隆从铁皮石斛叶组织中得到DcbHLH14基因,对其编码的蛋白序列特征和组织表达特性进行分析,并采用qRT-PCR对DcbHLH14基因在低温、干旱和ABA处理过程中的表达量进行分析。【结果】DcbHLH14基因开放阅读框(Open reading frame,ORF)为1269 bp,与参考序列存在7个碱基差异,仅含有1个外显子且无内含子,编码422个氨基酸。DcbHLH14蛋白的分子式为C_(2011)H_(3192)N_(586)O_(613)S_(13),理论分子量为45.8 kD,理论等电点(pI)为5.98,含有bHLH家族保守结构域bHLH-MYC-N和HLH,属于bHLH家族,与鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum)和春兰(Cymbidium goeringii)bHLH蛋白的氨基酸序列同源性较高,分别为97.16%和86.90%。转录组分析结果显示,DcbHLH14基因在云南产地野生铁皮石斛花蕾中的表达量最高,在叶中的表达量最低。进一步qRT-PCR分析结果表明,该基因在广东丹霞铁皮石斛叶中的表达量最高,而在茎中的表达量最低。DcbHLH14基因启动子富含多种与水分胁迫、低温、脱水以及ABA响应等相关的顺式作用元件。DcbHLH14基因明显受到低温、干旱和ABA诱导,低温和ABA处理6 h后DcbHLH14表达量被显著提高并达到峰值,分别是处理前的12.6倍和3.7倍;干旱处理9 h后,DcbHLH14表达量最高,是处理前的6.5倍,达到极显著差异水平。【结论】DcbHLH14基因可能在转录水平上通过依赖于ABA信号通路途径响应低温和干旱胁迫,从而调控下游功能基因表达,提高铁皮石斛抗逆性。

2000—2020年地黄栽培育种研究文献计量学分析

采用文献计量学方法,以中国知网为数据源,分析统计我国地黄栽培育种研究文献的年发文量、作者单位、资源类型、资助项目、出版期刊、被引次数及研究主题,了解我国在该领域的进展及热点.结果表明,2000—2020年我国该领域年发文量变化较大;河南农业大学的作者发文量最多;文献资源类型以期刊为主;国家基金项目和河南、山西省级基金项目对该领域研究资助大;出版期刊《中草药》在此领域发文量最多、影响力大;文献被引次数分析表明地黄连作障碍和品种研究是该领域的主要研究热点;文献研究主题分析表明,除连作障碍外,栽培技术、栽培措施、种质资源评价、脱毒地黄等也是近期研究热点.结合当前政策,预测将来研究重点为地黄新品种选育及品种考证、连作土壤的快速改良措施以及适于非基本农田类型土地栽培措施等.

铁皮石斛种质资源与遗传改良研究进展

对铁皮石斛农艺性状遗传多样性、亲缘关系聚类分析和遗传育种实践应用进行了总结和归纳,强调了重要性状精准鉴定和优良品种发掘与利用对铁皮石斛种质资源可持续利用的必要性,并对铁皮石斛资源保护与利用、良种选育和种质创新等方面进行了展望.

基于文献计量学的丹参栽培和育种研究现状

为了解丹参栽培和育种领域的研究现状,以中国知网(CNKI)中文数据库为数据来源筛选出的494篇文献为研究对象,运用Excel 2019和可视化软件CiteSpace.5.7R3分析丹参栽培和育种研究文献的年发文量、发文机构、基金、期刊、关键词等。在CNKI中文数据库中,丹参栽培和育种研究的年发文量在2000-2014年期间呈上升趋势。中医药类院校和农业类院校是丹参栽培和育种研究的主要机构。494篇文献中,190篇文献得到基金资助,占比38.46%,其中国家自然科学基金项目支持发表的论文数量占比16.84%。发文量最多的期刊是《中国中药杂志》。根据关键词共现、关键词聚类、关键词突现分析,丹参栽培和育种研究主要集中在栽培技术、繁殖技术、有效成分等方面。分根繁殖、种子繁殖、种植密度、施肥是近年来丹参栽培和育种的研究热点。丹参栽培和育种的研究从基础的栽培技术和繁殖方法逐渐深入到光合特性、生理特性等方面。规范化栽培、优良种质资源的鉴定与评价、优良品种的选育可能是未来的研究热点。

2010~2020年药用菊花栽培和育种研究文献计量学分析

为了解中国药用菊花栽培和育种的研究现状,以中国知网(CNKI)为核心收集数据库,采用文献计量学方法从多个角度对2010~2020年发表的相关文献进行了统计分析。结果显示:药用菊花栽培和育种方面的论文有379篇。2013年为发文量最多的年份,有47篇;期刊发文量最多,达309篇;农学领域发文量最多,有273篇;其中,关于杭菊的研究最多,有84篇;对药用菊花栽培和育种相关论文引用次数最高的期刊为《中国中药杂志》;从基金项目上看,国家"十一五"科技支撑计划项目的文献最多。