目的观察Klotho基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法分离、培养、扩增大鼠BMSC,采用慢病毒载体法将EGFP标志基因和Klotho基因导入BMSC中,RT-PCR检测BMSC中Klotho m RNA的表达。采用异丙肾上腺...目的观察Klotho基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法分离、培养、扩增大鼠BMSC,采用慢病毒载体法将EGFP标志基因和Klotho基因导入BMSC中,RT-PCR检测BMSC中Klotho m RNA的表达。采用异丙肾上腺素注射法制备大鼠慢性心衰模型后,随机分为Klotho-BMSC、BMSC、模型组,另设正常组,共4组,每组6只,将EGFP基因标记并导入Klotho基因的BMSC(EGFP-Klotho-BMSC)和仅标记EGFP基因的BMSC(EGFP-BMSC)分别通过大鼠尾静脉移植入Klotho-BMSC组或BMSC组大鼠体内,5×106细胞/只,模型组和正常组不做处理。移植28 d后,观察植入体内的BMSC细胞的存活及分布,TUNEL检测心肌细胞凋亡率。结果 BMSC转染Klotho后Klotho m RNA表达明显增多(P<0.05);移植28 d后,Klotho-BMSC组左心室射血分数(LVEF)比BMSC组高(P<0.05),而心肌细胞凋亡率较BMSC组进一步降低。结论 Klotho基因导入BMSC后,可增强BMSC抑制心肌细胞凋亡的作用,更有效改善心功能。展开更多
文摘目的观察Klotho基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法分离、培养、扩增大鼠BMSC,采用慢病毒载体法将EGFP标志基因和Klotho基因导入BMSC中,RT-PCR检测BMSC中Klotho m RNA的表达。采用异丙肾上腺素注射法制备大鼠慢性心衰模型后,随机分为Klotho-BMSC、BMSC、模型组,另设正常组,共4组,每组6只,将EGFP基因标记并导入Klotho基因的BMSC(EGFP-Klotho-BMSC)和仅标记EGFP基因的BMSC(EGFP-BMSC)分别通过大鼠尾静脉移植入Klotho-BMSC组或BMSC组大鼠体内,5×106细胞/只,模型组和正常组不做处理。移植28 d后,观察植入体内的BMSC细胞的存活及分布,TUNEL检测心肌细胞凋亡率。结果 BMSC转染Klotho后Klotho m RNA表达明显增多(P<0.05);移植28 d后,Klotho-BMSC组左心室射血分数(LVEF)比BMSC组高(P<0.05),而心肌细胞凋亡率较BMSC组进一步降低。结论 Klotho基因导入BMSC后,可增强BMSC抑制心肌细胞凋亡的作用,更有效改善心功能。