急性肾皮质坏死7例临床分析并文献复习

急性双侧肾皮质坏死（bilateral renal cortical necrosis,BRCN）是一种临床上少见而又有严重后果的疾患,国外报道近年来其发病率约占急性肾衰竭2%,而且大量的报道基本上是在上个世纪后半叶,近10年来的报道很少。我国报道更少,为此我们回顾性分析了2000年以来在北京大学第一医院确诊的7例BRCN患者的临床和病理资料,并结合相关的文献资料,以提高临床医师对本病临床特征的认识。

肾活检66例临床病理分析

目的探讨大同市第五人民医院收治的肾脏病患者的临床病理特点.方法对该院2001至2008年的66例肾活检患者的临床特点和病理资料进行回顾性分析.结果在66例肾活检病例中,原发性肾小球疾病44例,继发性肾脏病21例,遗传性肾病1例.其中IgA肾病24例,急性肾衰8例,狼疮肾炎10例.结论肾穿刺活检在肾脏疾病的诊断、治疗和判断预后方面有重要意义.

膜性肾病80例临床病理分析

目的探讨膜性肾病的临床病理特征。方法选取2014年—2017年我院收治的80例膜性肾病患者为研究对象,依据患者的年龄、性别、临床特点和病理分型进行分组,总结患者的临床病理特征。结果肾病综合征的占比(50%)明显高于肾炎综合征(17.5%)、血尿(27.5%)以及其他(5%),差异有统计学意义(P<0.05);病理分期Ⅰ期和Ⅱ期患者的占比(83.75%)明显高于Ⅲ期和Ⅳ期患者(16.25%)。免疫荧光IgG和C_3沉积占比76.25%(61/80)明显高于IgM、IgA、Clq沉积占比的23.75%(16/80)。结论膜性肾病多发于中老年患者,临床主要表现为肾病综合征,病理分期主要为Ⅰ期和Ⅱ期,免疫复合物沉积以IgG和C_3沉积为主。

骨髓间充质干细胞移植对木瓜蛋白酶和[60Co]照射所致大鼠肺气肿的作用

目的:研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对木瓜蛋白酶和[^(60)Co]照射所致肺气肿的影响及其机制。方法:雌性大鼠随机分为对照组、肺气肿组和肺气肿+MSCs移植组。将大鼠进行[^(60)Co]照射,在气管内滴入木瓜蛋白酶建立雌性大鼠肺气肿模型,然后将培养的雄性大鼠MSCs经尾静脉注射到雌性肺气肿大鼠。观察移植后大鼠肺组织的病理学变化;通过PCR和Y染色体荧光原位杂交(Y-FISH)示踪雄性大鼠MSCs在雌性肺气肿大鼠肺组织内的植入情况;用Y-FISH和肺泡表面活性物质蛋白C(SP-C)免疫荧光显色方法检测雄性大鼠MSCs在受体肺组织内是否分化为II型肺泡上皮细胞。结果:肺气肿组、肺气肿+MSCs移植组大鼠均出现肺气肿改变,但后者较前者的肺气肿明显减轻,2组之间的肺泡平均内衬间隔、平均肺泡面积和单位面积肺泡数均有显著差异;PCR结果显示肺气肿+MSCs移植组的大鼠肺脏基因组DNA中可以扩增出位于Y染色体的Sry基因片段;Y-FISH显示肺气肿+MSCs移植组的雌性大鼠肺组织中有Y染色体阳性的细胞,并且部分Y染色体阳性细胞同时表达SP-C。结论:MSCs移植能够减轻木瓜蛋白酶和[^(60)Co]照射所致的肺气肿,这可能与移植的MSCs在受体肺组织中的植入和分化为II型肺泡上皮细胞有关。

低氧条件下大鼠肺动脉平滑肌细胞中活性氧与低氧诱导因子-1α和细胞增殖的关系(英文)

在低氧条件下,观察大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells, PASMCs)中活性氧(reactive oxygenspecies, ROS)的变化,探讨 ROS 的变化是否通过调控低氧诱导因子 -1α (hypoxia-inducible factor 1α, HIF-1α)的表达影响 PASMCs的增殖。采用组织块法原代培养大鼠PASMCs,分成3 组:常氧组(21% O2, 24 h),低氧组(5% O2, 24 h),低氧+ Mn-TBAP组(5% O2,24 h,Mn-TBAP 是一种ROS 清除剂)。用激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内ROS 的变化;用RT-PCR 和免疫组织化学方法分别测定HIF-1α mRNA 和蛋白的表达;用MTT 法检测细胞增殖程度。结果显示:(1) 低氧组 PASMCs内ROS水平明显高于常氧组(P<0.05),低氧+ Mn-TBAP 组ROS 水平明显低于低氧组(P<0.05),但仍高于常氧组(P<0.05) ;(2)低氧组及低氧+ Mn-TBAP 组的HIF-1α mRNA 和蛋白表达均高于常氧组(P<0.05),且低氧组表达高于低氧+ Mn-TBAP 组(P<0.05) ;(3) 低氧组细胞增殖明显高于常氧组和低氧+ Mn-TBAP 组(P<0.05),低氧+ Mn-TBAP 组细胞增殖高于常氧组(P<0.05)。结果表明:在低氧条件下大鼠PASMCs 中 ROS 水平明显升高,且ROS 的变化能够调节HIF-1α的表达,进而影响平滑肌细胞的增殖,提示ROS 可能在肺动脉高压的发病机制和低氧信号转导中具有重要作用。

骨髓间充质干细胞移植对木瓜蛋白酶和钴60照射所致肺气肿大鼠肺泡壁细胞凋亡的影响

目的:观察大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对木瓜蛋白酶和钴60照射所致的肺气肿大鼠肺泡壁细胞的凋亡以及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,初步探讨骨髓MSCs移植改善木瓜蛋白酶和钴60照射所致肺气肿的机制。方法:雌性Lewis大鼠随机分为正常对照组、肺气肿组和肺气肿+MSCs移植组。观察移植28 d后肺组织形态学变化;采用DNA缺口末端标记法(TUNEL)检测肺泡壁细胞的凋亡;免疫组化法检测Bcl-2蛋白、Bax蛋白在肺泡壁细胞中的表达。结果:肺气肿组、肺气肿+MSCs移植组均出现肺气肿改变,但肺气肿+MSCs移植组较轻;肺气肿+MSCs移植组肺组织平均内衬间隔、平均肺泡面积明显低于肺气肿组(P<0.01),而肺泡细胞数明显高于肺气肿组(P<0.01);TUNEL结果显示肺泡壁细胞凋亡指数在肺气肿组、肺气肿+MSCs移植组大鼠明显高于正常对照组,肺气肿+MSCs移植组肺泡壁细胞凋亡指数明显低于肺气肿组(P<0.01);免疫组化结果显示肺气肿+MSCs移植组Bcl-2染色阳性细胞百分比高于肺气肿组(P<0.01),肺气肿+MSCs移植组Bax染色阳性细胞百分比明显低于肺气肿组(P<0.01),肺气肿+MSCs移植组Bcl-2/Bax比值高于肺气肿组。结论:骨髓MSCs移植之所以改善木瓜蛋白酶和钴60照射所致肺气肿,可能与骨髓MSCs移植抑制肺气肿大鼠肺泡壁细胞的凋亡,以及上调肺组织Bcl-2蛋白的表达和下调Bax蛋白的表达有关。

肺泡Ⅱ型上皮细胞的原代培养及生物学特性比较研究

目的:建立大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的改良体外原代培养法,并对其生物学特性进行比较研究。方法:AECⅡ用胰蛋白酶和胶原酶消化法分离后,接种于大鼠免疫球蛋白G(IgG)包被的培养瓶黏附纯化。将获得的AECⅡ用碱性磷酸酶(AKP)、电镜和肺表面活性物质相关蛋白A(SPA)免疫细胞化学方法进行鉴定,并对它的SPA表达和转染特性与AECⅡ来源A549细胞进行比较研究。结果:胰蛋白酶和胶原酶消化加IgG黏附纯化后所得的AECⅡ,产量为2×107-3×107,纯度为75%-84%,细胞活力93%以上,AKP染色快捷简便。AECⅡ同A549细胞相比具有某些不同的特性。结论:采用IgG黏附纯化能提高AECⅡ纯度,AKP染色简便实用。对于AECⅡ细胞的某些特性研究发现其并不能完全用A549细胞系来代替。

cGMP对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞膜电压门控钾通道的作用

目的 :探讨cGMP对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)膜电压门控钾通道 (Kv通道 )的作用 ,为进一步阐明慢性低氧性肺动脉高压的发病机理提供理论依据。方法 :Wistar大鼠 ,随机分为对照组和慢性低氧组 ,低氧组大鼠每天低氧 (氧浓度 10 %± 1% ) 8h ,连续 4周。单个大鼠PASMC的获得采用急性酶分离法 (胶原酶Ⅰ型和木瓜蛋白酶 )。采用全细胞膜片钳技术测定两组PASMC的静息膜电位 (Em)和电压门控钾通道的钾离子电流 (IKV) ,观察并比较cGMP (1mmol/L)以及cGMP和蛋白激酶G(PKG)抑制剂H - 8(1mmol/L)应用后两组PASMCIKV的不同变化。结果 :慢性低氧大鼠PASMC的静息膜电位和电压门控钾通道电流明显低于正常对照组。cGMP可抑制正常和慢性低氧大鼠PASMC +5 0mV刺激时的峰值IKV[正常组从 (118 0± 5 0 )pA/pF下降到 (89 9± 16 5 )pA/pF ,n =6 ,P<0 0 5 ;慢性低氧组则从 (81 0± 5 0 )pA/pF下降到 (5 6 8± 9 1)pA/pF ,n =6 ,P <0 0 5 ],该抑制作用可被PKG的抑制剂H - 8阻断 [正常组 (119 2± 10 3)pA/pFvs (117 8± 9 1)pA/pF ,n =6 ,P >0 0 5 ;慢性低氧组 (96 8± 6 2 )pA/pFvs(98 0± 2 2 )pA/pF ,n =6 ,P >0 0 5 ]。结论 :慢性低氧抑制肺动脉平滑肌细胞的电压门控钾通道。

放射损伤对于移植的骨髓间充质干细胞在受体大鼠不同器官中植入的影响

目的:探讨放射损伤对于骨髓间充质干细胞(MSCs)移植后在受体大鼠不同器官中植入的影响以及可能的机制。方法:采用DNA缺口末端标记法(TUNEL)检测正常对照组和单纯放射组大鼠心脏、肾脏、肝脏、肺脏的细胞凋亡率。应用密度梯度离心法结合贴壁法提取雄性大鼠骨髓MSCs,培养后把MSCs移植到[60COγ]照射和未经照射的雌性大鼠体内,通过PCR和Y染色体荧光原位杂交(Y-FISH)示踪雄性大鼠MSCs在雌性大鼠体内的分布情况。结果:照射后大鼠心脏、肾脏、肝脏、肺脏细胞凋亡率显著高于对照组。PCR结果显示照射后移植MSCs的大鼠心脏、肾脏、肝脏、肺脏和外周血中可以扩增出Sry基因的DNA序列,而且Y-FISH显示照射后移植MSCs的大鼠在心脏、肾脏、肝脏、肺脏中可发现Y染色体阳性的细胞。但是未经照射行MSCs移植的大鼠在上述器官中未发现Y染色体阳性的细胞。结论:全身放射促进组织细胞的凋亡,并导致移植的MSCs在受体大鼠心脏、肾脏、肝脏和肺脏的植入。

SPA基因启动子的克隆及转录靶向活性分析

目的:克隆大鼠肺表面活性蛋白A(SPA)基因启动子并构建该启动子的荧光报告系统,探讨该启动子的活性及转录靶向性,为进一步研究SPA基因的表达调控机制和探讨靶向性基因治疗奠定基础。方法:①从GenBank中获取大鼠SPA基因序列,对其上游基因组序列进行计算机生物信息学分析,推断其上游序列约163bp的区域具有启动子功能。②利用PCR技术扩增SPA基因上游启动子序列,将其亚克隆入pGL3-basic中,构建pGL3-SPA质粒,将其亚克隆于pGL3-control中,构建pGL3-SPA-enhancer质粒。③将构建pGL3-SPA质粒、pGL3-SPA-enhancer质粒、pGL3-control质粒和pGL3-basic质粒分别与内参质粒pRL-TK共转染入A549细胞和H441细胞,用双荧光素酶报告系统检测该质粒在两种细胞中的荧光素酶活性表达。结果:酶切及测序结果均证实成功克隆了SPA基因启动子序列,并已将该序列正确插入到荧光素酶报告基因系列载体中。重组的pGL3-SPA-enhancer质粒、pGL3-SPA质粒转染H441细胞后可以检测到荧光素酶的高表达。结论:成功构建了含有SPA基因启动子序列的荧光素酶基因报告系统,证实了它在高表达SPA蛋白的细胞中有较高的转录活性,为下一步研究SPA基因功能及其转录调控以及探讨基因治疗的靶向性奠定了基础。

血晶素促进缺氧大鼠肺组织诱导型血红素氧合酶基因的表达

目的 研究血晶素 (Hemin)对缺氧大鼠肺组织诱导型血红素氧合酶 (HO 1)表达的影响。方法 常压缺氧 15d复制缺氧性肺动脉高压大鼠模型 ,分为 3组 :正常对照组、单纯缺氧组和血晶素组。应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测大鼠肺组织HO 1mRNA水平 ,双波长分光光度法检测动脉血中一氧化碳血红蛋白 (COHb)的含量 ,并用右心导管检测右心室收缩压。结果 缺氧 15d大鼠肺组织HO 1mR NA水平及血中COHb较正常大鼠升高 (P <0 0 1) ,同时右心室收缩压 (RVSP)升高 (P <0 0 1)。经血晶素干预后 ,使缺氧大鼠HO 1mRNA和COHb进一步增高 ,而RVSP降低(P <0 0 1或P <0 0 5 )。结论 血晶素能够上调HO 1基因在缺氧大鼠肺组织中的表达 ,促进内源性CO生成 。

缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞HO-1基因表达和内源性一氧化碳生成的影响

目的 :研究缺氧对体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞诱导型血红素氧合酶 (HO - 1)基因表达及内源性一氧化碳 (CO)产生的影响 ,探讨HO -CO系统在缺氧性肺动脉高压中的作用。方法 :原代培养大鼠肺内动脉的平滑肌细胞 (PASMC)并传代 ,选用第 3- 5代PASMC用于实验。在培养瓶内通缺氧气体 (95 %N2 ,5 %CO2 ) 12、2 4h和48h后 ,用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT -PCR)检测PASMC中HO - 1mRNA水平 ,用酶联免疫检测仪测定培养基中碳氧血红蛋白 (COHb)含量 ,放免法测定培养基中环磷酸鸟苷 (cGMP)含量。结果 :缺氧 12、2 4和 48hHO - 1mRNA分别较正常对照组高 2 7%、5 7%和 2 7 1% (P <0 0 1) ,培养基中COHb的含量分别较正常对照组高 13 8%、31 0 %和93 1% (P <0 0 1) ,PASMC中cGMP的含量分别为正常对照组的 2 7、4 0和 6 8倍 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。结论 :缺氧诱导PASMC中的HO - 1基因表达上调 ,并使内源性CO产生增多 ,对PASMC内cGMP浓度有调节作用。

香烟提取物和脂多糖对小鼠肺上皮细胞株MLE-12活性及水通道蛋白5 mRNA表达的影响

目的:探讨香烟提取物(CSE)和脂多糖(LPS)对小鼠肺上皮细胞株MLE-12水通道蛋白5(AQP5)表达的影响及其在慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的作用。方法:MTT法检测CSE和LPS对MLE-12的毒性,并选择合适的CSE和LPS浓度单独或共同刺激MLE-12细胞后,实时定量PCR检测其AQP5的表达。结果:与正常不含CSE的DMEM培养液相比较,MLE-12细胞在CSE小于10%时的DMEM/F12培养液中活性无明显降低(P>0.05),当CSE浓度达15%时各组细胞活性显著降低(P<0.01)。而不同浓度LPS对MLE-12活性无明显影响。CSE(10%)、LPS(20μg/ml)分别刺激MLE-12后,其AQP5的表达水平降低,CSE(10%)和LPS(20μg/ml)共刺激后,其水平进一步降低。CSE组和LPS组之间差异无显著性统计学意义。结论:CSE协同LPS可降低MLE-12细胞AQP5的表达,AQP5的下调可能参与了COPD的发生和发展。

水通道蛋白5在香烟致肺部炎症中的作用

目的:探讨水通道蛋白5(AQP5)在香烟致肺部炎症中的作用。方法:香烟提取物(CSE)刺激小鼠肺上皮细胞株MLE-12后,实时定量PCR检测其AQP5 mRNA和MUC5AC mRNA的表达。同时,用香烟烟熏BALB/C小鼠4周,检测其肺组织AQP5 mRNA和MUC5AC mRNA的表达。结果:与正常不含CSE的DMEM培养液相比较,CSE(10%)刺激MLE-12后,细胞AQP5 mRNA的表达水平降低,MUC5AC mRNA的表达水平升高。同样,香烟烟熏BALB/C小鼠1个月,其肺组织AQP5 mRNA的表达水平降低,MUC5 ACmRNA的表达水平升高。结论:CSE刺激可以降低MLE-12细胞上AQP5 mRNA的表达,香烟烟熏BALB/C小鼠1个月,其肺组织AQP5 mRNA的表达水平降低。AQP5 mRNA的下调可能通过影响其MUC5AC mRNA的表达从而参与香烟致肺部炎症的发病过程。

血液灌流对Lp(a)的影响

目的 观察血液灌流对血液透析患者血脂 [Lp(a) ]的影响。方法 选取多个血液净化中心血液透析患者 4 0例 ,比较单次血液透析串联血液灌流前后患者血脂的变化。结果 慢性肾衰竭患者多数存在血脂代谢的紊乱 ,血液灌流后血Lp(a)以及甘油三酯 (TG)的浓度下降 ,高密度脂蛋白 (HDL)、低密度脂蛋白 (LDL)、载脂蛋白A(APOA)、载脂蛋白B(APOB)、总胆固醇 (TC)的浓度无明显变化。结论 血液灌流可以降低维持性血液透析患者的Lp(a)及TG 。

九九级医学本科生诊断学教学的调查与思考

对九九级五年制本科生进行诊断学教学调查。结果表明 ,70 .2 %学生认为诊断学内容多、课堂讲授少 ,42 .1%学生对正常体格检查认识不足 ,78.8%的学生认为安排去病房见习的次数及病例数太少 ,45 .6 %的学生对问诊及病历书写存在困难。

纠正继发性甲状旁腺功能亢进对肾性贫血的影响

目的 观察慢性肾衰竭血液透析病人继发性甲状旁腺功能亢进症 (甲旁亢 )经活性维生素D3 治疗后 ,其血红蛋白 (Hb)及红细胞压积 (Hct)的变化。方法 用自身对照的方法 ,观察 2 0例维持性血液透析病人经活性维生素D3治疗纠正继发性甲旁亢前后Hb、Hct、促红细胞生成素 (EPO)用量的变化。结果 2 0例病人经活性维生素D3 治疗后 ,免疫反应性甲状旁腺素 (iPTH)由 (5 32 .5 0± 30 8.31 ) μg/ml下降至 (1 35 .0 0± 80 .6 2 ) μg/ml,Hb由 (90 .4 5± 1 3.4 5 )g/L上升至 (1 0 1 .35± 1 4 .93)g/L ,Hct由 (2 9.4 80± 4 .36 3) %上升至 (32 .5 30± 4 .4 4 1 ) % ,EPO用量由 (5 6 1 2 .5 0± 2 5 6 0 .4 2 )IU/周下降至 (4 6 2 5 .0 0± 2 799.79)IU/周。上述所有变化均有统计学意义。结论 随着继发性甲旁亢的纠正 ,肾性贫血得到改善 ,EPO用量减少 。

哮喘小鼠气道上皮高表达mCLCA3及其与趋化因子和Th1/Th2细胞因子的关系

目的研究哮喘相关基因mCLCA3在哮喘小鼠模型气道的梯度变化及其与趋化因子和Th1/Th2细胞因子的关系。方法 30只SPF级BALB/c小鼠随机分为5组,每组6只(n=6):D(致敏而未激发),E(激发1 d),F(激发3d),G(激发5 d),H(激发7 d)。通过RT-PCR和免疫组织化学检测肺组织中mCLCA3表达。采用肺组织切片的苏木精-伊红染色炎性评分、肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞分类计数来评价肺部炎症细胞浸润情况。RT-PCR法检测肺组织IL-4和IFN-γ的mRNA。ELISA检测炎症局部不同趋化因子水平。结果 RT-PCR和免疫组化检测结果均表明激发后小鼠mCLCA3表达显著增加,且mCLCA3的增加具有激发时间依赖性。肺组织苏木精-伊红染色炎性评分及BALF中炎性细胞分类计数表明激发后小鼠炎症细胞浸润主要表现为嗜酸性粒细胞和淋巴细胞增加。随着激发次数的增多,肺组织中IL-4和IFN-γ水平均有不同程度升高,其中H组IL-4与其余各组差异均有统计学意义,而各组IFN-γ差异无统计学意义。ELISA结果显示随着激发次数的增加小鼠BALF CCL17、CCL22均有增加趋势,其中G、H组CCL17,H组CCL22较其余组差异有统计学意义。Pearson相关性分析表明:mCLCA3与BALF中CCL17(r=0.584,P<0.01)、CCL22(r=0.461,P<0.05)及E、F、G组CCL5(r=0.586,P<0.05)均呈正相关;mCLCA3与BALF中总炎症细胞(r=0.393,P<0.05)、嗜酸性粒细胞(r=0.529,P<0.01)正相关。结论哮喘小鼠气道上皮中增加的mCLCA3表达可能通过参与调节气道上皮细胞趋化因子的分泌而介导炎症局部炎症细胞的浸润,从而在气道炎症的发生发展中起作用。