高同型半胱氨酸血症与血管内皮细胞凋亡

高同型半胱氨酸血症（HHcy）是指血浆同型半胱氨酸（Hcy）浓度〉15μmol／L。由于多种因素，如遗传或环境因素导致的胱硫醚缩合酶或^5N，^10N甲烯四氢叶酸还原酶的基因突变引起酶活性下降，饮食中VitB、叶酸缺乏，肝肾功能不全等，均可引起血浆Hcy浓度升高。

α-玉米赤霉醇改善去卵巢高同型半胱氨酸血症大鼠的血管功能

目的探讨植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对去卵巢高同型半胱氨酸血症(HHcy)大鼠血管功能的保护作用。方法用高蛋氨酸(Met)饮食复制HHcy大鼠模型。40只雌性Wistar大鼠随机分为5组:(1)对照组(Con);(2)2.5%蛋氨酸组(Met);(3)卵巢切除+2.5%蛋氨酸组(OVX+Met);(4)卵巢切除+2.5%蛋氨酸+α-ZAL组(OVX+Met+α-ZAL);(5)卵巢切除+2.5%蛋氨酸+17β-E2组(OVX+Met+17β-E2)。12周后,测定血浆雌二醇(E2)及同型半胱氨酸(Hcy)的含量;离体胸主动脉环灌流,观察胸主动脉环对不同浓度苯肾上腺素(PE)、乙酰胆碱(ACh)和硝普钠(SNP)的反应。结果高蛋氨酸饮食可明显增高血浆Hcy水平,其中OVX+Met组大鼠Hcy水平升高最显著。与其他组相比,OVX+Met组大鼠胸主动脉环对PE的收缩反应明显增强,对ACh的舒张反应明显减弱。各组大鼠胸主动脉环对SNP的舒张反应无明显差异。结论α-ZAL可抑制去卵巢HHcy大鼠血浆Hcy水平的升高,减轻血管内皮细胞的损伤,明显改善大鼠的血管功能,其作用与17β-E2相似。

高同型半胱氨酸血症与内皮祖细胞凋亡

内皮祖细胞在内皮损伤后的修复中起重要作用。高同型半胱氨酸血症作为动脉粥样硬化的一个独立危险因素,可影响外周血内皮祖细胞的数量和功能,导致内皮功能障碍。在其引起内皮祖细胞损伤的机制中,凋亡扮演了重要角色。本文就高同型半胱氨酸血症对内皮祖细胞凋亡的影响及机制的研究进展进行了综述。

艾塞那肽对糖尿病周围神经损伤大鼠的神经保护作用

目的探讨艾塞那肽(EX)对糖尿病周围神经损害大鼠的神经保护作用。方法将34只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组、糖尿病组、EX小剂量治疗(EXmin)组及大剂量治疗(EXmax)组。后3组大鼠给予脂肪乳灌胃,14 d后进行口服葡萄糖耐量试验并测算胰岛素抵抗指数;通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。制模成功后,EXmin组及EXmax组大鼠分别给予EX 1.25μg或2.5μg/(kg.d)腹腔注射,45 d后检测空腹血糖水平,透射电镜观察坐骨神经病理学改变。结果脂肪乳灌胃14 d后大鼠胰岛素抵抗指数明显升高;与NC组比较,糖尿病组、EXmin组及EXmin组空腹血糖明显升高(均P<0.01);但EXmin组及EXmin组明显低于糖尿病组(P<0.05～0.01);EXmin组和EXmax组大鼠坐骨神经髓鞘、轴突及血管基底膜的损害较糖尿病组明显减轻。结论 EX能够降低糖尿病大鼠血糖水平,减轻坐骨神经的病理损害,具有神经保护作用。

α-ZAL、GST和17β E_2对去势食饵性大鼠HHCY所致血管内皮损伤的保护作用

目的复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。方法实验分为6组:①正常对照组(Control);②假手术+2.5%蛋氨酸组(Sham);③切除卵巢+2.5%蛋氨酸组(OVX);④OVX+2.5%蛋氨酸+α-ZAL组(OVX+α-ZAL);⑤OVX+2.5%蛋氨酸+GST组(OVX+GST);⑥OVX+2.5%蛋氨酸+17βE2组(OVX+17βE2)。α-ZAL、GST和17βE2分别隔日肌注250μg/0.25ml,共12wk。双抗夹心法测定HCY和ET-1浓度,RT-PCR法检测主动脉组织ET-1 mRNA表达;主动脉作病理制片。结果血浆HCY含量(μmol.L-1):Sham与Con组比较明显升高,P<0.05;OVX组与Sham组相比明显升高,P<0.05;而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。血浆ET-1(ng.L-1)含量:OVX组与Sham组相比较ET-1升高,P<0.01,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。主动脉组织ET-1 mRNA的表达:OVX组与Sham组相比较升高,P<0.05,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.05,其它各组ET-1 mRNA表达均无变化。病理:OVX组血管内皮明显损伤,Sham组、α-ZAL、GST和17βE2组血管内膜大致正常,内皮细胞基本完整,未见明显的炎性细胞浸润。结论α-ZAL、GST和17βE2均能通过降低HCY含量和减少ET-1分泌、表达而保护血管内皮,三者的内皮保护作用相似。

Exenatide改善糖尿病大鼠血管内皮功能障碍

目的初步探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂Exenatide对糖尿病大鼠血管内皮功能障碍的影响,为其临床应用提供实验依据。方法 34只健康雄性Wistar大鼠随机分成4组:对照组、糖尿病组、小剂量Ex-enatide治疗组(0.3125μg/日)和大剂量Exenatide治疗组(0.625μg/日)。后3组大鼠脂肪乳灌胃14天后,进行口服葡萄糖耐量试验和空腹胰岛素水平检测,之后腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型,以空腹血糖≥11.8mmol/L作为模型成功标志。Exenatide皮下注射治疗45天。检测大鼠空腹血糖水平;制作离体胸主动脉环,观察动脉环对不同浓度去甲肾上腺素、乙酰胆碱和硝普钠的舒缩反应;免疫组织化学法观察胸主动脉组织血管性假血友病因子的表达情况。结果脂肪乳灌胃14天后高脂组大鼠口服葡萄糖耐量出现异常,各时间点血糖水平均较对照组明显升高(P<0.01);空腹胰岛素水平[(49.2±13.0)×10-3μU/L]、稳态模式评价胰岛素抵抗指数(11.7±3.5)较对照组[(35.7±4.7)×10-3μU/L,7.7±1.1]明显升高(均P<0.05),出现明显的胰岛素抵抗现象。糖尿病组大鼠空腹血糖水平(23.3±1.9 mmol/L)较对照组(4.6±0.4 mmol/L)明显升高(P<0.01),小剂量Exenati-de治疗组(20.9±1.4 mmol/L)和大剂量Exenatide治疗组(20.2±1.4 mmol/L)均明显低于糖尿病组(分别P<0.05,P<0.01)。各组大鼠胸主动脉对去甲肾上腺素的收缩反应无明显差异;糖尿病组大鼠胸主动脉对乙酰胆碱的舒张反应较对照组明显下降(P<0.01,P<0.05),二种剂量Exenatide治疗组均较糖尿病组明显改善(均P<0.05);糖尿病组大鼠胸主动脉对浓度为10-8 mol/L和10-7 mol/L的小剂量硝普钠舒张反应较对照组有所下降(均P<0.05),二种剂量Exenatide治疗组与糖尿病组相比无明显改善。糖尿病组大鼠血管内皮血管性假血友病因子表达量较对照组降低,二种剂量Exenatide治疗组均较糖尿病组增高。结论 Exenatide治疗能够降低糖尿病大鼠血糖水平,并改善糖尿病血管内皮结构和功能的损伤。

肺腺癌中的TTF-1、NAPSINA病理诊断价值

目的探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)与天冬氨酸蛋白酶A(NapsinA)在肺腺癌病理诊断中的价值。方法选取80例肺腺癌组织标本为实验组,以其它类型肺癌组织标本(包括鳞癌、腺鳞癌、小细胞癌、大细胞癌等)共80例作为对照组。采用免疫组织化学PV-6000两步法分别对肺癌组织标本中的TTF-1与NapsinA两项指标进行检测,分析二者的表达水平和阳性率,并评估联合采用TTF-1与NapsinA两项指标对肺腺癌的诊断价值。结果实验组患者的TTF-1和NapsinA阳性率分别为86.25%和77.5%,显著高于对照组(P<0.05);TTF-1和NapsinA阳性率与患者的年龄及性别无相关性(P>0.05),与肿瘤大小、分化程度、TNM分期等指标具有相关性(P<0.05);TTF-1和NapsinA联合检测的灵敏度和特异度分别为92.74%和98.21%,显著高于两项指标单项检测。结论 TTF-1、NapsinA在肺腺癌中表达的阳性率显著高于其它类型非小细胞癌,且联合应用这两种免疫组化标志物检测的敏感度和特异度优于任意一种标志物单独检测,对肺腺癌准确、及时的诊断具有重要意义,同时为肺腺癌进行靶向治疗提供依据。

细胞包埋技术在甲状腺液基细胞学中应用的优缺点

超声引导下细针穿刺活检(Ultrasonic Guidance Fineneedle Aspiration Biopsy,UG-FNAB)是一种简便、安全、微创的细胞学检查方法,被国内外公认为是诊断甲状腺结节性质的首选方法[1],而甲状腺细针穿刺细胞学中最常用的方法为普通涂片法(图1)和液基薄层细胞学检查(Thinprep Cytologic Test,TCT)(图2),液基细胞学目前常见的有膜式和沉降式两种。但每种检测方法都存在优越与不足之处,将甲状腺液基细胞进行包埋,联合免疫组化可对部分甲状腺疾病(如结构不典型的甲状腺乳头状癌)确诊,本文探讨细胞包埋技术在甲状腺液基细胞学中应用的优缺点。

介绍一种制作良好血性体液涂片的方法

血性体液是各级病理科常见标本,引发血性体液原因复杂,但患者多危重,需要及时准确的病理诊断。然而传统的细胞涂片染色方法应用于血性体液有明显的弊端,例如：涂片厚薄不均、染色涂片背景不清晰、有形细胞成分重叠不易观察、细胞结构不清等,均不利于细胞学诊断。现介绍一种制作良好血性体液涂片染色方法,应用本方法制作的血性体液染色涂片背景清晰,有病理诊断价值的细胞成分分布均匀易观察,从而减少漏诊误诊几率。

4,5,7-三羟异黄酮减轻高同型半胱氨酸血症导致的血管内皮损伤

目的观察植物雌激素4,5,7-三羟异黄酮(GST)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的血管内皮损伤的保护作用。方法健康成年雌性Wistar大鼠随机分成4组:对照组;2.5%蛋氨酸饮食组;卵巢去势+2.5%蛋氨酸饮食组;卵巢去势+2.5%蛋氨酸饮食+GST治疗组,每组8只。给予大鼠高蛋氨酸(2.5%)饮食来复制高同型半胱氨酸血症(HHcy)模型,卵巢去势+2.5%蛋氨酸饮食组和卵巢去势+2.5%蛋氨酸饮食+GST治疗组大鼠施行卵巢去势手术,GST以2.5 mg/(kg.d)剂量灌胃给药。治疗12周以后,颈总动脉采血,检测血浆中雌二醇和Hcy的水平。分离大鼠胸主动脉环,检测血管环对苯肾上腺素(PE),乙酰胆碱(Ach)和硝普钠(SNP)的反应性以评价血管功能;HE染色观察胸主动脉壁形态学的改变。体外培养内皮细胞株Eahy926,观察GST体外干预对Hcy诱导内皮细胞损伤的作用。结果高蛋氨酸饮食能够导致大鼠血浆Hcy水平显著升高,出现明显血管内皮功能和形态损伤,卵巢去势进一步加重了血浆Hcy水平的升高和血管内皮损伤。GST治疗12周能够明显减轻去卵巢HHcy大鼠的血管内皮的功能和形态损伤,而且能够降低血浆中Hcy水平;GST体外干预能够减轻Hcy诱导的内皮细胞损伤。结论 GST可明显减轻高同型半胱氨酸血症导致的血管内皮损伤,本研究进一步丰富了GST的抗动脉粥样硬化作用机理,为临床上HHcy患者的防治提供了新思路。

硝化应激参与同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞自噬降低

本研究旨在探讨硝化应激与同型半胱氨酸(Hcy)诱导血管内皮细胞自噬降低之间的关系。利用饮食法建立高同型半胱氨酸血症(HHcy)大鼠模型,利用免疫组织化学染色法分别检测大鼠胸主动脉自噬相关蛋白及硝化应激相关蛋白的表达。体外培养人脐静脉内皮细胞,用Hcy刺激内皮细胞,提取细胞蛋白,检测自噬相关蛋白及硝化应激相关蛋白的表达。利用Fe TMPyP预处理Hcy刺激的HUVECs细胞,检测上述相关蛋白表达的变化。结果显示HHcy大鼠模型建立成功,同时其胸主动脉LC3表达下降,p62表达增加,NT表达增加; Hcy处理的HUVECs自噬水平明显降低,而Fe TMPyP预处理能够降低NT表达,逆转Hcy导致的细胞自噬水平降低。本研究表明硝化应激参与了同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞自噬降低。