慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡、心肌纤维化及其相关性研究

目的探讨慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡、心肌纤维化及其相互关系。方法清洁级SD大鼠20只,体重250~300 g,随机分为心衰组及正常组,每组10只。心衰组腹腔连续注射异丙肾上腺素建立大鼠慢性心衰模型。造模6 w后,麻醉大鼠,剪开胸腔,取左心室心肌组织标本,伊红-苏木素(HE)染色,观察心肌组织病理变化,Masson染色显示心肌组织中胶原纤维化情况,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡率。结果心衰组心肌纤维化程度较正常组显著增加,且发生心肌细胞肥大及坏死、心肌纤维断裂、心肌间质纤维化瘢痕组织形成、心肌组织结构紊乱;心衰组心肌细胞凋亡率较正常组增高(P<0.01),且与心肌胶原容积比呈显著正相关(r=0.895,P<0.01)。结论心肌细胞凋亡及心肌纤维化是慢性心衰大鼠的重要病理改变,且两者呈显著正相关。

ACE基因插入/缺失及β_2肾上腺素受体基因多态性与房颤的相关性研究

目的：研究血管紧张素转换酶基因插入／缺失（ACEI／D）多态性及隧肾上腺素受体基因（β2-AR＋46A—G）多态性与心房颤动的相关性，寻找房颤发病的分子机制。方法：选择55例房颤患者（房颤组）及63例非房颤者（对照组），用PCR的方法检测两组ACE基因插入／缺失多态性，用RFLP法检测隧-AR＋46A→G变异。结果：房颤组与对照组ACEI／D多态性缺失纯合型（DD型）、杂合子（DI型）、插入纯合型（Ⅱ）基因型频率分别为32．76％、41．8％、25．5％和19．0％、44．4％、36．5％；房颤组与对照组β2-AR＋46A→G多态性Gly16纯合型、Arg16纯合型、Gly16／Arg16基因型频率分别是12．7％、17．47％、61．8％和14．3％、25．3％、60．3％；房颤组与对照组D等位基因、I等位基因分布频率为53．6％、46．4％和41．2％、58．7％；房颤组与对照组Gly16等位基因、Arg16等位基因分布频率为39．6％、60．4％和38．9％、61．1％；其中D等位基因分布频率在房颤组中较对照组明显增大；在9种不同基因型联合中发现，Gly／Arg型＋DD型和Gly型＋DD型的两种联合在房颤组和对照组间的分布有明显差异（P〈0．05），且这两种联合基因型发病相对危险度（OR）=2．455（95％CI：1．080～5．579）。结论：D等位基因可能是房颤的易患因素；ACEDD基因型与心肌纤维化及心脏重构的关系较为紧密，β2-AR基因＋46A→G多态性、ID基因型和Ⅱ基因型与心肌纤维化及心脏重构无明显相关性；β2-ARGly16等位基因与ACEDD基因型的联合可能对房颤的患病有着潜在的影响。

紧急气管插管对老年重症患者血压的影响及其干预措施

目的探讨紧急气管插管对老年重症患者血压的影响及其安全性研究。方法选择我院2008年6月～2011年3月入住我科ICU的行气管插管的老年患者60例,其中男性51例,女性9例。按照受试者进入研究的先后顺序,随机分成实验组(在气管插管前,将多巴胺40～60 mg加入液体中,以12.5～50μg/min滴入,将血压正常者的基础血压提高20～30/8～10 mmHg)及对照组(常规气管插管,不提前对血压正常者使用多巴胺)各30例。比较两组紧急气管插管前后血压、心率和血氧饱和度的变化。结果两组气管插管后血氧饱和度均较插管前显著增加(P<0.05);实验组心率增加不明显(P>0.05),而对照组心率增加显著(P<0.05);两组血压插管后较插管前均显著下降(P<0.05),但实验组血压多在正常范围,对照组多在正常值以下。结论老年重症患者紧急气管插管后,心率增加,血压下降,而多巴胺提前干预可有效预防这些情况的发生。

Klotho基因转染BMSC移植对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察Klotho基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法分离、培养、扩增大鼠BMSC,采用慢病毒载体法将EGFP标志基因和Klotho基因导入BMSC中,RT-PCR检测BMSC中Klotho m RNA的表达。采用异丙肾上腺素注射法制备大鼠慢性心衰模型后,随机分为Klotho-BMSC、BMSC、模型组,另设正常组,共4组,每组6只,将EGFP基因标记并导入Klotho基因的BMSC(EGFP-Klotho-BMSC)和仅标记EGFP基因的BMSC(EGFP-BMSC)分别通过大鼠尾静脉移植入Klotho-BMSC组或BMSC组大鼠体内,5×106细胞/只,模型组和正常组不做处理。移植28 d后,观察植入体内的BMSC细胞的存活及分布,TUNEL检测心肌细胞凋亡率。结果 BMSC转染Klotho后Klotho m RNA表达明显增多(P<0.05);移植28 d后,Klotho-BMSC组左心室射血分数(LVEF)比BMSC组高(P<0.05),而心肌细胞凋亡率较BMSC组进一步降低。结论 Klotho基因导入BMSC后,可增强BMSC抑制心肌细胞凋亡的作用,更有效改善心功能。

慢性心衰患者年龄与端粒及心肌胶原的相关性研究

目的 探讨衰老与慢性心衰心肌纤维化的相关性及其可能机制。方法 将100例心脏病患者分为非心衰（心功能Ⅰ级）组50例,心衰（心功能Ⅱ~Ⅳ级）组50例。采用RT-PCR法检测外周血白细胞中端粒长度,应用ELISA方法检测血清中PⅠCP、PⅢNP的浓度,并行相关性分析。结果 （1）心衰组血清PⅠCP、PⅢNP含量较非心衰组均明显增高（P〈0.05）;血清中PⅠCP、PⅢNP含量与心功能分级均呈显著正相关（P〈0.05）。（2）心衰组端粒长度较非心衰组明显缩短（P〈0.01）;端粒长度与心功能分级呈显著负相关（P〈0.05）。（3）心衰组及非心衰组血清中PⅠCP、PⅢNP含量均与年龄呈显著正相关（P〈0.05）;（4）两组端粒长度均与年龄呈显著负相关（P〈0.05）。（5）心衰组端粒长度与血清PⅠCP、PⅢNP浓度均呈显著负相关（P〈0.01）。结论 血清PⅠCP、PⅢNP浓度及端粒的长度与心功能密切相关,增龄（衰老）是心肌胶原增加及端粒缩短的独立危险因素,在慢性心衰心肌纤维化的发生、发展中起重要作用。

骨髓增生异常综合征并发Sweet综合征1例

患者男性,62岁,因＂乏力1年余,发热伴皮疹3d＂于2016年5月7日入中日医院。患者2014年11月无诱因出现乏力,伴心悸,查血常规示：WBC 3.05×10^9/L,N 1.89×10^9/L,RBC 1.27×10^12/L,Hb 41g/L,PLT 465×10^9/L。骨髓涂片：原始粒细胞1.5%,粒系增生,可见巨变、类巨变、分裂相、多分叶,红系增生,分类以中幼红为主,可见类巨变、分裂相，可见高色素红细胞；

代谢因素与胆总管结石伴急性胆管炎患者的相关性分析

目的:通过分析代谢性因素与胆总管结石伴急性胆管炎发病的相关性,探索代谢性因素对胆总管结石伴急性胆管炎病情严重程度的早期预测价值。方法:符合纳入标准的患者316例设为实验组,同期来院体检的健康人群2515例设为对照组,分析实验组、对照组患代谢综合征所占比例的差异,并将实验组分为轻度组、中度组、重度组,对各组的临床特点进行分析。结果:①实验组与对照组在性别构成上不具有统计学差异。②单因素分析的结果显示:实验组合并代谢综合征所占比例、年龄、BMI值高于对照组(P<0.05)。将年龄、BMI值、代谢综合征3个因素进行多因素分析,两组合并代谢综合征比例、BMI值的差异仍具有统计学意义,而年龄则不具有统计学差异。③比较轻度组、中度组、重度组3组合并代谢综合征比例的差异,结果显示3组差异具有统计学意义(P<0.05);进一步进行组间两两比较,轻度组和中度组相比,无统计学差异(P>0.05);重度组分别和轻度组、中度组进行比较,均存在统计学差异(P<0.05)。④非重度组与重度组合并代谢综合征的比例不同,其差异存在统计学意义(P<0.05)。⑤对非重度组、重度组的临床资料进行单因素水平的分析,结果显示两组年龄、中性粒细胞值、中性粒细胞值/淋巴细胞值(NLR)、血小板、降钙素原(PCT)、总胆红素、直接胆红素、三酰甘油、高密度脂蛋白、载脂蛋白A1、空腹血糖差异存在统计学意义(P<0.05)。将单因素分析结果中存在统计学差异的指标共同构建Logistic回归方程进行多因素分析,校正后的结果显示:年龄、NLR、血小板、降钙素原、高密度脂蛋白、载脂蛋白-A1、空腹血糖在多因素分析中差异仍具有统计学意义(P<0.05)。其中年龄、NLR、降钙素原、空腹血糖与胆总管结石伴急性胆管炎的病情严重程度呈正相关;而血小板、高密度脂蛋白、载脂蛋白-A1则呈负相关。结论:代谢异常与胆总管结石伴急性胆管炎的发病率呈正相关;年龄、PCT、空腹血糖、NLR与胆总管结石伴急性胆管炎病情严重程度呈正相关;血小板、高密度脂蛋白及载脂蛋白A1与胆总管结石伴急性胆管炎病情严重程度呈负相关。

重组腺病毒介导Klotho基因转导对大鼠心力衰竭心肌重构的影响

目的 探讨重组腺病毒介导的Klotho基因转染对大鼠心力衰竭（心衰）进程以及心肌重构的影响,并探讨其机制.方法 SPF级SD大鼠,随机数表法分为5组,即正常对照组（对照组,未给予任何干预）,心衰组（只做心衰模型,不给予其他干预）,生理盐水组（在心衰模型的基础上尾静脉注射生理盐水,0.5 ml/只）,腺病毒载体介导的增强荧光蛋白组（Ad.EGFP组,在心衰模型的基础上用腺病毒载体介导增强荧光蛋白,2×1010 pfu,0.5 ml/只）,以及腺病毒载体介导的目的基因组（Ad.Klotho组,在心衰模型的基础上用腺病毒载体介导目的基因,2×1010pfu,0.5 ml/只）,每组5只.异丙肾上腺素连续腹腔注射法建立大鼠心衰模型.构建重组腺病毒载体pDC316-CMV-EGFP-rKlotho,标记为Ad.Klotho,并将其转导至相应的心衰大鼠模型.建模第6周,采用超声心动图测定各组大鼠的左心室射血分数（LVEF）;多道生理记录仪测定各组大鼠血液动力学变化;检测各组大鼠心肌组织病理学改变;冰冻切片后镜下观察各组大鼠心肌组织荧光蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应评估各组大鼠心肌组织中Klotho基因的表达水平,以及心肌纤维化相关因子Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达水平;ELISA法检测各组大鼠血浆中B型利钠肽（BNP）的表达水平.结果 心衰组、生理盐水组、Ad.EGFP组和Ad.Klotho组大鼠心肌组织苏木素伊红染色均可见心肌细胞断裂、心肌间质增生、心肌细胞肥大和结构改变.对照组大鼠心肌组织病理切片未见上述改变.通过比较发现,Ad.Klotho组大鼠心肌纤维化程度、重构程度以及心肌细胞肥大程度均较心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组低.建模第6周,Ad.Klotho组和Ad.EGFP组大鼠心肌组织中仍可见EGFP绿色荧光表达,而对照组、心衰组和生理盐水组则未见.各组大鼠心肌组织中Klotho、胶原Ⅰ a1和Ⅲa1 mRNA均有表达.其中,对照组和Ad.Klotho组Klotho mRNA表达水平较高,与其他3组比较差异均有统计学意义（P均＜0.05）,而心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组间Klotho mRNA表达水平差异无统计学意义.心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组胶原Ⅰ a1、Ⅲa1 mRNA表达水平均较对照组和Ad.Klotho组高（P均＜ 0.05）,且三组间比较差异无统计学意义.超声心动图结果示心衰组、生理盐水组、Ad.EGFP组和Ad.Klotho组大鼠总体LVEF为（42.27±3.22）％低于对照组的（72.13±2.97）％（P＜0.01）.对照组和Ad.Klotho组心率均高于心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组（P均＜0.05）.对照组和Ad.Klotho组左心室内压均高于心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组（P均＜0.01）.对照组和Ad.Klotho组左心室舒张末压均低于心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组（P均＜0.01）.对照组和Ad.Klotho组左心室内压最大上升速率（＋dp/dtmax）均大于心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组（P均＜0.05）.对照组和Ad.Klotho组左心室内压最大下降速率（-dp/dtmax）亦均大于心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组（P均＜0.05）.心衰组、生理盐水组、Ad.EGFP组和Ad.Klotho组大鼠心脏体质量指数分别为（6.50±0.32）、（6.46±0.18）、（6.34±0.15）和（5.23±0.19） g×l 000/g均明显高于对照组（2.84±0.25）g×1 000/g,P均＜0.05,但Ad.Klotho组又明显低于心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组（P＜0.05）,心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组间差异则无统计学意义.心衰组、生理盐水组、Ad.EGFP组和Ad.Klotho组大鼠血清中BNP水平均明显高于对照组（P均＜0.01）,但Ad.Klotho组明显低于心衰组、生理盐水组和Ad.EGFP组（P均＜0.05）.结论 腹腔注射异丙肾上腺素可成功建立大鼠心衰模型.Klotho基因可抑制心肌纤维化、心肌肥大及胶原纤维增生.

端粒与心力衰竭心肌纤维化的相关性研究

目的:探讨端粒与心力衰竭(心衰)发病的关系,以及端粒在心脏重构、心肌纤维化中的作用。方法:将住院患者分为心衰组60例,心功能正常组60例。采用实时荧光定量(RT-PCR)方法检测外周血白细胞中端粒长度;应用ELISA方法检测上述60例患者血液标本血清中PⅠCP,PⅢNP的浓度,并与端粒长度、心功能分级及年龄等因素进行相关性分析;部分患者行心肌组织的HE染色。结果:①心衰组外周血白细胞端粒长度明显缩短;端粒长度与心功能分级呈负相关;②心衰组患者血清PⅠCP、PⅢNP含量明显增加,与心功能分级呈正相关;③心衰患者端粒长度与血清中PⅢNP呈独立的、显著的负相关;④病理切片HE染色提示,心衰患者病理切片中可见大片状胶原纤维沉积,心功能正常组少量胶原纤维沉积。结论:端粒的长度与心衰的发生发展,及心肌纤维化机制密切相关。

淋巴瘤继发副肿瘤性天疱疮相关性闭塞性细支气管炎一例并文献复习

目的探讨淋巴瘤继发副肿瘤性天疱疮(PNP)相关性闭塞性细支气管炎(BO)临床表现、诊断及治疗。方法对1例淋巴瘤合并PNP继发BO患者的临床资料及通过万方医学网和PubMed数据库检索文献得到的病例报道的临床资料进行分析。结果患者女性,44岁,主因"反复口腔溃疡2年,呼吸困难14个月"收入院。1年前口腔溃疡考虑为PNP。肺功能示严重的阻塞性通气功能障碍,支气管舒张试验阴性。胸部CT示双肺细支气管扩张。支气管肺泡灌洗液示中性粒细胞比例升高。B超引导下右腹股沟淋巴结、颈部淋巴结穿刺,病理为非霍奇金淋巴瘤。结合临床、影像、病理结果考虑诊断为淋巴瘤继发PNP和BO。予CHOP方案化疗10个周期,淋巴瘤和天疱疮缓解,但BO加重,死于呼吸衰竭。文献报道15例淋巴瘤继发PNP和BO,60%(10/15)女性患者,47%(7/15)患者的原发病是滤泡性淋巴瘤,47%(7/15)患者没有获得病理组织学诊断BO。淋巴瘤-PNP-BO作为临床综合征,PNP为首发表现的占67%(10/15)。患者从发病到死亡的时间是7～60个月。结论 BO是继发淋巴瘤合并PNP的少见并发症,PNP是大部分患者的首发表现,BO是主要死亡原因。治疗以化疗、激素联合免疫抑制剂为主,淋巴瘤和PNP可缓解,但BO进行性加重。